ts與5-fu治療的關(guān)系

1、國外學(xué)者發(fā)現(xiàn)胸苷酸合成酶(TS)是5FU產(chǎn)生耐藥的一個(gè)重要酶，癌組織中TS的表達(dá)水平可以用于指導(dǎo)治療并與患者的預(yù)后相關(guān)，TS高表達(dá)患者對(duì)5FU的敏感性明顯高于低表達(dá)者，TS低表達(dá)容易對(duì)5FU產(chǎn)生耐藥性。胸苷磷酸化酶(Thyinephosphylase，TP)、胸苷酸合成酶(Thyylatesynthase，TS)和二氫嘧啶脫氫酶(dihyyriinedehydrogenase，DPD)是細(xì)胞核酸代謝過程中起重要作用的三個(gè)酶，并且以不同的

2、角度與5FU相互作用而影響5FU的療效。TP可逆性地催化胸腺嘧啶核苷轉(zhuǎn)變?yōu)?脫氧核糖1磷酸和胸腺嘧啶，即通過催化胸苷和胸腺嘧啶的相互轉(zhuǎn)化而穩(wěn)定細(xì)胞內(nèi)胸苷的水平。進(jìn)入體內(nèi)的5FU需經(jīng)過TP的作用被活化后才具有抗癌作用，TP還具有血管生成活性，與PDECGF是同一基因的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物。TS是合成胸苷酸的限速酶，催化dUMP轉(zhuǎn)化為dTMP，而dTMP是DNA合成和修復(fù)所必須的胸腺嘧啶核苷酸的唯一來源，所以TS在細(xì)胞增生過程中發(fā)揮重要作用。TS也被證

3、明是5FU作用的靶向酶，5FU就是通過抑制TS活性阻斷DNA合成而發(fā)揮抗腫瘤的作用。DPD是尿嘧啶和胸腺嘧啶分解過程中的第一限速酶，可降低用于DNA合成的尿嘧啶和胸腺嘧啶的水平而影響DNA的合成。DPD同時(shí)也是降解5Fu的最主要的限速酶，體內(nèi)5一FU用量的85%由此酶降解。...胸苷酸合成酶對(duì)結(jié)腸癌胸苷酸合成酶對(duì)結(jié)腸癌5－Fu化療耐藥影響的前瞻性研究化療耐藥影響的前瞻性研究【摘要摘要】目的探討結(jié)腸癌對(duì)5Fu產(chǎn)生耐藥的機(jī)理從細(xì)胞培養(yǎng)水平

4、上進(jìn)一步論證胸苷酸合成酶對(duì)5Fu化療產(chǎn)生耐藥的影響。方法應(yīng)用MTT法對(duì)體外培養(yǎng)的30例結(jié)腸癌細(xì)胞進(jìn)行5Fu藥敏試驗(yàn)，再應(yīng)用SP免疫組化法對(duì)30例結(jié)腸癌進(jìn)行胸苷酸合成酶檢測(cè)，然后將兩個(gè)結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果胸苷酸合成酶高表達(dá)組體外培養(yǎng)的結(jié)腸癌細(xì)胞對(duì)5Fu的敏感性明顯低于TS低表達(dá)組。結(jié)論胸苷酸合成酶表達(dá)程度的高低對(duì)臨床結(jié)腸癌患者化療藥物的選擇有一定的指導(dǎo)意義?！娟P(guān)鍵詞關(guān)鍵詞】結(jié)腸癌MTT免疫組織化學(xué)胸苷酸合成酶（TS）5Fu細(xì)胞培養(yǎng)T

5、heInfluenceofThyylateSynthase(TS)inColonCarcinomaused5FuCureProspectiveStudyCHENXinLINWenboSHENYouzhuDepartmentofPathologyFujianProvincialHospitalFuzhou350001ChinaNananHospitalofFujianProvince；1stHospitalofZhaoancityA

6、bstract：ObjectiveToinvestigatethereasonofthe5FudrugresistancetoprovedeeplytheinfluenceofTSincoloncarcinomawiththelevelofcellculture.MethodsToproceedthe5FudrugsusceptibilitytestwithMTTmethodto30casesinvitroculturecolonc

7、arcinomacelltobeexaminedbySPimmunohistochemicalstainingobservedtheexpressionofTSthencomparewiththem.ResultsInvitroculturecoloncarcinomacellscrespondinghighexpressionofTSthesenilityto5Fudelayobviouslythanthelowexpress

8、ion.ConclusionThepositiveexpressionofTShasainstructionsignificanceincoloncarcinomapatientsattheelectionofchemistrydrug.洗35min；加SP溶液，10min，PBS洗35min；DAB顯色，蘇木素復(fù)藍(lán)，中性樹膠封片。1.3.3結(jié)果判斷TS蛋白表達(dá)陽性區(qū)域在細(xì)胞漿中出現(xiàn)棕黃色的陽性顆粒。隨機(jī)選取4個(gè)中倍視野（1010），計(jì)

9、算400個(gè)細(xì)胞漿中陽性細(xì)胞的百分?jǐn)?shù)，當(dāng)陽性細(xì)胞數(shù)目75％為（）。計(jì)算每例結(jié)腸癌細(xì)胞體外培養(yǎng)的5Fu藥敏試驗(yàn)的抑制率（％）：抑制率（％）=（1試驗(yàn)孔OD540／對(duì)照孔OD540）100％2結(jié)果結(jié)果30例結(jié)腸癌組織TS蛋白表達(dá)均為陽性，根據(jù)腫瘤細(xì)胞陽性數(shù)分為兩組：高表達(dá)組（～），低表達(dá)組（～），見表1。表1TS蛋白高表達(dá)組與低表達(dá)組比較（略）表2TS表達(dá)與體外培養(yǎng)的癌細(xì)胞5Fu抑制率的關(guān)系（略）從表2可以看出TS高表達(dá)組的體外培養(yǎng)癌細(xì)胞

10、5Fu抑制率明顯低于低表達(dá)組，差別具有統(tǒng)計(jì)上的意義（P0.05）。3討論討論5Fu廣泛應(yīng)用于腸道惡性腫瘤的化學(xué)治療，由于它療效確切，一直處于其他化療藥無法替代的地位，但一些結(jié)腸癌病例對(duì)5Fu為主的化療并不敏感，其對(duì)5Fu單藥治療的有效率僅20％［3］，本文想通過體外細(xì)胞培養(yǎng)，從活細(xì)胞水平上論證胸苷酸合成酶對(duì)結(jié)腸癌5Fu化療耐藥的影響。MTT法的原理是以黃色的四氮唑鹽可被活細(xì)胞線粒體中的與輔酶NADP相關(guān)的脫氫酶過厚，即接受氫原

11、子而成為不溶性的甲鉺替顆粒，而死細(xì)胞無此功能，無甲鉺替顆粒形成，因此用酶標(biāo)儀測(cè)定的OD540值越高，說明腫瘤細(xì)胞的耐藥性越強(qiáng)，藥物抑制率越低。胸苷酸合成酶（TS）是由兩個(gè)相同亞單位組成的Ⅱ聚體蛋白質(zhì)，每個(gè)亞單位的分子量為36Kda，Hi等研究發(fā)現(xiàn)TS基定位于為類第18號(hào)染色體上［1］。TS的功能是催化尿嘧啶脫氧核苷（dUMP）甲基化為胸腺嘧啶脫氧核苷（dTMP），這是dTMP從頭合成途經(jīng)中關(guān)鍵的步驟，而dTMP又是DNA的生物合成所必需

12、的，因此，通過對(duì)TS進(jìn)行抑制就能達(dá)到抑制DNA的生物合成進(jìn)而抑制細(xì)胞生長(zhǎng)或增殖的作用。5Fu正是通過對(duì)TS進(jìn)行抑制而發(fā)揮其抗癌活性的。5Fu進(jìn)入體內(nèi)后經(jīng)過一系列酶促反應(yīng)，最后轉(zhuǎn)變?yōu)槠浠钚源x產(chǎn)物5氟尿嘧啶脫氧核苷（5FudUMP），它在輔因子510亞甲基四氫葉酸存在下，能與TS結(jié)合形成等價(jià)的三聯(lián)復(fù)合物TSFdUMPCH2FH4，影響dUMP與TS的結(jié)合，從而抑制了dTMP的合成，使DNA的合成受限，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)受到抑制甚至