2012cb945100 血管發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的遺傳及表觀遺傳機制

1、項目名稱：血管發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的遺傳及表觀遺傳血管發(fā)育和穩(wěn)態(tài)維持的遺傳及表觀遺傳機制機制首席科學家：楊曉楊曉中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院中國人民解放軍軍事醫(yī)學科學院起止年限：2012.12012.1至2016.82016.8依托部門：總后勤部衛(wèi)生部總后勤部衛(wèi)生部中特定時期可能存在的甲基化酶或去甲基化酶，克隆得到這些基因，通過體外合成mRNA后進行注射以驗證這些基因在血管發(fā)生過程中的作用。通過構建表達甲基化酶或者去甲基化酶的轉基因魚，結合體

2、外生化實驗驗證這些甲基化酶或者去甲基化酶在血管形成不同時期的生理功能。此外，通過轉基因方法在血管內皮細胞中特異性表達綠色或紅色熒光蛋白（GFP或RFP），結合長時間在體雙光子或共聚焦顯微鏡成像技術，實時記錄和跟蹤中腦內的所有血管的三維形態(tài)變化。進而，運用圖像分析、流體力學模型分析、細胞生物學、分子生物學等手段，研究腦血管網(wǎng)絡發(fā)生和發(fā)育的宏觀規(guī)律和分子機制。2、探討血管內皮細胞特化和定向分化的分子基礎。利用多種特異性標記血管系統(tǒng)的轉基因魚

3、和大規(guī)模誘變技術篩選影響血管發(fā)生和造血系統(tǒng)的突變體，通過共聚焦顯微鏡進行實時觀察并比較野生型與突變體中血管發(fā)生和造血過程的差異，研究血液血管母細胞分化成血管內皮細胞和血細胞的譜系關系及其調控網(wǎng)絡。同時，結合內皮細胞特異性基因敲除技術，研究主動脈腹側內皮細胞定向分化為造血干細胞的分子調控機理。此外，尋找高等哺乳動物小鼠的冠脈內皮細胞起源，利用CreLoxP技術揭示Notch信號通路調控冠脈發(fā)生以及內皮細胞生物學活性的分子機制，闡明心外膜促

4、進冠脈發(fā)生的重要生理功能和機制。3、在重要信號通路影響血管重塑的遺傳和表觀遺傳機制研究方面，主要利用基于CreLoxP系統(tǒng)的小鼠組織特異性條件基因敲除技術，構建血管內皮細胞、血管平滑肌細胞、腦血管內皮細胞特異性基因敲除小鼠，深入研究不同類型心血管細胞如何對來自自身和環(huán)境的TGF?和VEGF信號做出精確反應，以及這種反應性異常如何導致血管重塑異常以及心血管疾病的發(fā)生。同時篩選受TGF?調控的miRNA，并對這些miRNA調節(jié)內皮細胞功能、