淋巴瘤中EB病毒潛伏膜蛋白1基因多態(tài)性研究.pdf

1、背景和目的：EB病毒（Epstein-Barr Virus，EBV）潛伏膜蛋白1（latentmembrane protein，LMP1）基因是公認的EBV致癌基因，在EBV相關腫瘤的發(fā)病中具有重要作用。LMP1基因存在多種變異，其變異與腫瘤發(fā)生的關系一直是其致癌機制研究的熱點，但目前并未取得一致結論。以往對中國LMP1基因多態(tài)性的研究，多以鼻咽癌為研究對象，有關淋巴瘤的研究相對較少，且多數(shù)研究只針對LMP1單一基因變異進行檢測。本研究

2、檢測青島地區(qū)EBV陽性淋巴瘤和正常人群中LMP1全序列，旨在了解該地區(qū)淋巴瘤中LMP1基因變異特征，探討LMP變異與淋巴瘤發(fā)生的相關性，為進一步明確LMP1基因變異與腫瘤發(fā)生的相關性提供實驗依據(jù)。
　　方法：用PCR和DNA測序檢測80例EBV陽性淋巴瘤組織（結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤47例、霍奇金淋巴瘤26例、彌漫大B細胞淋巴瘤2例、T細胞淋巴瘤5例）和70例EBV陽性健康人群咽漱液標本中LMP1基因序列，應用DNAStar軟件

3、對LMP1基因核苷酸及氨基酸序列進行對比分析，應用MEGA軟件繪制系統(tǒng)進化樹，同時與EBV標準株B95-8序列比較，根據(jù)其特征性改變對變異進行分類。比較淋巴瘤和健康人群之間以及不同淋巴瘤之間LMP1基因變異型的分布情況。
　　結果：①與標準株B95-8相比，所有150例標本中LMP1基因均出現(xiàn)序列變異，包括單核苷酸突變、插入、缺失和重復序列變化。根據(jù)系統(tǒng)樹及LMP1編碼區(qū)基因特征性突變，共發(fā)現(xiàn)3種主要亞型（China1、China

4、2和Med-）及少數(shù)不同亞型的重組病毒株，3種亞型在非編碼區(qū)和重復序列區(qū)也呈現(xiàn)特征性改變。N端XhoI位點缺失變異即XhoI(-)和C端30 bp缺失即del-LMP1變異與LMP1亞型及重組病毒株呈不同的對應關系。
　　②China1、China2和Med-亞型在淋巴瘤中的檢出率分別為85.0％（68/80）、6.3%（5/80）和7.5%（6/80），在健康人群中的檢出率分別為65.7%（46/70）、5.7%(4/70)和2

5、1.4%（15/70），另有1例（2.1%）淋巴瘤和5例（7.2%）健康人群毒株為不同亞型的重組病毒株。LMP1亞型在2種人群中的分布有顯著性差異（P=0.014）。XhoI(-)和del-LMP1在淋巴瘤中的檢出率（92.5%和85.0%）高于健康人群（74.3%和67.1%），差異均有顯著性（P=0.002，0.010）。
　　③LMP1各種變異類型在47例結外鼻型NK/T細胞淋巴瘤和26例霍奇金淋巴瘤之間的分布無顯著性差異。