奶粉中蛋白質(zhì)含量測定

1、奶粉中蛋白質(zhì)含量測定奶粉中蛋白質(zhì)含量測定1.前言：前言：在蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域中，用一種快速準(zhǔn)確的方法來檢測蛋白濃度是必不可少的。與雙縮脲法、紫外吸收法相比，新建立的考馬斯亮藍(lán)法在許多情況下已成為定量檢測蛋白濃度的首選方法。同時，與傳統(tǒng)的Lowry法相比，該法具備更易操作，更快，更靈敏以及受其它試劑和非蛋白成分干擾較小等優(yōu)勢。其檢測原理是基于染料考馬斯藍(lán)G250和蛋白質(zhì)之間可以形成特異性結(jié)合。詳細(xì)的研究表明[1]，該染料可以自由存在于四種不同

2、的離子形式中。相比之下，染料更多的陰離子形式與蛋白質(zhì)結(jié)合且結(jié)合后顯藍(lán)色，在590nm左右具有最大吸收。因此通過測定染料中藍(lán)色離子的量就可以折算出蛋白質(zhì)的量，這通?？梢栽?95nm處測定吸光度獲得。2.實驗方案及原理：實驗方案及原理：（1）①實驗流程：②實驗前期準(zhǔn)備：前期原料配備前期原料配備標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制樣品測定Ⅲ、蛋白質(zhì)濃度為C=（A－d）aⅣ、樣品蛋白質(zhì)含量計算公式為10C1500100%。3.主要試劑和儀器：主要試劑和儀器：考馬斯亮藍(lán)

3、G250，去離子水，標(biāo)準(zhǔn)牛血清蛋白（BSA）移液管20ml兩支，50ml一支，15個25ml比色管，石英比色皿一對，日本島津UV—vis紫外分光光度儀等。4.4.實驗結(jié)果與數(shù)據(jù)分析：實驗結(jié)果與數(shù)據(jù)分析：（1）通過實驗測出每份試劑蛋白質(zhì)色素結(jié)合物在595nm波長下的最大光吸收A，設(shè)計表格如下：（2）通過紫外分光光度計測得樣品中蛋白質(zhì)色素結(jié)合物在595nm波長下的最大光吸收A，設(shè)計表格如下：123平均值A(chǔ)Lg1cm1（3）通過對上述數(shù)據(jù)利用