人教版2017年高一生物課題1微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)43頁教學(xué)課件

1、專題2　微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用課題1　微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng),一、培養(yǎng)基1.概念:人們按照微生物對_________的不同需求,配制出供其_________的營養(yǎng)物質(zhì)。2.種類:,營養(yǎng)物質(zhì),生長繁殖,液體,瓊脂,3.營養(yǎng)組成:各種培養(yǎng)基一般都含有___、_____(提供碳元素的物質(zhì))、_____(提供氮元素的物質(zhì))和無機(jī)鹽,此外還需要滿足微生物生長對___、特殊營養(yǎng)物質(zhì)(如維生素、氨基酸和堿基等)以及_____的要求。,水,碳源,

2、氮源,pH,氧氣,二、無菌技術(shù)1.關(guān)鍵:防止_________的入侵。,外來雜菌,2.消毒和滅菌:,表面或內(nèi)部,強(qiáng)烈,能,巴氏消,毒法,灼燒滅菌,三、大腸桿菌的純化培養(yǎng)1.制備培養(yǎng)基:(1)最常用的細(xì)菌培養(yǎng)基:___________________。,牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,(2)配制步驟:,配方,黏稠,稱量紙,迅速,瓊脂,瓊脂糊底,燒杯破裂,高壓蒸汽,干熱,50℃,酒精燈火焰,2.純化大腸桿菌:(1)純化培養(yǎng)方法:在牛肉膏蛋白胨培

3、養(yǎng)基上純化大腸桿菌,最常用的方法有_________法和_____________法。(2)純化培養(yǎng)的原理:想方設(shè)法在培養(yǎng)基上得到由一個(gè)細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的_____,即獲得較純的菌種。,平板劃線,稀釋涂布平板,菌落,(3)平板劃線法:通過_______在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)_____的操作,將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。其具體操作是:①將_______放在火焰上灼燒,直到接種環(huán)燒紅。②在火焰旁冷卻____

4、___,并打開棉塞。③將試管口通過_____。④將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中,沾取一環(huán)菌液。⑤將試管口通過火焰,并塞上棉塞。,接種環(huán),劃線,接種環(huán),接種環(huán),火焰,⑥左手將皿蓋打開一條縫隙,右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi),劃三至五條_____線,蓋上皿蓋。注意不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。⑦灼燒_______,待其冷卻后,從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作,在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)

5、相連。⑧將平板_____,放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。,平行,接種環(huán),倒置,(4)稀釋涂布平板法:將菌液進(jìn)行一系列的梯度_____,然后將不同稀釋度的菌液分別_____到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面,進(jìn)行培養(yǎng)。其操作步驟是:①系列稀釋(梯度稀釋)操作:,稀釋,涂布,②涂布平板操作:a.將涂布器浸在盛有_____的燒杯中。b.取少量菌液(不超過0.1 mL),滴加到培養(yǎng)基_____。c.將沾有少量_____的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃盡后,

6、冷卻8 s～10 s。d.用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時(shí)可轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)皿,使菌液分布均勻。,酒精,表面,酒精,四、菌種的保藏,頻繁,長期,固體斜面,液體,甘油,產(chǎn)生變異,【思考辨析】1.判斷正誤(1)平板劃線操作中,接種結(jié)束后灼燒接種環(huán)的目的是殺死接種環(huán)上原有的微生物。( )【分析】接種結(jié)束后灼燒接種環(huán)的目的是及時(shí)殺死接種環(huán)上殘留的菌種,避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。(2)在稀釋涂布平板法操作中吸管要在酒

7、精燈火焰周圍使用。 ( )(3)平板劃線時(shí),在第一次劃線后,每次劃線都要從上一次劃線的末端開始。( ),×,√,√,(4)消毒和滅菌實(shí)質(zhì)上是相同的。( )【分析】消毒使用較溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物,不包括芽孢和孢子;滅菌使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物,包括芽孢和孢子。,

8、15;,2.問題思考(1)在配制培養(yǎng)基時(shí),各組分溶化以后是否立即進(jìn)行滅菌?為什么?提示：不是。由于不同的微生物生長對pH的需求不同,所以在培養(yǎng)基各組分溶化后需要先用酸或堿將pH調(diào)至微生物生長的最適宜條件,再進(jìn)行滅菌處理。(2)倒平板時(shí)為何將滅過菌的培養(yǎng)皿放在酒精燈的火焰旁?提示：避免周圍環(huán)境中微生物的污染。,一、制備培養(yǎng)基1.配制原則:(1)目的明確:不同微生物需求不同,根據(jù)培養(yǎng)目的進(jìn)行配制。(2)營養(yǎng)要協(xié)調(diào):營養(yǎng)物質(zhì)的濃

9、度和比例要適宜。(3)pH要適宜:為維持pH的相對恒定,可在培養(yǎng)基中加入緩沖劑,常用磷酸氫二鉀或磷酸二氫鉀。,2.培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分及功能:,【易錯(cuò)提醒】有關(guān)培養(yǎng)微生物所需營養(yǎng)的幾點(diǎn)提醒(1)不同微生物對營養(yǎng)的需求不同,所以培養(yǎng)不同的微生物所需要的營養(yǎng)可能不同。(2)對異養(yǎng)微生物來說,含C、H、O、N的化合物既是碳源又是氮源、能源。(3)培養(yǎng)微生物時(shí)營養(yǎng)物質(zhì)要協(xié)調(diào)。營養(yǎng)物質(zhì)過少不能滿足微生物的營養(yǎng)需要,過多對微生物的生長有抑制作用

10、。,【典例訓(xùn)練1】下表是某微生物培養(yǎng)基成分,請據(jù)此回答:,(1)上表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類型是______________。(2)若不慎將過量NaCl加入培養(yǎng)基中,如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基,可再加入　　　　,用于培養(yǎng)__________。(3)若除去成分②,加入(CH2O),該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng)　　　。(4)表中營養(yǎng)成分共有　　　　類。(5)不論何種培養(yǎng)基,在各種成分都溶化后分裝前,要進(jìn)行的是　　　　。(6)上表中各成分質(zhì)量確定的

11、原則是　　　　　　　。(7)若上表培養(yǎng)基用于菌種鑒定,應(yīng)該增加的成分是　　　　。,【解題關(guān)鍵】判斷微生物的代謝類型依據(jù)培養(yǎng)基中有無有機(jī)碳源;根據(jù)培養(yǎng)基提供的主要營養(yǎng)成分分析表格中的培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)及配制的原則是目的明確、營養(yǎng)協(xié)調(diào)、pH適宜。,【解析】題表中的營養(yǎng)物質(zhì)有水、無機(jī)鹽、氮源三類,缺乏碳源和特殊營養(yǎng)物質(zhì)。該培養(yǎng)基中沒有碳源,說明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的,即可判斷培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物。該培養(yǎng)基中加入了過量食鹽,就

12、可以培養(yǎng)耐鹽的金黃色葡萄球菌,但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物,這個(gè)培養(yǎng)基還需要加入有機(jī)碳源。該培養(yǎng)基若加入(CH2O),培養(yǎng)基中就有了碳源,但除去成分②,卻使培養(yǎng)基中沒有了氮源,這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。微生物生長需要一定的pH,所以培養(yǎng)基裝瓶前需要調(diào)節(jié)pH。表中各成分含量要根據(jù)微生物的生長需要來確定。對于菌種鑒定,往往用的是固體培養(yǎng)基,而表中沒有凝固劑,故需要加入常見的凝固劑——瓊脂。,答案：(1)自養(yǎng)型微生物 (2)含碳有

13、機(jī)物　金黃色葡萄球菌(3)固氮微生物 (4)3 (5)調(diào)節(jié)pH(6)依微生物的生長需要確定 (7)瓊脂(或凝固劑),【變式訓(xùn)練】下列敘述正確的是(　　)A.培養(yǎng)基是為微生物的生長繁殖提供營養(yǎng)的基質(zhì)B.培養(yǎng)基只有兩類:液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基C.固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基D.微生物在固體培養(yǎng)基上生長時(shí),可以形成肉眼可見的單個(gè)細(xì)菌,【解析】選A。培養(yǎng)基是人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求,配制出的供其生長繁

14、殖的營養(yǎng)基質(zhì)。培養(yǎng)基的種類根據(jù)劃分依據(jù)的不同而不同,如根據(jù)化學(xué)成分可分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是液體培養(yǎng)基添加凝固劑而形成的,其他成分均相同。微生物形體微小,肉眼無法看到,必須借助儀器才能看到,在固體培養(yǎng)基上用肉眼觀察到的是一個(gè)菌落。,二、常見消毒與滅菌方法的比較,【思維拓展】(1)酒精消毒時(shí),70%的酒精殺菌效果最好。原因是濃度過高,菌體表面蛋白質(zhì)變性過快從而凝固成一層保護(hù)膜,乙醇分子不能滲入其中;濃度過低,殺菌能力減弱。

15、(2)具體選擇消毒還是滅菌需要考慮:一是要考慮效果,滅菌的效果比消毒要好;二是要考慮操作對象的承受能力,活體生物材料、操作者的手等只能采用消毒,而不能滅菌。,【典例訓(xùn)練2】細(xì)菌培養(yǎng)過程中分別采用了高壓蒸汽、酒精、火焰灼燒等幾種不同的處理,這些方法依次用于殺滅哪些部位的雜菌(　　)A.接種針、手、培養(yǎng)基 B.高壓鍋、手、接種針C.培養(yǎng)基、手、接種針 D.接種針、手、接種環(huán)【解題關(guān)鍵】解決該題需明確:消毒

16、→殺死部分微生物;滅菌→殺死所有微生物。二者采用的方法、程度不同決定了它們的適用范圍不同。,【解析】選C。本題考查學(xué)生對無菌技術(shù)的掌握。高壓蒸汽滅菌鍋是滅菌的一個(gè)設(shè)備,通常用于培養(yǎng)基的滅菌。用酒精擦拭雙手是消毒的一種方法?；鹧孀茻?可以迅速徹底地滅菌,適用于微生物的接種工具,如接種針、接種環(huán)。,三、純化大腸桿菌操作過程中的注意事項(xiàng)1.平板劃線法中幾次灼燒接種環(huán)的目的:,2.稀釋涂布平板法操作比較復(fù)雜,且各個(gè)細(xì)節(jié)均需保證無菌操作,應(yīng)特別

17、注意:(1)酒精燈與培養(yǎng)皿的距離要適宜。(2)吸管頭不要接觸其他任何物體。(3)吸管要在酒精燈火焰周圍使用。(4)涂布器末端浸在盛有70%酒精的燒杯中,取出時(shí),要讓多余的酒精在燒杯中滴盡,然后將沾有少量酒精的涂布器在酒精燈火焰上引燃,注意防火。,【易錯(cuò)提醒】(1)在稀釋涂布平板操作中,每個(gè)步驟都要注意無菌操作,以防培養(yǎng)基被污染,影響實(shí)驗(yàn)效果。(2)每一稀釋倍數(shù)菌液都至少要涂布三個(gè)平板,作為實(shí)驗(yàn)重復(fù),求平均值,若其中有菌落數(shù)與其

18、他實(shí)驗(yàn)差距懸殊者,應(yīng)舍棄該實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù),不進(jìn)行統(tǒng)計(jì)、計(jì)算。(3)平板冷凝后,皿蓋上會凝結(jié)成水珠,凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高,將平板倒置,既可以使培養(yǎng)基表面的水分更好地?fù)]發(fā),又可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染。,【典例訓(xùn)練3】稀釋涂布平板法是微生物培養(yǎng)中的一種常用的接種方法。下列相關(guān)敘述錯(cuò)誤的是(　　)A.操作中需要將菌液進(jìn)行一系列的濃度梯度稀釋B.需將不同稀釋度的菌液分別涂布到固體培養(yǎng)基表面C.不同濃度的菌液均可在培養(yǎng)基