腸道微生物與糞便涂片

1、微 生 態(tài) 學(xué),微生態(tài)學(xué)是二十一世紀(jì)新生命科學(xué)分支之一，這門新學(xué)科使醫(yī)學(xué)從治療醫(yī)學(xué)和預(yù)防醫(yī)學(xué)邁向保健醫(yī)學(xué)的新階段。微生態(tài)學(xué)，促進了醫(yī)學(xué)革命。正如一個國際學(xué)者所說：“沒有任何生理指標(biāo)，可以脫離與正常微生物群的關(guān)連”。,近20年重大發(fā)現(xiàn)之一,人體內(nèi)存在著一個微生態(tài)平衡與失調(diào)的動態(tài)關(guān)系。醫(yī)學(xué)任務(wù)就是如何認識平衡與失調(diào)的本質(zhì)。保持微生態(tài)平衡、矯正微生態(tài)失調(diào)，達到治病、防病和保健的目的。,正常微生物群,人的消化、吸收、營養(yǎng)、免疫都離不開這些

2、正常的生理性細菌，人體內(nèi)的細菌99%都是好菌，不但不會致病，而且會引起人體產(chǎn)生免疫力。“壞菌”僅占少數(shù)。如果正常菌減少，“壞菌”增多，就會引起各種各樣的疾病，這就是微生態(tài)失調(diào)。,,什么會使微生態(tài)失調(diào)呢？,,抗生素的發(fā)現(xiàn)，給人類的生活帶來了巨大的變化，許多危重病人從死亡線上被搶救回來。然而，隨著抗生素的廣泛使用，也給人類帶來了新的問題，（除抗生素本身毒副作用外）就是普遍存在的抗生素引起的腸道菌群失調(diào)。 其他因素引起的如激素、

3、同位素、放射線和免疫抑制劑的大量應(yīng)用，也可造成導(dǎo)致菌群失調(diào)。,抗生素應(yīng)用,抗生素應(yīng)用,微生態(tài)失調(diào)的主要原因是抗生素的不合理應(yīng)用。 →強調(diào)促菌的積極作用。促菌是促進正常有益菌、排斥、抑制、消滅有害菌，達到微生態(tài)平衡?？咕鷦t是殺滅致病菌的同時也殺滅了有益菌，破壞了正常的微生態(tài)平衡。,,1.有益菌: 或稱共生菌，雙歧菌、 乳桿菌、優(yōu)桿菌等2.中間菌：如腸球菌、大腸桿菌、

4、 擬桿菌 有益，也有害3.有害菌：如綠膿桿菌、葡萄球菌、 梭狀芽孢桿菌,一、糞涂片法的臨床意義,腸道菌群的種類 正常健康人的糞便其細菌總數(shù)約為1010個/g左右，按細菌種的分類可達幾百種，但臨床常見的主要菌種約數(shù)十種。 正常健康人的糞便中占絕大多數(shù)是專性厭氧菌（簡稱厭氧菌）約占總數(shù)的99％，占少數(shù)的是兼性厭氧菌、專性需氧菌及微需氧菌。,腸道菌群中的主要厭氧菌

5、,有芽孢桿菌一個種 G＋ 梭狀芽孢桿菌屬 產(chǎn)氣莢膜梭菌 破傷風(fēng)梭菌 艱難梭菌 肉毒梭菌 無芽孢桿菌 G＋ 雙歧桿菌屬 分叉桿菌 青春 長 嬰兒雙歧桿菌 丙酸桿菌屬

6、 痤瘡丙酸桿菌 優(yōu)桿菌屬 遲緩優(yōu)桿菌 乳桿菌屬 嗜酸乳桿菌 保加利亞乳桿菌 放線菌屬 衣氏放線菌

7、 G- 擬桿菌屬 脆弱擬桿菌 多形擬桿菌 梭桿菌屬 核梭桿菌 壞死梭桿菌 普氏菌屬 產(chǎn)黑色素普氏菌

8、 卟啉單胞菌屬 牙齦卟啉單胞菌,糞涂片法的臨床意義,正常微生物的平衡與失調(diào)要通過現(xiàn)代化技術(shù)檢測才能確定，如對正常微生物群要進行定性、定量和定位檢測，這些技術(shù)比較復(fù)雜。 而此時一張大便涂片往往起到關(guān)鍵作用，有時竟可以挽救病人的生命！,二、糞便直接涂片法的 優(yōu)缺點,設(shè)備簡單，僅需一臺顯微鏡、載玻片和革蘭染液；操作方法簡單；花費時間短（一般15min即可得出結(jié)果）形象直觀，直接了解糞便菌群的“像”，熟練者對菌群

9、失調(diào)有較高的準(zhǔn)確性。,糞便直接涂片法的 優(yōu) 缺 點,檢驗者必須有一定的經(jīng)驗，否則易判斷錯誤；主要是定性檢查，要求對菌群失調(diào)進行分度，初學(xué)者往往難以區(qū)分，致確定分度較困難。,解 決 辦 法,按照圖譜介紹方法，使操作標(biāo)準(zhǔn)化，以圖譜的菌群圖片作對照，指導(dǎo)判斷；多看正常人的和菌群失調(diào)病人的糞便涂片，經(jīng)過一段時間就能掌握自如。總之糞便涂片能快速診斷菌群失調(diào)，為早期治療提供線索。,三、顯微鏡油鏡檢查方法,1.觀察涂片和染色情況

10、2.總覽細菌總數(shù) 可通過“比例概數(shù)法”進行判斷（見表1）,表1,,3.觀察革蘭陽性、陰性桿菌 及球菌的比例改變（5級變化表2）,表2,計數(shù)方法是：,選定有代表性的視野部分區(qū)域作細菌分類計數(shù)，縮小視野數(shù)200個以上的細菌以求得其比例。對于初學(xué)者或為求得標(biāo)準(zhǔn)值時可通過紙片分割視野的方法，五個小孔上下左右中直徑0.2－0.3cm進行計數(shù)換算出百分率。這樣比較客觀。一般計數(shù)1000個細菌換算出百分率以求得各年齡組正常腸道菌群各類

11、細菌的百分率。 （評估見表3）,表3,胎 便,,12h嬰兒便,,母乳喂養(yǎng)1－2d后通?？尚谐梢粋€典型的腸菌群，開始以革蘭陰性球/桿菌多見,,2d嬰兒大便,,3d嬰兒大便,,5d 嬰兒大便,5d嬰兒大便，革蘭陽性桿菌可見明顯的分叉，革蘭陰性桿菌有濃染（似擬桿菌，也開始有少量的革蘭陰性球桿菌和革蘭陽性球菌,,3個月幼兒正常糞便涂片,6個半月母乳喂養(yǎng)幼兒正常糞便涂片,健康青年之

12、糞便涂片,健康壯年之糞便涂片,63歲正常女性糞便涂片,71歲男性老年人糞便涂片,76歲男性高血壓腦病癡呆，臥床2年，營養(yǎng)良好，飲食規(guī)律（屬無明顯異常改變的老年腸道菌群像）,四、菌群失調(diào)的分度標(biāo)準(zhǔn),腸道菌群的數(shù)量與各種菌種的比例發(fā)生較大幅度的變化，超出正常范圍并由此產(chǎn)生的一系列臨床表現(xiàn)，稱為：腸道菌群失調(diào)癥。根據(jù)菌群失調(diào)的嚴(yán)重程度可分為三度。,菌群失調(diào)的分度標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ度菌群失調(diào)：是一類較輕的失調(diào)，誘 因去除后即可恢復(fù)正常，革蘭陽性、陰性菌

13、比例輕度變化。Ⅱ度菌群失調(diào)：是一類中度的失調(diào)，呈現(xiàn)為慢性病程，菌群比例明顯改變。,Ⅰ度菌群失調(diào),Ⅰ度菌群失調(diào),Ⅰ度菌群失調(diào),Ⅱ度菌群失調(diào),Ⅱ度菌群失調(diào),Ⅱ度菌群失調(diào),Ⅱ度菌群失調(diào),,Ⅲ度菌群失調(diào)：是一類嚴(yán)重失調(diào)，又稱為菌群交替癥或二重感染。原有的腸道菌很少，而少見的細菌成為優(yōu)勢菌。菌群中各種細菌比例發(fā)生非常明顯變化。菌群失調(diào)的另一特殊表現(xiàn) 形式，發(fā)生定位轉(zhuǎn)移,,Ⅲ度菌群失調(diào),Ⅲ度菌群失調(diào),Ⅲ度菌群失調(diào),五、糞便直接涂片報告方