動物營養(yǎng)學(xué)研究現(xiàn)狀及展望-共軛亞油酸對脂多糖刺激斷奶仔豬炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)的調(diào)控

1、農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,共軛亞油酸對脂多糖刺激斷奶仔豬炎性細(xì)胞因子基因表達(dá)的調(diào)控,賴長華 中國農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)業(yè)部飼料工業(yè)中心2005.05,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,報(bào)告內(nèi)容,研究背景試驗(yàn)?zāi)康牟牧吓c方法試驗(yàn)結(jié)果結(jié)論,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,炎性細(xì)胞因子,炎性細(xì)胞因子：IL-1β、IL-6

2、 和 TNF-α 可介導(dǎo)系統(tǒng)的炎癥反應(yīng)，如發(fā)燒、食欲減退、降解代謝加強(qiáng)、合成代謝減弱但肝臟急相期蛋白合成增多 適量產(chǎn)生：有利于機(jī)體抵御感染 過量產(chǎn)生：對機(jī)體造成不同程度的損傷,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,特殊的結(jié)構(gòu) 廣泛的生物學(xué)功能,共軛亞油酸（CLA）,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,對實(shí)驗(yàn)動物或人類的研究證明，CLA抑制腫瘤等炎性疾病的發(fā)生

3、 降低體脂沉積 增強(qiáng)免疫功能 免疫應(yīng)激調(diào)控,共軛亞油酸的研究現(xiàn)狀,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,核受體途徑過氧化物酶體增殖物激活受體γ（PPARγ） 防止黏膜炎癥 調(diào)控細(xì)胞因子的產(chǎn)生,共軛亞油酸的調(diào)控機(jī)理,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,,核受體途徑,CLA,PP,,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,試驗(yàn)?zāi)康?通過給

4、斷奶仔豬注射大腸桿菌脂多糖（LPS）造成急性炎癥反應(yīng)狀態(tài)，探討CLA對LPS刺激仔豬炎性細(xì)胞因子的影響及其調(diào)控機(jī)理,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,動物試驗(yàn) 選擇28 d 斷奶雜交仔豬24頭，采用2?2因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)分為4個(gè)處理（每處理6個(gè)重復(fù)），即日糧類型（2％大豆油或2％CLA）和免疫應(yīng)激（注射LPS或生理鹽水）。第14和21天腹膜注射LPS（100 ug/kg BW）和等量生理鹽水，并于

5、注射后3 h 采血分離血漿，第29 d 屠宰仔豬取脾臟和胸腺，用于提取總RNA,材料與方法,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,表1 基礎(chǔ)日糧配方與營養(yǎng)成分,注：試驗(yàn)日糧中，CLA等量替代大豆油,,,,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,體外試驗(yàn) 分離仔豬外周血淋巴細(xì)胞，用RPMI1640培養(yǎng)液制成懸浮液，培養(yǎng)于24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，分別加入亞

6、油酸（LA，對照）、c9, t11-CLA、t10, c12-CLA以及二者的1:1混合物，脂肪酸在培養(yǎng)體系中的終濃度為100 ?mol/L 將細(xì)胞置于5％CO2、37℃下培養(yǎng)24 h，然后加入LPS（終濃度10 μg/mL），3 h后取細(xì)胞上清-20?C凍存。細(xì)胞沉淀物用于提取核蛋白和總RNA,材料與方法,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,測定指標(biāo)及方法 血漿及細(xì)胞上清液細(xì)胞因子的含量

7、 淋巴細(xì)胞PPAR γ的活性 脾臟與胸腺細(xì)胞因子和淋巴細(xì)胞PPAR γ mRNA相對含量 統(tǒng)計(jì)方法 用SAS軟件的GLM模型進(jìn)行兩因子方差分析。模型主效應(yīng)包括日糧類型和免疫刺激，以及二者的互作效應(yīng),材料與方法,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,,試驗(yàn)結(jié)果,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,表2 CLA與LPS刺激對血漿細(xì)胞因子（pg/mL）的影響,,

8、,,,,,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,表3 CLA與LPS刺激對脾臟炎性細(xì)胞因子和PPARγ mRNA表達(dá)的影響,,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,表4 CLA與LPS刺激對胸腺炎性細(xì)胞因子和PPAR mRNA表達(dá)的影響,,,,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,圖1 c9,t11-CLA與t10,c12-CLA對外周血淋巴細(xì)胞炎

9、性細(xì)胞因子產(chǎn)生量的影響,(pg/mL),a,b,c,bc,a,b,c,bc,a,b,c,bc,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,圖2 c9,t11-CLA與t10,c12-CLA對外周血淋巴細(xì)胞炎性細(xì)胞因子mRNA表達(dá)量的影響,b,a,ab,a,a,a,b,ab,a,a,b,ab,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,圖3 c9,t11-CLA與t10,c12-CLA對外周

10、血淋巴細(xì)胞15d-PGJ2的影響,a,a,b,b,15d-PGJ2 (pg/mL）,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,圖4 c9,t11-CLA與t10,c12-CLA對外周血淋巴細(xì)胞PPARγmRNA表達(dá)量及活性的影響,a,b,c,b,a,b,c,bc,農(nóng) 業(yè) 部 飼 料 工 業(yè) 中 心 M A F I C,共軛亞油酸及其主要活性成分c9,t11-CLA與t10,c12-CLA都抑制了炎性