基因工程復(fù)習(xí)資料含答案

1、1基因工程復(fù)習(xí)題基因工程復(fù)習(xí)題一、名詞解釋：（一、名詞解釋：（10～20%20%）基因工程基因工程工具酶限制性內(nèi)切酶限制性內(nèi)切酶的Star活性PCR引物PCR擴增平臺期DNA芯片基因組文庫cDNA文庫轉(zhuǎn)化限制與修飾系統(tǒng)原位雜交：將細(xì)胞或組織的核酸固定保持在原來的位置上，然后用探針與之雜交的一種核酸分子雜交技術(shù)，該方法可較好地反映目的基因在細(xì)胞或組織中的分布和表達(dá)變化。粘性末端：雙鏈DNA被限制性內(nèi)切酶切割后，形成的兩條鏈錯開幾個堿基，而

2、不是平齊的末端。Nthern印跡雜交：將RNA進(jìn)行變性電泳后，再轉(zhuǎn)移到固相支持物上與探針雜交的一種核酸分子雜交技術(shù)，可用于檢測目的基因的轉(zhuǎn)錄水平。轉(zhuǎn)位：一個或一組基因片段從基因組的一個位置轉(zhuǎn)移到另一個位置的現(xiàn)象?；蚬こ蹋涸隗w外，用酶學(xué)方法將各種來源的DNA與載體DNA連接成為重組DNA，繼而通過轉(zhuǎn)化和篩選得到含有目的基因的宿主細(xì)胞，最后進(jìn)行擴增得到大量相同重組DNA分子的過程稱為基因工程，又稱基因克隆、DNA克隆和重組DNA等。目的基

3、因：基因工程中，那些被感興趣的、被選作研究對象的基因就叫作目的基因。連接器：人工合成的一段含有某些酶切位點寡核苷酸片段，連接到目的基因的兩端，便于基因重組中的切割和連接。轉(zhuǎn)化：受體細(xì)胞被導(dǎo)入外源DNA并使其生物性狀發(fā)生改變的過程。停滯效應(yīng)：PCR中后期，隨著目的DNA擴展產(chǎn)物逐漸積累，酶的催化反應(yīng)趨于飽和，DNA擴增產(chǎn)物的增加減慢，進(jìn)入相對穩(wěn)定狀態(tài)，即為停滯效應(yīng)，又稱平臺期。逆轉(zhuǎn)錄PCR：以mRNA為原始模板進(jìn)行的PCR反應(yīng)。PCR:即

4、聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)。在模板，引物，4種dNTP和耐熱DNA聚合酶存在的條件下，特異性地擴增位于兩段已知序列之間的DNA區(qū)段地酶促合成反應(yīng)。α互補（αcomplementation）：指在M13噬菌體DNA或PUC質(zhì)粒序列中，插入了lac啟動子操縱子基因序列以及編碼β半乳糖苷酶N端145個氨基酸的核苷酸序列（又稱α肽），該序列不能產(chǎn)生有活性的β半乳糖苷酶。感染（infection）特指以λ噬菌體、粘粒和真核細(xì)胞病毒為載體的重組DNA分子，在體

5、外經(jīng)過包裝成具有感染能力的病毒或噬菌體顆粒，才能感染適當(dāng)?shù)募?xì)胞，并在細(xì)胞內(nèi)擴增。其中，由噬菌體和細(xì)胞病毒介導(dǎo)的遺傳信息的轉(zhuǎn)移過程又稱為轉(zhuǎn)導(dǎo)（transduction）。47、轉(zhuǎn)染（transfmation）指真核細(xì)胞主動攝取或被動導(dǎo)入外源DNA片段而獲得新的表型的過程。二、填空題（20%20%）1、DNA片段重組連接的方法主要有平端連接、粘端連接、同聚尾連接、加接頭連接平端連接、粘端連接、同聚尾連接、加接頭連接。2、感受態(tài)細(xì)胞是指具有攝

6、取外源具有攝取外源DNA分子能力的細(xì)胞分子能力的細(xì)胞。321、放射免疫篩選的原理基于以下三點：(1)抗體能夠被吸附到固體支持物上；抗體能夠被吸附到固體支持物上；(2)同一個抗原可以同幾種抗體結(jié)合；同一個抗原可以同幾種抗體結(jié)合；(3)抗體能夠被抗體能夠被標(biāo)記標(biāo)記22、黏粒(cos)是質(zhì)?！删w雜合載體，它的復(fù)制子來自、COS位點序列來自，最大的克隆片段達(dá)到kb。質(zhì)粒；質(zhì)粒；?噬菌體；菌體；4523、限制性內(nèi)切核酸酶是按屬名和種名相結(jié)合的

7、原則命名的，第一個大寫字母取自_______，第二、三兩個字母取自_________，第四個字母則用___________表示。屬名的第屬名的第一個字母；種名的前兩個字母；株名一個字母；種名的前兩個字母；株名24、第一個分離的限制性內(nèi)切核酸酶是___________；而第一個用于構(gòu)建重組體的限制性內(nèi)切核酸酶是_____________。EcoK；Ecl25、切口移位(nicktranslation)法標(biāo)記DNA的基本原理在于利用____

8、_____的_______和______的作用。DNA聚合酶聚合酶I：5一3外切核酸酶；外切核酸酶；5一3合成酶合成酶26、就克隆一個基因(DNA片段)來說，最簡單的質(zhì)粒載體也必需包括三個部分：_______________、_____________、______________。另外，一個理想的質(zhì)粒載體必須具有低分子量。復(fù)制區(qū)：復(fù)制區(qū)：含有復(fù)制起點；選擇標(biāo)記：含有復(fù)制起點；選擇標(biāo)記：主要是抗性基因；克隆位點：主要是抗性基因；克隆位點

9、：便于外源便于外源DNA的插入的插入27、pUCl8質(zhì)粒是目前使用較為廣泛的載體。pUC系列的載體是通過和兩種質(zhì)粒改造而來。它的復(fù)制子來自，Amp抗性基因則是來自。pBR322和M13；pMBl；轉(zhuǎn)座子；轉(zhuǎn)座子28、噬菌體之所以被選為基因工程載體，主要有兩方面的原因：一是；二是。它在細(xì)菌中能夠大量繁殖，這樣有利于它在細(xì)菌中能夠大量繁殖，這樣有利于外源外源DNA的擴增；對某些噬菌體的擴增；對某些噬菌體(如?噬菌噬菌)的遺傳結(jié)構(gòu)和功能研究得

10、比較清楚，其大腸桿的遺傳結(jié)構(gòu)和功能研究得比較清楚，其大腸桿菌宿主系統(tǒng)的遺傳也研究得比較詳盡菌宿主系統(tǒng)的遺傳也研究得比較詳盡29、Nthern印跡和Southern印跡有兩點根本的區(qū)別：(1)__________________________________________________________________(2)________________________________________________________