骨髓檢查、組化、免疫分型、遺傳學(xué)

1、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查,湘潭市中心醫(yī)院檢驗(yàn)科曾國強(qiáng),二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的內(nèi)容、方法和臨床意義,p293,,,骨髓標(biāo)本采集要求[標(biāo)本采集的注意事項(xiàng)]：①形態(tài)檢查抽吸量不超過0.2ml；②同時(shí)進(jìn)行多項(xiàng)檢查應(yīng)優(yōu)先抽吸形態(tài)檢查標(biāo)本；③涂片厚薄適宜，不少于4張，并同時(shí)制作配套的血片； ④作好標(biāo)記；⑤如干抽，此時(shí)應(yīng)考慮作骨髓活檢；⑥多部位或?qū)τ袎和袋c(diǎn)或根據(jù)X線檢查提示進(jìn)行穿刺，以提高陽性率 。,,判斷骨髓取材成功的標(biāo)準(zhǔn),①抽吸骨髓液時(shí)，病人

2、有特殊酸痛感；②有骨髓小粒和脂肪滴；③顯微鏡下可見到骨髓特有細(xì)胞，如巨核細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞、漿細(xì)胞、組織嗜堿細(xì)胞、纖維細(xì)胞和大量紅系、粒系幼稚細(xì)胞等。,骨髓涂片、染色：Wright或Giemsa染色、雙染色法,返回,二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的內(nèi)容、方法和臨床意義,㈠、低倍鏡檢查1、確定骨髓標(biāo)本的取材和涂片制作是否滿意 骨髓穿刺液制成涂片后，肉眼觀察，在涂尾部見到散在的約粟粒大小呈淺肉色半透明的骨髓小粒及少量

3、脂肪小滴；在顯微鏡下見到較多骨髓特有的細(xì)胞如各系幼稚細(xì)胞及巨核細(xì)胞等，是穿刺成功的標(biāo)志。 如骨髓小粒較少或缺如，骨髓特有成份減少，提示骨髓可能有不同的外周血液稀釋，為取材不良 如脂肪滴增多，則表示紅髓成份減少，反映骨髓增生減低,插圖,,2、判斷骨髓增生程度（表4-2-7）骨髓增生程度通常以骨髓中有核細(xì)胞的量來反映。采用五級(jí)法,骨髓增生程度分級(jí),下一頁,骨髓增生程度分級(jí)(高倍鏡）,明顯減低1~5/HP,增生減低5~

4、20/HP,增生活躍20~50/HP,明顯活躍50~100/HP,極度活躍>100/HP,返回,3、觀察巨核細(xì)胞需要注意數(shù)量、成熟程度、產(chǎn)血小板功能及其形態(tài)（包括血小板的形態(tài)）等四個(gè)方面。低倍鏡下計(jì)數(shù)全部片膜的巨核細(xì)胞數(shù)。并轉(zhuǎn)換油鏡觀察，進(jìn)行分類計(jì)數(shù)，注意巨核細(xì)胞及血小板的形態(tài)有無異常。4、注意有無異常細(xì)胞如惡性組織細(xì)胞病的異常組織細(xì)胞、轉(zhuǎn)移癌細(xì)胞、Gaucher細(xì)胞、Niemann-Pick細(xì)胞等。注意觀察有無散

5、在或成堆分布的體積較大、形態(tài)特殊的異常細(xì)胞出現(xiàn)，尤其應(yīng)注意涂片尾部、邊緣及骨髓小粒周圍。發(fā)現(xiàn)可疑異常細(xì)胞，應(yīng)在油浸鏡下觀察加以確認(rèn)。,,二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的內(nèi)容、方法和臨床意義,㈡、油浸鏡檢查選擇有核細(xì)胞分布均勻、結(jié)構(gòu)清晰、著色良好的涂膜體尾交界處部位作油浸鏡檢查。1、有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)在油浸鏡下連續(xù)分?jǐn)?shù)200個(gè)或500個(gè)有核細(xì)胞，按細(xì)胞的不同系列和不同的發(fā)育階段分別計(jì)數(shù)。然后計(jì)算出分別占有核細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)。再累計(jì)粒系和紅系總

6、數(shù)，計(jì)算粒紅比例（G:E）。分類計(jì)數(shù)時(shí)，巨核細(xì)胞及分裂、退化細(xì)胞不計(jì)入。2、觀察細(xì)胞形態(tài)仔細(xì)觀察各系列細(xì)胞的形態(tài)有無異常，包括注意成熟紅細(xì)胞的形態(tài)有無異常，有無特殊異常細(xì)胞出現(xiàn)，必要時(shí)還需注意有無寄生蟲。,插圖,㈢、檢查結(jié)果的臨床意義1、骨髓增生程度，其臨床意義如前表所述。2、骨髓中各系列細(xì)胞及其各發(fā)育階段的比例粒細(xì)胞系統(tǒng)：約占有核細(xì)胞的50～60%紅細(xì)胞系統(tǒng)：約占有核細(xì)胞的20% 粒紅比例（G/E）2.76

7、±0.83:1(2-4:1)淋巴細(xì)胞系統(tǒng)：約占有核細(xì)胞的20%單核細(xì)胞系統(tǒng)：一般<4% 漿細(xì)胞系統(tǒng)：一般<2%巨核細(xì)胞系統(tǒng)：7~35個(gè)為正常值(1.5*3cm涂片）。其他細(xì)胞：可見到極少量的非造血細(xì)胞成分,3、各系列細(xì)胞比例改變的臨床意義⑴、粒細(xì)胞系與紅細(xì)胞系比例（粒/紅比例）1)、粒紅比例正常：見于：①正常骨髓象；②粒、紅兩系平等增多或減少，前者如紅白血病，后者如AA；③粒、紅兩系細(xì)胞基本不變化的造

8、血系統(tǒng)疾病，如MM、骨髓轉(zhuǎn)移癌、ITP等。2)、粒紅比例增高：指粒/紅比例大于5:1?？梢娏＜?xì)胞系增多，或由紅細(xì)胞系減少所致。常見于：①急性或慢性粒白血??； ②急性化膿性感染、中性粒細(xì)胞性類白血病反應(yīng)； ③純紅再障。3)、粒紅比例減低：指粒/紅比例小于2:1。可見粒細(xì)胞系減少，或由紅細(xì)胞系增多所致。常見于： ①粒細(xì)胞減少，如粒缺；②紅細(xì)胞系增多，如各種增生性貧血、真紅或繼發(fā)性紅細(xì)胞增多癥等。,⑵、粒細(xì)胞系統(tǒng)：1)、粒系細(xì)胞增多：見

9、于：①各型粒細(xì)胞白血病，急性粒細(xì)胞白血病以原粒細(xì)胞及早幼粒細(xì)胞增多為主，CML以中性晚幼粒及桿狀核粒細(xì)胞增多為主；②大部分急性炎癥和感染性疾病、中性粒細(xì)胞性類白反應(yīng)等，以中性晚幼粒及桿狀核粒細(xì)胞增多為主。2)、粒細(xì)胞減少：見于AA、粒細(xì)胞缺乏癥或粒細(xì)胞減少癥。⑶、紅細(xì)胞系統(tǒng)：1)紅系增多：見于： ①各類增生性貧血如溶血性貧血、失血性貧血、小細(xì)胞低色素性貧血等，以中幼紅及晚幼紅細(xì)胞增多為主； ②巨幼細(xì)胞,貧血，以巨幼紅細(xì)胞增多為主；

10、③急性紅白血病，以原紅及早幼紅細(xì)胞增多為主，并常伴幼紅細(xì)胞巨幼樣變。2)、紅系減少：見于AA（包括PRCA），但部分CAA，骨髓呈灶性增生者，有時(shí)可見紅系細(xì)胞比例增多。⑷、淋巴細(xì)胞系統(tǒng)：1)、淋巴細(xì)胞絕對(duì)性增多：見于急淋和慢淋、惡性淋巴瘤、傳淋和傳單、其他病毒性感染、淋巴細(xì)胞類白等。2)、淋巴細(xì)胞相對(duì)性增多：見于AA、粒缺或粒細(xì)胞減少癥。⑸、單核細(xì)胞系統(tǒng)：增多見于：①血液系統(tǒng)疾病如急單、急粒-單、MDS、惡組、淋巴瘤等；②某些

11、感染性疾病結(jié)核病、布魯菌病、原蟲感染、,感染性心內(nèi)膜炎等；③風(fēng)濕性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；④其他如惡性腫瘤、肝硬化、藥物反應(yīng)等。⑹、漿細(xì)胞系統(tǒng)：增多見于：①M(fèi)M、漿細(xì)胞白血病、巨球蛋白血癥、重鏈病等；②反應(yīng)性漿細(xì)胞增多如慢性炎癥及感染性疾病、風(fēng)濕性疾病、惡性腫瘤、過敏性疾病等；③AA、粒缺等。⑺、巨核細(xì)胞系統(tǒng)：1)、增多：①ITP、Evans綜合征； ②骨髓增殖性疾病，如CML、真紅、ET、IMF等；③脾功能亢進(jìn)；④

12、巨核細(xì)胞白血病。2)、巨核細(xì)胞減少：見于AA、AL及其他骨髓浸潤或破壞的疾病，以及急性感染、化學(xué)物或藥物中毒、放射病等。,二、骨髓細(xì)胞學(xué)檢查的內(nèi)容、方法和臨床意義,㈣、血涂片的觀察在檢查骨髓時(shí)，需同時(shí)進(jìn)行血涂片的觀察1、應(yīng)注意WBC分類計(jì)數(shù)及形態(tài)觀察；2、注意成熟RBC的形態(tài)有無異常。有核紅。3、估計(jì)PLt數(shù)量及注意其形態(tài)有無異常；4、觀察寄生蟲有無（如瘧原蟲）。㈤、填寫檢查報(bào)告單根據(jù)骨髓象和血象檢查結(jié)果，按檢查報(bào)告單

13、的要求，逐項(xiàng)詳細(xì)填寫及描述骨髓象、血象表現(xiàn)的特征，結(jié)合臨床資料提出形態(tài)學(xué)診斷意見。,低倍鏡觀察（取材 涂片 有核細(xì)胞增生 巨核細(xì)胞 病理細(xì)胞）油鏡觀察 骨髓有核細(xì)胞分類計(jì)數(shù)200－500個(gè) 細(xì)胞系形態(tài)學(xué)觀察 粒系 紅系 單核系 淋巴系 漿系 其他細(xì)胞 計(jì)算結(jié)果（各細(xì)胞系百分比

14、 粒紅比值） 觀察血片 組織化學(xué)染色 填寫骨髓圖文結(jié)果報(bào)告單 （骨髓細(xì)胞特征 血片細(xì)胞特征 組化特征 ） 骨髓片存檔保存,,,,,,,,,,,,,,骨髓象分析步驟示意圖,,,返回,三、血細(xì)胞的細(xì)胞化學(xué)染色,[意義]：1、有助于了解各種血細(xì)胞的化

15、學(xué)組成及病理生理改變。2、可用作血細(xì)胞類型的鑒別。3、以及對(duì)某些血液病的診斷和鑒別診斷，療效觀察、發(fā)病機(jī)制探討等均有一定價(jià)值。,（一）過氧化物酶染色（POX）,【原理】 血細(xì)胞中的過氧化物酶（peroxidase，POX）能分解試劑中的底物H2O2，釋出新生態(tài)氧，使無色聯(lián)苯胺氧化為藍(lán)色聯(lián)苯胺，后者與亞硝基鐵氰化鈉結(jié)合形成藍(lán)黑色的顆粒，沉著于細(xì)胞質(zhì)中?！窘Y(jié)果】胞質(zhì)中無藍(lán)黑色顆粒者為陰性反應(yīng)，出現(xiàn)細(xì)小顆粒、分布稀疏者為弱陽性反應(yīng)，顆粒

16、粗大而密集者為強(qiáng)陽性反應(yīng)。【臨床意義】過氧化物酶染色主要用于急性白血病類型的鑒別。 急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，白血病細(xì)胞多呈強(qiáng)陽性反應(yīng)；急性單核細(xì)胞白血病時(shí)呈弱陽性或陰性反應(yīng)；急性淋巴細(xì)胞白血病則呈陰性反應(yīng)。 因此，POX染色對(duì)急性粒細(xì)胞白血病與急性淋巴細(xì)胞白血病的鑒別最有價(jià)值。,骨髓片POX染色,,,,骨髓片POX染色,APL：呈強(qiáng)陽性反應(yīng),AML-M4：部分呈陽性反應(yīng)， 部

17、分成弱陽性反應(yīng),AML-M5：呈弱陽性,ALL：呈陰性，<3%,（二）蘇丹黑B染色,[原理]：是一種脂溶性的染料，可溶于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的含脂物質(zhì)，使胞漿中的脂類物質(zhì)呈棕黑色或深黑色顆粒。[結(jié)果和意義]：與POX染色大致相同。,,（三）中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）（Neutrophilalkaline Phosphatase，NAP）【原理】偶氮偶聯(lián)法。是血細(xì)胞內(nèi)的堿性磷酸酶將基質(zhì)液中的α-磷酸萘酚鈉水解，產(chǎn)生α-萘酚與重氮

18、鹽偶聯(lián)形成灰黑色沉淀，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)酶活性所在之處。（另有鈣-鈷法 略）【結(jié)果】堿性磷酸酶主要存在于成熟階段的中性粒細(xì)胞（分葉核及桿狀核），其他血細(xì)胞均呈陰性反應(yīng)。【參考值】成人NAP陽性率10%~40%；積分值40~80（分）。,臨床意義1、感染性疾?。杭?xì)菌感染與病毒感染的鑒別2、慢性粒細(xì)胞白血病的NAP活性明顯減低，積分值常為0，類白血病反應(yīng)的NAP活性極度增高。3、急性粒細(xì)胞白血病時(shí)，NAP積分值減低；急性淋巴細(xì)胞

19、白血病的NAP積分值多增高；急性單核細(xì)胞白血病時(shí)一般正?；驕p低。,4、再障時(shí)NAP活性增高；PNH時(shí)活性減低。5、其他血液病時(shí)NAP活性中度增高，惡組NAP活性降低。,,,中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色（NAP）,,,++++,+++,++,++,+,+,-,嗜酸粒細(xì)胞-,（四）酸性磷酸酶染色（ACP）,[原理]：（硫化鉛法）血細(xì)胞內(nèi)的酸性磷酸酶在酸性條件下（PH5.0)將基質(zhì)中的ß-甘油磷酸鈉水解,產(chǎn)生磷酸鈉,然后與硝酸鉛反應(yīng),

20、生成磷酸鉛沉淀,再與硫化銨反應(yīng)形成硫化鉛沉淀,定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。[結(jié)果]：細(xì)胞質(zhì)內(nèi)出現(xiàn)棕黑色顆粒為陽性反應(yīng)；否則陰性(另有偶氮偶聯(lián)法 略）。,臨床意義,1、幫助診斷多毛細(xì)胞白血病2、幫助鑒別T淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞：TL（+），BL（-）3、幫助鑒別Gaucher病與Niemanm-Pick病。4、單核、組織、網(wǎng)狀、巨核細(xì)胞ACP染色均呈陰性反應(yīng)。,酸性磷酸酶染色（ACP）,FAB：ALL-L2,ACP染色呈陽性反應(yīng)（桔紅色粗大顆粒

21、）提示為T淋巴細(xì)胞白血病,（五）氯乙酸AS-D萘酚酯酶染色粒細(xì)胞酯酶,氯乙酸AS-D萘酚酯酶（AS-D NCE,為特異性酯酶）： 1、急性粒細(xì)胞白血病呈強(qiáng)陽性，不被氟化鈉抑制。 2、急性單核細(xì)胞白血病和急性淋巴細(xì)胞白血病呈陰性。 3、急性粒-單核細(xì)胞白血病時(shí)，可見陰性和陽性二種細(xì)胞。,（六） α-醋酸萘酚酯酶染色,α-醋酸萘酚酯酶(α-NAE，NSE為非特異性酯酶)： 1、急性單核細(xì)

22、胞白血病、急性粒-單核細(xì)胞白血病的單核系細(xì)胞呈陽性反應(yīng)，可被氟化鈉抑制(抑制率＞50%)； 2、急性粒細(xì)胞白血病一般為陰性或呈弱陽性反應(yīng)，不被氟化鈉抑制。,α－醋酸萘酚酯染色（ α－NAE，NSE）急單呈陽性反應(yīng)。,,（ 七）糖原染色(periodic acid –Schiff ‘s reaction PAS ),[原理]：過碘酸能將血細(xì)胞內(nèi)的糖元氧化，生成醛基。醛基與Schiff 液中的無色品紅結(jié)合，形成紫紅色化合物

23、，定位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。[結(jié)果 ]：胞質(zhì)中有紅色顆粒、團(tuán)塊、均勻紅色為陽性。[意義]： 紅血病、紅白血病陽性，其他紅細(xì)胞貧血陰性，巨核細(xì)胞陽性。,臨床意義 粒系中原粒cell(-)，早幼粒cell強(qiáng)陽性，中性粒細(xì)胞（+++），單核（±），淋巴（-），少數(shù)（±），紅細(xì)胞（-）；巨核、Plt均呈陽性反應(yīng)。,,,,PAS,AML-M6幼紅細(xì)胞呈陽性反應(yīng),MA幼紅細(xì)胞呈陰性反應(yīng),,（八）鐵染色（普魯氏藍(lán)反應(yīng)）

24、【原理】人體內(nèi)的總鐵有一定量以鐵蛋白和含鐵血黃素的形式貯存在骨髓中的單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)，幼紅細(xì)胞胞質(zhì)的線粒體中也含有含鐵血黃素。這些鐵在酸化的亞鐵氰化鉀溶液中反應(yīng)，生成藍(lán)色的鐵氰化鐵沉淀，定位于含鐵的部位?！窘Y(jié)果】1、細(xì)胞外鐵 觀察骨髓小粒中貯存在單核-吞噬細(xì)胞系統(tǒng)內(nèi)的鐵。陽性反應(yīng)為在骨髓小粒上見到呈淺藍(lán)綠色均勻的無形物質(zhì)，或呈藍(lán)色或深藍(lán)色的小珠狀、粗顆粒狀或藍(lán)黑色的小塊狀物質(zhì)。2、細(xì)胞內(nèi)鐵 觀察幼紅細(xì)胞內(nèi)的鐵。正

25、常幼紅細(xì)胞（主要是晚幼紅細(xì)胞）的細(xì)胞核周圍可見到1~5個(gè)呈藍(lán)色細(xì)小的鐵顆粒。含有鐵顆粒的幼紅細(xì)胞稱為鐵粒幼細(xì)胞。如含粗大深染的鐵粒在10個(gè)以上，并環(huán)繞細(xì)胞核排列超過核周徑2/3以上者，稱環(huán)形鐵粒幼細(xì)胞。,,【參考值】1、細(xì)胞外鐵 1+~2+，大多為2+。2、細(xì)胞內(nèi)鐵 20%~90%，平均值為65%?！九R床意義】1、缺鐵性貧血時(shí)，早期骨髓中貯存鐵就已耗盡，細(xì)胞外鐵呈“－”。因此，鐵染色是目前診斷缺鐵性貧血及指導(dǎo)鐵劑治療的一項(xiàng)可

26、靠和切合臨床實(shí)用的檢驗(yàn)方法。2、非缺鐵性貧血如球蛋白生成障礙性貧血，細(xì)胞外鐵多增加，常>3+~4+。3、鐵粒幼細(xì)胞性貧血時(shí)，鐵粒幼細(xì)胞增多，并可見到環(huán)狀鐵粒幼細(xì)胞。,細(xì)胞外鐵觀察,陽性為藍(lán)綠色沉淀,++++血色病,+++AA、鐵粒幼貧血,++感染,+++AA、鐵粒幼貧血,+NBM正常骨髓,—IDA,骨髓鐵染色（Fe）,MDS-RAS鐵染色，圖中所指為環(huán)形鐵粒幼紅細(xì)胞,,,,表4-2-10幾種常見急性白血病的細(xì)胞化學(xué)

27、染色結(jié)果,四、骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,細(xì)胞免疫分型也稱細(xì)胞免疫標(biāo)記（表型）檢測(cè)，它是用單克隆抗體及免疫學(xué)技術(shù)對(duì)細(xì)胞膜表面和/或細(xì)胞質(zhì)存在的特異性抗原進(jìn)行檢測(cè)，借以分析細(xì)胞所屬系列，分化程度和功能狀態(tài)的一種方法。,骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,（一）檢測(cè)方法1、免疫熒光法(immunof luoresence technigue)2、免疫酶染色法（1）APAAP法（2）PAP法（3）ABC法（二）細(xì)胞免疫分型的臨床應(yīng)用1、有助于識(shí)別不同系

28、列的細(xì)胞。如識(shí)別髓,骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,系細(xì)胞的抗體有CD13、CD14、CD15、CD32、CD33、CD65、CD91、CD156、CD166等。識(shí)別淋巴細(xì)胞系列的抗體有：CD1、CD2、CD3、CD4、CD5、CD7、CD8、CD9、CD10、CD19、CD20、CD52、CD77等。識(shí)別巨核細(xì)胞和血小板的抗體有CD41、CD42、CD61等。識(shí)別紅細(xì)胞系列的抗體常用血型糖蛋白A或B。2 、識(shí)別不同的淋巴細(xì)胞識(shí)別成熟T淋巴細(xì)胞

29、的抗體有CD2、CD3、CD7、CD8等。識(shí)別成熟B淋巴細(xì)胞的抗體,骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,有CD19、CD20、CD22等。識(shí)別NK細(xì)胞的抗體有CD16、CD56等。識(shí)別不同的淋巴細(xì)胞除檢測(cè)細(xì)胞表面的抗原外，還可以檢測(cè)細(xì)胞表面的受體及細(xì)胞表面其他分子，如TCR、MHC等。3、用于檢測(cè)T淋巴細(xì)胞亞群臨床上常用CD3、CD4和CD8單抗檢測(cè)全T（CD3）細(xì)胞，并可將外周淋巴器官和血液中T細(xì)胞分為TH（CD4+，CD8-）和TS（CD4-

30、、CD8+）兩個(gè)主要亞群，計(jì)算TH/TS比值作為,骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,機(jī)體免疫狀態(tài)、某些疾病診斷、病期分析、監(jiān)測(cè)治療和判斷預(yù)后的參數(shù)。4、用于識(shí)別不同分化階段的細(xì)胞CD34+、CD90+、Lin-被認(rèn)為是造血干細(xì)胞的主要標(biāo)志；CD34+、CD33+為造血干細(xì)胞向髓系定向的標(biāo)志；CD34+、TDT+、CD10+、CD7+為T淋巴細(xì)胞系祖細(xì)胞標(biāo)志；CD34+、CD19+為B淋巴細(xì)胞系祖細(xì)胞標(biāo)志。根據(jù)不同抗體組合可T、B淋巴細(xì)胞區(qū)分為不

31、同分化階段。（參照表）,骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,5、有助于識(shí)別不同功能狀態(tài)的細(xì)胞，如記憶T細(xì)胞高表達(dá)CD45RO、不表達(dá)CD45RA?；罨疶細(xì)胞不表達(dá)CD45RA，而CD25、CD2、CD45RO、CD54、CD58等均強(qiáng)表達(dá)。6、有助于對(duì)不同系列和不同分化階段的細(xì)胞進(jìn)行分離和研究。用免疫熒光法標(biāo)記和活細(xì)胞可經(jīng)流式細(xì)胞儀或免疫磁珠法將其分離出來，并使對(duì)他們的研究成為可能。,骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,7、可用于各種白血病細(xì)胞的免疫表型分析（見“急

32、性白血病免疫表型特點(diǎn)”一節(jié)）。8、可用于白血病微小殘留病的檢查 一個(gè)完全緩解的白血病病人骨髓細(xì)胞中，若出現(xiàn)CD19、CD22、CD10、CD7、CD5、CD13、CD37、CD34等任何一種抗原陽性同時(shí)伴有TdT+則診斷微小殘留病存在。敏感性可高達(dá)10-4水平。（三）急性白血病細(xì)胞免疫表型特點(diǎn)1、ALL與AML細(xì)胞免疫表型特點(diǎn),骨髓細(xì)胞免疫學(xué)分型,2、急性淋巴細(xì)胞白血?。ˋLL）免疫表型特點(diǎn)3、急性髓細(xì)胞白血病免疫表型特點(diǎn)

33、4、免疫學(xué)分類對(duì)于雙表型白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病（CLL）、毛細(xì)胞白血病、慢性粒細(xì)胞白血病急變期細(xì)胞的分類和診斷也具有重要作用。,ALL和AML的免疫表型,注： a. CD7對(duì)少部分（10%）AML可陽性 b. <10%T-ALL病例HLA-DR可陽性表達(dá) c. TdT在少數(shù)（20%）AML（M1）陽性 d. TdT對(duì)大多數(shù)成熟B-ALL是陰性,急性淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型特

34、點(diǎn),急性非淋巴細(xì)胞白血病的免疫表型特點(diǎn),免疫組織化學(xué)染色,AML-M2（CD33陽性，呈棕黃色沉淀）,免疫分型（流式細(xì)胞儀）,AML-M0（CD5、7、10、19、14、36、GlyA陰性） （ CD13、34、38、33、MPO、HLA-DR陽性）,五、細(xì)胞遺傳學(xué)分析,細(xì)胞遺傳學(xué)分析,自從20世紀(jì)70年代以來由于染色體分帶技術(shù)的出現(xiàn)，尤其是高分辨顯帶技術(shù)的應(yīng)用，細(xì)胞遺傳學(xué)研究在血液學(xué)領(lǐng)域內(nèi)才得以迅速發(fā)展，特

35、別是在惡性血液病的研究中不但確定了某些染色體異常與疾病發(fā)生、發(fā)展、診斷、治療及預(yù)后有密切關(guān)系，而且染色斷裂點(diǎn)也往往成為尋找癌基因或抑癌基因的標(biāo)志。 因此血細(xì)胞染色體的檢查與分析對(duì)遺傳性血液病和惡性血液病的診斷、分型及病因和發(fā)病機(jī)制的研究有重要價(jià)值，也為遺傳咨詢、優(yōu)生優(yōu)育提供依據(jù)。,（一）染色體檢查方法,見第十章分子生物學(xué)檢查中第三節(jié)染色體檢查。,（二）染色體分析,通常有兩個(gè)或兩以上的細(xì)胞分裂相中檢出同一條染色體增

36、加或結(jié)構(gòu)異常；有三個(gè)或三個(gè)以上細(xì)胞分裂相中有同一條染色體丟失才能作為一個(gè)染色體異常克隆。1、染色體命名人體正常細(xì)胞有46條染色體，根據(jù)人類細(xì)胞遺傳學(xué)命名的國際體制（ISCN），按其長短和著絲粒的位置編為A～G 7組，包括1～22號(hào)常染色體及X和Y性染色體；根據(jù)顯帶特點(diǎn)，將染色體劃區(qū)分布，一般用4個(gè)符號(hào)表示特定區(qū)帶，如“8q22”則代表8號(hào)染色體長臂2區(qū)2帶。,（二）染色體分析,2、核型分析及書寫核型是指中期分裂相的全部染色體按Da

37、nvers體制排列而成。其格式書寫順序是：染色體數(shù)目、性染色體、染色體異常。各項(xiàng)之間以逗號(hào)隔開，性染色體以大寫的X與Y表示，各染色變異以小寫字母表示，見表5-1。一個(gè)完整核型書寫方法如下：47，XY，+8，t(9;22)(q34;q11)。表示47條染色體，增加了一條8號(hào)染色體，第9號(hào)與第22號(hào)染色體之間易位，斷裂點(diǎn)分別在第9號(hào)染色體長臂3區(qū)4帶和第22號(hào)染色體長臂1區(qū)1帶。,（二）染色體分析,3、染色體畸變包括數(shù)目畸變和結(jié)構(gòu)畸變二類

38、。 正常人體細(xì)胞有23對(duì)染色體，其中23條來自父方，另23條來自母方，即含有兩個(gè)染色體組或稱為二倍體（2n）。,（三）臨床常見白血病的染色體改變,臨床常見白血病的染色體改變見表。,急性髓細(xì)胞白血病的MIC分型,Ph染色體,是CML的特征性異常染色體，檢出率為90-95%，其中絕大多數(shù)為t(9;22)(q34;q11),稱為典型易位。,48,XY,+4,t(9;22),+Ph,急性淋巴細(xì)胞白血病的MIC分型,多看 1、數(shù)量

39、 2、種類,六、如何學(xué)好血液細(xì)胞形態(tài)學(xué),多討論 1、同事 2、老師,多讀書（細(xì)胞形態(tài)、發(fā)病情況） 1、常見病 2、罕見病,多請(qǐng)教 1、教師 2、圖譜,多會(huì)診 1、同級(jí)醫(yī)院 2、上級(jí)醫(yī)院,多溝通 1、臨床 2、病人,多觀察 1、細(xì)胞少時(shí)（TB、R

40、-S細(xì)胞） 2、細(xì)胞多時(shí)（特殊類型：如紅細(xì)胞樣瘤細(xì)胞）,重視組化染色和其他實(shí)驗(yàn)檢查 1、常規(guī)（POX或SBB、NAP、PAS、Fe)；少見(NSE—中性、酸性、堿性，ACP）； 2、溶血檢查。,多積累 1、病例(共性和個(gè)性：白血病，貧血有共性；淋巴瘤，骨髓壞死，高雪氏病，尼曼匹克病，骨髓纖維化，骨髓轉(zhuǎn)移癌，毛細(xì)胞白血病，惡組，巨球蛋白血癥等有個(gè)性） 2、臨床征狀（白血病，MM，惡組