兒童淋巴瘤和傳染性單核細胞增多癥中EB病毒潛伏膜蛋白1基因多態(tài)性.pdf

1、背景和目的： EB病毒（Epstein-Barr Virus，EBV）潛伏膜蛋白1（latent membrane protein，LMP1）基因是公認的EBV致癌基因，LMP1基因變異與EBV相關(guān)腫瘤發(fā)生的相關(guān)性一直備受關(guān)注。以往有關(guān)LMP1基因變異與EBV相關(guān)淋巴瘤的研究，多針對成人淋巴瘤，且未獲得一致結(jié)論。本研究同時檢測和比較青島地區(qū)兒童惡性淋巴瘤和EBV相關(guān)良性疾病即傳染性單核細胞增多癥（infectious mononucle

2、osis，IM）中LMP1基因變異，旨在了解該地區(qū)兒童淋巴瘤和IM中LMP1基因變異情況，探討LMP1變異與兒童淋巴瘤發(fā)生的關(guān)系，為明確LMP1基因變異與腫瘤發(fā)生的相關(guān)性提供實驗依據(jù)。
　　方法：采用PCR和DNA測序檢測66例EBV陽性兒童淋巴瘤組織（26霍奇金淋巴瘤和40例非霍奇金淋巴瘤）和53例EBV陽性IM血液標本中LMP1基因序列，應用 DNAStar軟件對 LMP1基因核苷酸及氨基酸序列進行對比分析，應用 MEGA軟件

3、繪制系統(tǒng)進化樹，同時與EBV標準株B95-8序列比較，根據(jù)其特征性改變對變異進行分類。比較兒童淋巴瘤和 IM之間以及不同淋巴瘤之間 LMP1基因變異型的分布情況。
　　結(jié)果：①與標準株B95-8相比，所有119例標本中LMP1基因均出現(xiàn)序列變異，包括單核苷酸突變、插入、缺失和重復序列變化。根據(jù)系統(tǒng)樹及LMP1基因外顯子區(qū)特征性突變，共發(fā)現(xiàn)3種主要亞型（China1、China2和Med-）及少數(shù)不同亞型的重組病毒株，3種亞型在非編

4、碼區(qū)和重復序列區(qū)也呈現(xiàn)特征性改變。LMP1各亞型N端XhoI位點缺失變異即XhoI(-)和C端30 bp缺失即del-LMP1變異呈不同的對應關(guān)系。②兒童淋巴瘤中 China1、China2和 Med-亞型在的檢出率分別為84.8％（56/66）、7.6%（5/66）和6.1%（4/66），IM中3種亞型的的檢出率分別為67.9%（36/53）、5.7%(3/53)和22.6%（12/53），另有1例（1.5%）淋巴瘤和2例（3.8%）

5、 IM毒株為不同亞型的重組病毒株。LMP1亞型在2種人群中的分布不同，China1在淋巴瘤中的檢出率高于IM，差異有統(tǒng)計學意義（P=0.036）。XhoI(-)和del-LMP1在淋巴瘤中的檢出率（93.9%，62/66和84.8%，56/66）高于IM（75.5%，40/53和69.8%，37/53），差異均有統(tǒng)計學意義（P=0.004，0.049）。③LMP1各種變異類型在26霍奇金淋巴瘤和40例非霍奇金淋巴瘤之間的分布無統(tǒng)計學意義