儀器分析-氣相色譜法基礎(chǔ)

1、1,第二章 氣相色譜法(1),Gas Chromatography(GC),2,3,氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀 GCMS-QP2010E,4,1. 色譜法的產(chǎn)生 色譜法是一種分離技術(shù)，它是俄國植物學(xué)家茨維特(M.Tswett)1906年創(chuàng)立的。他分離植物葉子中的色素時，將葉片的石油醚（飽和烴混合物）提取液倒入玻璃管中，柱中填充CaCO3粉末（CaCO3 有吸附能力)，用純石油醚洗脫（淋洗）。,一、色譜分析法簡介,,

2、67;2-1 色譜分析法概述,5,色素受兩種作用力影響: 柱內(nèi)填充CaCO3 ，其吸附作用使色素在柱中停滯下來；,同時，由于被石油醚流動并溶解，使色素向下移動；,各種色素結(jié)構(gòu)不同，受兩種作用力大小不同，經(jīng)過一段時間洗脫后，色素在柱子上分開，形成了各種顏色的譜帶，這種分離方法稱為色譜法。,6,7,8,液相色譜：液體作流動相，傳統(tǒng)的液相色譜，由 于流速慢，分析速度很慢。通過加

3、 壓， 使其流速加快，1969年HPLC發(fā) 展（高壓液相色譜），液相色譜被廣 泛應(yīng)用。,氣相色譜：氣體作流動相，1952年產(chǎn)生氣相色 譜，是色譜法一項(xiàng)革命性進(jìn)展。,9,隨著被分離樣品種類的增多，該方法廣泛地用于無色物質(zhì)的分離，因而，“色譜”名稱中的“色”失去了原有的意義，但“色譜”這

4、一名稱沿用至今。,我國在色譜分析領(lǐng)域的研究起于1954年，由中 國科學(xué)院大連化學(xué)物理研究所首先開發(fā)。經(jīng)過幾十年的努力，我國色譜基礎(chǔ)理論研究和應(yīng)用技術(shù)研究方面具有特色，居世界領(lǐng)先行列。,大連依利特分析儀器有限公司http://www.elitehplc.com/,10,1. 按流動相和固定相狀態(tài)分類氣體作流動相 氣相色譜（GC）（1）氣固色譜：氣體作流動相，固體吸附劑作固 定相。（2）氣液色譜：氣體作流動相

5、，固定液作固定相。,二、色譜分析法分類,,11,2. 按固定相的固定方式分類,（1）柱色譜： 填充柱色譜：固定相填充到柱管內(nèi); 毛細(xì)管柱色譜：把固定相涂在毛細(xì)管內(nèi)壁上， 中間是空的。（2）紙色譜：濾紙為固定相的色譜法，流動相是 含一定比例水的有機(jī)溶劑，樣品在

6、 濾紙上展開進(jìn)行分離。（3）薄層色譜：把固體固定相壓成或涂成薄膜的 色譜法。,12,3. 按分離原理分類,（1）吸附色譜：利用吸附劑表面對被分離的各組分吸附能力不同進(jìn)行分離。（2）分配色譜：利用不同組分在兩相分配系數(shù)或溶解度不同進(jìn)行分離。（3）離子交換色譜：利用不同組分對離子交換劑親和力不同進(jìn)行分離。（4）空間排阻色譜：利用凝膠對分子的大小和形狀

7、不同的組分所產(chǎn)生的阻礙作用不同而進(jìn)行分離的色譜法?！?13,三、色譜分析法的特點(diǎn),14,3. 分析速度快 幾分鐘、幾十分鐘可完成一個分析周期，一次分析可以同時多個組分。,4. 應(yīng)用廣泛 氣體、液體、固定樣品均可。 色譜法幾乎能分析所有的化學(xué)物質(zhì)，廣泛用于無機(jī)、有機(jī)、生物、食品、醫(yī)藥、環(huán)境等分析任務(wù)。,15,四、色譜分離過程與常用術(shù)語,1. 色譜分離過程（1）色譜基本過程,16,17,（2）色譜

8、分離過程,現(xiàn)以填充柱內(nèi)進(jìn)行分配色譜說明色譜分離過程。下圖表示A、B兩組分在色譜柱內(nèi)的分離過程示意圖。將混合物樣品一次注入色譜柱后，流動相連續(xù)不斷地流經(jīng)色譜柱：,18,19,2. 色譜圖（流出曲線）,試樣各組分經(jīng)色譜柱分離，從色譜柱流入檢測器，并將組分濃度（質(zhì)量）變化轉(zhuǎn)換成電壓（電流）信號，并記錄下來。 將從進(jìn)樣開始到分析結(jié)束，檢測信號隨時間變化的曲線，稱色譜圖。 因其記錄了各個組分流出色譜柱的情況，又

9、叫色譜流出曲線。,20,,,21,3.色譜圖中的基本術(shù)語,（2）基線 當(dāng)沒有待測組分進(jìn)入檢測器時（僅有流動相），檢測器的噪音隨時間的變化關(guān)系。圖中OA’ 穩(wěn)定情況下，基線是一條直線，基線上下波動稱為噪音。,（1）色譜峰 某組分的響應(yīng)信號隨時間的變化曲線。 正常：對稱鐘形（符合高斯分布） 不正常：產(chǎn)生拖尾峰,22,（3）色譜峰的高度h,色譜

10、峰最高點(diǎn)與基線之間的距離，可用mm ,mV， mA表示。峰的高低與組分濃度有關(guān)，峰越高越窄越好。,23,（4）色譜峰區(qū)域?qū)挾?色譜峰的區(qū)域?qū)挾仁墙M分在色譜柱中譜帶擴(kuò)展的函數(shù)，它反應(yīng)了色譜操作條件的動力學(xué)因素，常用表示方法有三種：,A 標(biāo)準(zhǔn)偏差— σ 色譜峰是高斯分布，在0.607倍峰高處有一拐點(diǎn)。標(biāo)準(zhǔn)偏差即0.607倍峰高處色譜峰寬的一半。,24,,,,σ,,25,B 峰底寬Wb 色譜峰兩側(cè)拐點(diǎn)所作

11、切線在基線上的距離。 下圖中IJ,峰高一半處色譜峰的寬度。,C 半峰寬,下圖中GH,26,27,色譜峰與基線延長線所包圍的面積。 對于對稱的色譜峰： 對于非對稱的色譜峰：,（5） 色譜峰面積A,28,,（6）色譜保留值,保留值:試樣中各組分在色譜柱中滯留時間的數(shù)值，反映了組分分子與固定相分子作用力大小；,保留值可用時間t 和所消耗流動相的體積V來表示；,組分與固定相作用越強(qiáng)，則在柱中滯留的時間越長

12、，消耗的流動相體積越大；,固定相、流動相固定，色譜操作條件一定時，組分的保留值是個定值。,組分保留值由色譜分離過程的熱力學(xué)因素決定。,29,,30,,31,C 調(diào)整保留時間,組分的保留時間與死時間的差值。,32,D 保留體積VR 組分從進(jìn)樣開始到色譜柱后出現(xiàn)最大值時所需流動相體積。,流動相平均體積流速,33,E 死體積VM (V0),,不被固定相保留的組分流經(jīng)色譜柱所消耗的流動相體積。,,死體積可以認(rèn)為是色譜柱內(nèi)未被固定相

13、所占據(jù)的空隙體積，也即色譜柱內(nèi)流動相體積。但在實(shí)際測量時，包括了柱外死體積（即色譜儀中管路和連接頭之間的空間，以及進(jìn)樣系統(tǒng)和檢測器的空間）。,34,,F 調(diào)整保留體積V’R,扣除了死體積的保留體積，真實(shí)的將待測組分從固定相中攜帶出柱子所需的流動相體積。,注意：保留時間受流動相流速的影響，而保留體積與流動相流速無關(guān)。,35,,G 相對保留值,在相同操作條件下，組分2對另一參比組分1調(diào)整保留值之比。,36,一般兩組分的相對保留值只與柱溫及固

14、定相的性質(zhì)有關(guān)，與柱長、柱徑、柱填充情況及載氣流速等無關(guān)。,37,,§ 2-2 氣相色譜分析理論基礎(chǔ),38,39,Vs：固定相體積。Vm：流動相體積。,40,3. 保留值與分配比的關(guān)系,可以證明：組分的分配比它等于該組分的調(diào)整保留時間與死時間的比：,所以，分配比可由色譜圖直接求出。,41,4. 保留值與分配系數(shù)K的關(guān)系,所以：,42,5. 色譜基本保留方程式,,43,,色譜分析包括分離、檢測兩個方面，無論是定性或定量分析，分

15、離是前提。,樣品在色譜柱內(nèi)的分離過程基本理論包括兩方面：,一是混合物中各組分在色譜柱中兩相間的分配與待分離組分、流動相、固定相的分子結(jié)構(gòu)和性質(zhì)有關(guān);可以用保留值評價組分在兩相間的分配情況 (熱力學(xué)過程),另一是各組分在色譜柱中的運(yùn)動情況與分離組分在色譜柱中遇到的阻力有關(guān);各色譜峰的半寬度反映了各組分在色譜柱中的運(yùn)動情況，

16、 (動力學(xué)過程),二、色譜分離的基本理論,44,,1. 塔板理論,45,46,在20世紀(jì)50年代，色譜技術(shù)發(fā)展的初期，由Martin、Synge等人提出。把色譜分離過程比作精餾過程，并把精餾中的半經(jīng)驗(yàn)理論－塔板理論用于色譜分析法。,,（1）塔板理論基本假設(shè),A 一根連續(xù)色譜柱為由許多小段組成。在每一 小段內(nèi)，一部分空間為 固定相占據(jù)，另一部 分空間充滿流動相，每一小段相應(yīng)一個蒸餾，

17、 稱為一個理論塔板。,47,B 在每一個小段內(nèi)，組分在流動相和固定相之間可以很 快達(dá)到分配平衡，這樣達(dá)到分配平衡的一小段柱長稱 為理論塔板高度H；,C 流動相進(jìn)入色譜柱不是連續(xù)的，而是脈動的， 即每次進(jìn)入一個塔板體積；,D 組分沿色譜柱方向的擴(kuò)散（縱向擴(kuò)散）可 忽略不計(jì)；,E 組分分配系數(shù)在各塔板上是常數(shù)。,48,（2

18、）塔板理論基本描述A 理論塔板高度H 組分在柱內(nèi)兩相間達(dá)到一次分配平衡所需柱長。B 理論塔板數(shù) n 組分流經(jīng)色譜柱時，在兩相間進(jìn)行平衡分配的總次數(shù)。 設(shè)柱長為L，則：,L固定，則H越小，n越大，柱效率越高分離效果越好，用 H，n 評價柱效。,49,可見，組分保留時間tR越長，色譜峰寬度越小，n值越大，H越小，色譜柱效率越高。,50,D 有效塔板數(shù) 計(jì)

19、算,在實(shí)際應(yīng)用中，有時發(fā)現(xiàn)盡管理論塔板數(shù)很大，但色譜分離效率不高的現(xiàn)象，主要原因是未將不參與分配的死時間扣除。,51,E 有效塔板數(shù) 與理論塔板數(shù)關(guān)系,分配比k值越小，有效塔板數(shù)明顯小于理論塔板數(shù)； k值越大，有效塔板數(shù)接近理論塔板數(shù)。,52,（3）塔板理論的成功與局限,53,所以，用塔板理論來說明色譜柱內(nèi)各組分的分離過程并不完全合理，因?yàn)樯V柱內(nèi)并沒有塔板。當(dāng)同一試樣進(jìn)入同一色譜柱，當(dāng)流動相速度

20、變化時，得到不同的色譜圖。測得的 n 和 H 也不同，充分說明塔板理論不足以說明色譜柱的分離過程，根源在于塔板理論把色譜過程看成純粹的熱力學(xué)過程，是不合理的。,54,2. 速率理論,1956年，荷蘭學(xué)者范第姆特（Van Deomter）等人研究氣相色譜時，提出了色譜過程的動力學(xué)理論——速率理論。吸收了塔板理論的有益成果：塔板高度的概念，并把影響塔板高度的動力學(xué)因素結(jié)合進(jìn)去，指出：理論塔板高度H是色譜峰展寬的量度，導(dǎo)出了塔板高度與流動相

21、流速的關(guān)系式：,55,,56,范第姆特方程式提出了影響Ｈ的三項(xiàng)因素：渦流擴(kuò)散項(xiàng)、分子擴(kuò)散項(xiàng)、 傳質(zhì)阻力項(xiàng)。 在流動相流速一定時： 當(dāng)Ａ、Ｂ、Ｃ小時，Ｈ小，n 才高，柱效高。 當(dāng)Ａ、Ｂ、Ｃ大時，Ｈ大，n 才少，柱效低。,57,Ⅰ產(chǎn)生原因,（1）渦流擴(kuò)散項(xiàng)A（多徑項(xiàng)）,在填充色譜柱中，由于柱內(nèi)固體填充顆粒大小的不完全相同，以及填充的不均勻性，當(dāng)組分隨流動相向柱出口遷移時，流動相由于受到固

22、定相顆粒障礙，不斷改變流動方向，使組分分子在前進(jìn)中形成紊亂的類似“渦流”的流動，因而，同一組分的分子通過色譜柱時，有許多長短不同的路徑，到達(dá)柱尾出口有先有后，產(chǎn)生色譜峰擴(kuò)展，故稱渦流擴(kuò)散。,58,Ⅱ渦流擴(kuò)散項(xiàng)計(jì)算,A與固定相顆粒大小、幾何形狀以及裝填緊密程度有關(guān)，與流動相流速無關(guān)。,,59,60,（2）分子擴(kuò)散項(xiàng)B/u（縱向擴(kuò)散項(xiàng)）,Ⅰ產(chǎn)生原因,當(dāng)樣品組分在色譜柱內(nèi)被流動相帶向前進(jìn)時，由于組分在柱內(nèi)存在濃度差，因而組分分子隨流動相前進(jìn)時

23、，自發(fā)地由濃→稀方向擴(kuò)散，產(chǎn)生了縱向擴(kuò)散，使色譜峰展寬。,61,γ：彎曲因子，指填充柱內(nèi)流動相擴(kuò)散路徑彎曲的因素，它反映了固定相的幾何形狀對分子擴(kuò)散的阻礙情況。 D：為組分在流動相中擴(kuò)散系數(shù)（c m2·s-1）。 Dg：組分在氣相中擴(kuò)散系數(shù)比液相擴(kuò)散系數(shù) Dm大的多（約105倍）,Ⅱ 分子擴(kuò)散項(xiàng)計(jì)算,62,Ⅲ 減小縱向擴(kuò)散項(xiàng)Ｂ／u 采取措施：,A 適當(dāng)提高流動相流速u，減小保留時間，

24、減 小分子擴(kuò)散引起的峰展寬；,B 對于氣相色譜，應(yīng)采用相對分子質(zhì)量較大的 氣體作流動相。 因?yàn)椋?（擴(kuò)散系數(shù)與載氣分子量平方根成反比。）,63,（3）傳質(zhì)阻力項(xiàng)Cu,Ⅰ傳質(zhì)：物質(zhì)由于濃度不均勻而發(fā)生的物質(zhì)遷 移過程。 傳質(zhì)阻力：影響傳質(zhì)過程進(jìn)行的各種因素。,64,Ⅱ 流動相傳質(zhì)阻力系數(shù) Cm,組分從流動相移動到固定相表面，進(jìn)行兩相之間的質(zhì)量交換時所受到的阻力，質(zhì)量交換慢

25、，引起色譜峰變寬。,65,減小流動相傳質(zhì)阻力系數(shù)的措施：,,在分子量小的載氣中，組分的擴(kuò)散系數(shù)大，流動相傳質(zhì)阻力小。,66,,Ⅲ 固定相傳質(zhì)阻力系數(shù) Cs,即組分從兩相界面移動到固定相內(nèi)部，達(dá)分配平衡后，又返回到兩相界面，在這過程中所受到的阻力為固定相傳質(zhì)阻力。這一過程需要時間長，固定相傳質(zhì)阻力就大，造成色譜峰變寬。,67,① 降低固定液液膜厚度(Cs∝df2)并且液膜要均勻；若膜厚，擴(kuò)散費(fèi)時；但不能太薄，否則包不住載體。② 增加組分

26、在固定相中的擴(kuò)散系數(shù)。,減小固定相傳質(zhì)阻力系數(shù) Cs的措施：,（4）色譜速率方程式,68,（5）載氣流速u對理論塔板高度H的影響,色譜速率方程式：,若以H對流動相流速u作圖，得到H—u關(guān)系曲線：,下圖為氣相色譜和液相色譜的H—u關(guān)系曲線,69,GC（a）——u有一最低點(diǎn)u最佳；u小或u大，H都大LC（b）——u沒有最低點(diǎn)； u大，H增大不多，因此可用較高的流速，提高分析速度。,u,70,氣相色譜中的最佳流速可通過實(shí)驗(yàn)和計(jì)算方法求得,將

27、 微分：,71,1）載氣流速小的時候，分子擴(kuò)散項(xiàng)Ｂ／u是影響H的 主要因素，應(yīng)選相對分子量大的載氣，N２、Ar； 2）載氣流速大的時候，傳質(zhì)阻力C u是影響H的主 要因素，應(yīng)選相對分子量小的載氣，H2，Ne，以 改善傳質(zhì)。,可測三種流速對應(yīng)的板高H，解三元一次方程，求出A、B、C即可求出u最佳和H最小。 實(shí)際工

28、作中，為縮小分析時間，可選略高u最佳的流速，常用2 u最佳。,72,§ 2-3 色譜分離條件的選擇,73,A B,74,,式中：保留值差別是反映了分離組分在兩相中分配 行為，是色譜分離的熱力學(xué)因素。 譜峰的寬窄反映了動態(tài)過程組分區(qū)帶的擴(kuò)寬 對分離的影響，是色譜分離的動力學(xué)因素。,１. 分離度R——色譜柱的總分離效能指標(biāo),,定義：相鄰

29、兩個峰的保留值之差與兩峰峰底寬度 平均值之比。,因此，分離度R是衡量色譜柱效率的總性能指標(biāo)。,75,兩個峰tR 相差越大，W越窄，R值越大，說明柱分離較能高。 R≥１.5 兩個組分能完全分開(峰重疊小于1%)。 R＝１.0 兩組分能分開(峰重疊約2%) ，滿足分 析要求。 R＜１.0 兩峰有部分重疊。,76,,,77,2. 分離度與色譜柱效能、選擇性,柱效能——指色譜柱在分離過程

30、中的分離效能， 常用n，H來描述，對單個組分而言， n 越大，H越小， 柱效越高。(動力學(xué)因素),對多個組分的分離來說，無法用n，H 來描述，n 大，H小，幾個峰未必分的開。(當(dāng)r接近于1時),,78,,選擇性——描述兩個相鄰組分在同一固定相中熱力 學(xué)分配行為的重要參數(shù)，用r2,1相對保留 值表示。 r2,1越大，保留時間相差大，

31、 分離越好（但未考慮動力學(xué)因素）,79,二、色譜分離基本方程式,1. 公式推導(dǎo) 設(shè)兩個相鄰的色譜峰A、B，假設(shè)兩峰底寬相等，即：,80,代入分離度公式：,81,又：,代入上式得：,82,83,根據(jù)理論塔板數(shù)與有效塔板數(shù)關(guān)系：,84,2. 分離度與柱效、柱容量、選擇性的關(guān)系,85,A:柱效項(xiàng)：,增加理論塔板數(shù)是提高分離度的最有效手段。,86,B：柱容量項(xiàng)：k大一些對分析有利；太大，分析時

32、 間長，柱容量合適,分得才好。 一般1＜ k ＜10（理想 2＜ k ＜5）,87,C：選擇性項(xiàng)：r2,1越大，tR（B）與t’R（A） 相差越 大，分的越好。,88,3. 色譜分析對分離度的要求,定性分析,峰高法定量,峰面積定量,89,色譜定性分析的任務(wù)是確定色譜圖上各個色譜峰代表什么物質(zhì)。,各種物質(zhì)在一定色譜條件下，均有確定的保留值，因此，色譜保留值可作為一種

33、定性指標(biāo)。,不同物質(zhì)在同一色譜條件下，可能具有相同或相似的保留值，即保留值并非物質(zhì)的專屬性質(zhì)，因此，僅僅根據(jù)保留值對一個求知樣進(jìn)行定性分析有困難。通常結(jié)合樣品來源、性質(zhì)、分析目的等，并根據(jù)具體方法來進(jìn)行定性分析更為有效。,90,,一、利用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對照定性 在相同色譜條件下，將標(biāo)準(zhǔn)物和樣品分別進(jìn)樣，若兩者保留值相同，可能為同一物質(zhì)，否則不是。 此方法要求操作條件穩(wěn)定、一致，必須嚴(yán)格控制操作條件，尤其是流速。,91,,,,,

34、,92,93,1. 人為規(guī)定：正構(gòu)烷烴的保留指數(shù)為其碳數(shù)乘以 100，即：,2. 選擇兩個正構(gòu)烷烴為基準(zhǔn)物，使被測物的調(diào)整 保留值位于所選正構(gòu)烷烴之間,3. 將含待測物及所選兩個正構(gòu)烷烴混合物注入 一定固定相的色譜柱內(nèi)，在一定條件下，測 得色譜圖。,94,95,96,4. 計(jì)算保留指數(shù) 大量實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：保留指數(shù)

35、與調(diào)整保留時間對數(shù)值呈線性關(guān)系，因而可用內(nèi)插法求出未知組分保留指數(shù)：,97,若 n = 1，即所選為兩個相鄰的兩個正構(gòu)烷烴。,98,五、與其它分析儀器聯(lián)用的定性方法,色質(zhì)譜聯(lián)用儀（GC-MS；LC-MS）色譜-紅外光譜儀聯(lián)用儀；,99,定量分析任務(wù)：求混合物中各組分的百分含量。,定量分析依據(jù)：在一定操作條件下，被測組分的 質(zhì)量（或濃度）與檢測器的響應(yīng)

36、 信號成正比。,,§ 2-7 色譜定量分析方法,100,一、峰面積計(jì)算法,1. 峰高乘以半峰寬法 對于對稱峰，符合高斯分布,2. 峰高乘以平均峰寬法 對于不對稱峰，可在峰高0.15及0.85處分別峰寬，再取平均值。,3. 自動積分法 儀器自動積分后，給出峰面積（現(xiàn)代儀器基本功能）。,101,二、定量校正因子,色譜定量分析是基于峰面積與組分的量

37、成正比關(guān)系。 但由于同一檢測器對不同物質(zhì)具有不同的響應(yīng)值，即不同物質(zhì)檢測器的靈敏度不同，相同的峰面積并不意味著有相等的量。,因此，不能根據(jù)色譜峰面積直接計(jì)算組分含量，需對峰面積進(jìn)行校正。,102,,,1. 絕對校正因子,絕對校正因子：單位峰面積對應(yīng)組分的質(zhì)量。,103,104,,可見，相對校正因子就是當(dāng)組分的質(zhì)量與標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)質(zhì)量相等時，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積是組分峰面積的倍數(shù)。,105,,結(jié)論：通過相對校正因子，可以把各組分的峰面

38、積分別換算成與其質(zhì)量相等的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的峰面積，即統(tǒng)一了標(biāo)準(zhǔn)。,相對校正因子可從相關(guān)手冊上查得，只與被測物、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)及檢測器類型有關(guān)，與操作條件無關(guān)。也可自行測定而得。,106,三、定量方法,107,108,則：,109,C 對內(nèi)標(biāo)物的要求1）內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是樣品中原來不存在的純物質(zhì)；2）內(nèi)標(biāo)物性質(zhì)與被測物盡可能接近；3）不與樣品組分發(fā)生化學(xué)反應(yīng)；4）內(nèi)標(biāo)物色譜峰與待測組分峰盡可能接近。,110,因此，內(nèi)標(biāo)法結(jié)果可靠性高，只需被測組分和內(nèi)

39、標(biāo)物出峰即可，適用于微量組分的測定，應(yīng)用廣泛。,缺點(diǎn)： 每次測定都要準(zhǔn)確稱量樣品和內(nèi)標(biāo)物，稍麻煩。,111,,3. 外標(biāo)法—標(biāo)準(zhǔn)曲線法,當(dāng)樣品中各組分不能完全流出，又沒有合適內(nèi)標(biāo)時，可采用此法。將待測組分的純物質(zhì)配制不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)系列，在相同操作條件下，定量進(jìn)樣，測各個峰的A或h ，繪制A—x%曲線或h —x%曲線。,在完全相同條件下，測待測樣品，根據(jù)A待或h待，從曲線上查出待測組分含量。,112,優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，計(jì)算方便，不用

40、 。缺點(diǎn)：要求準(zhǔn)確進(jìn)樣，操作條件穩(wěn)定.,113,例 題,已知物質(zhì)A和B在一根30.00 cm長的柱上的保留時間分別為16.40 min和17.63 min。不被保留組分通過該柱的時間為1.30 min。峰底寬度分別為1.11 min和1.21 min，計(jì)算：（1）柱的分離度；（2）柱的平均塔板數(shù)；,114,（2）柱的平均塔板數(shù) n = 16 (16.40 /1.11)2 = 3493