毛蚶多糖（aslp）免疫調(diào)節(jié)作用的研究

1、作者：王莉(1983.07)，女，江蘇，碩士，生物化工專業(yè)，Email：wli502@通訊作者：姚全勝，男，教授，博士生導(dǎo)師，Email：YaoQS@毛蚶多糖（毛蚶多糖（ASLP）免疫調(diào)節(jié)作用的研究）免疫調(diào)節(jié)作用的研究王莉王莉1，何赟綿，何赟綿2，姚全勝，姚全勝3(1(1南京工業(yè)大學(xué)，江蘇，南京南京工業(yè)大學(xué)，江蘇，南京210009210009；2中國(guó)藥科大學(xué)，江蘇，南京中國(guó)藥科大學(xué)，江蘇，南京210009210009；3江蘇省藥物安全評(píng)

2、價(jià)中心，江蘇，南京江蘇省藥物安全評(píng)價(jià)中心，江蘇，南京210009)210009)摘要摘要：目的目的：研究毛蚶多糖（ASLP）對(duì)正常小鼠免疫功能的影響。方法方法：通過體外方法研究毛蚶多糖（ASLP）對(duì)脾淋巴細(xì)胞和對(duì)T、B淋巴細(xì)胞增殖能力的影響以及淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL2的影響；體內(nèi)研究小鼠體重、臟器指數(shù)和碳廓清能力以及ConA誘導(dǎo)脾淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化的能力來觀察毛蚶多糖（ASLP）對(duì)小鼠免疫功能的影響。結(jié)果結(jié)果：體外試驗(yàn)中，毛蚶多糖（ASLP）增強(qiáng)淋

3、巴細(xì)胞的增殖能力以及IL2的活性，與對(duì)照組有顯著性差異（P0.05，P0.01）；體內(nèi)試驗(yàn)中，中、高劑量組的臟器指數(shù)和吞噬指數(shù)、校正吞噬指數(shù)以及淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化率與對(duì)照組相比有明顯差異（P0.05，P0.01）。結(jié)論結(jié)論：毛蚶多糖（ASLP）對(duì)小鼠的免疫功能一定的調(diào)節(jié)作用，是一種良好的免疫調(diào)節(jié)劑。關(guān)鍵詞：關(guān)鍵詞：毛蚶；多糖；免疫調(diào)節(jié)；淋巴細(xì)胞；碳廓清StudiesonImmunomodulationofPolysacidefromArcas

4、ubcremataLischkeWangLi1，HeYunmian2，YaoQuansheng3(1.NanjingUniversityofTechnologyNanjing210009China2.ChinaPharmaceuticalUniversityNanjing210009China3.JiangsuCenterfSafetyEvaluationofDrugsNanjing210009China)Abstract:OBJECT

5、IVE:StudytheeffectsofPolysacidefromArcasubcremataLischke(ASLP)onimmuneinnmalmice.METHODS：StudythecellmultiplicationofspleniclymphocyteT、Blymphcellinvitro.Investigatethebodyweight、theindexofimmuneganscarbongranulatesttode

6、termineeffectsofASLPonimmunefunctioninvivo.RESULTS:InvitroteststheASLPcanenhancetheabilityofcellmultiplicationofspleniclymphocyteT、Blymphcellhigherthanthatofctrolgroup(P0.05P0.01).Invivoteststhetheindexofimmunegansthe.Th

7、emacrophageengulfingcarbongranulaabilityindlehighdosagetreatmentarehigher31.1.4毛蚶多糖的提取與純化采用水提醇析法，毛蚶粉碎勻漿，用丙酮脫色干燥，80℃水浴浸提（3次），Sevag法脫蛋白，離心，乙醇沉淀，洗滌冷凍干燥，DEAD52柱層析，SephadexG200柱層析，透析濃縮，冷凍干燥，得到純品毛蚶多糖（ASLP），供實(shí)驗(yàn)室用。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1毛蚶

8、多糖（ASLP）對(duì)脾淋巴細(xì)胞增殖能力的影響采用MTT法測(cè)定小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖能力，無菌制備脾淋巴細(xì)胞懸液，用含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞濃度為68106ml1。于96孔培養(yǎng)板中，每孔加入100μl細(xì)胞懸液，再加100μl培養(yǎng)液（空白對(duì)照）、10μgml1ConA（陽性對(duì)照）及含有不同濃度的樣品溶液（400μgml11000μgml1），置5%CO237℃培養(yǎng)48h。培養(yǎng)結(jié)束前4h，于每孔加入5mgml1的MTT20μ

9、l，培養(yǎng)結(jié)束后，每孔加入DMSO100ul，于酶標(biāo)儀570nm處測(cè)OD值，計(jì)算增殖指數(shù)SI[2]。樣品孔的吸光值SI=陰性對(duì)照孔的吸光值1.2.2毛蚶多糖（ASLP）對(duì)T、B淋巴細(xì)胞增殖的影響采用參考文獻(xiàn)4中的方法分別提取T、B細(xì)胞懸液，用MTT法測(cè)定T，B淋巴細(xì)胞增殖能力，用培養(yǎng)液作為空白對(duì)照、10μgml1ConA及10μgml1LPS作為陽性對(duì)照，在酶標(biāo)儀570nm測(cè)各孔OD值，計(jì)算增殖指數(shù)SI[3]。表1毛蚶多糖（ASLP）對(duì)脾

10、淋巴細(xì)胞以及T、B淋巴細(xì)胞增殖能力的影響（n=6，）xs?Tab1TheeffectofASLPonproliferationofsplenocyteBcellsTcellsinmousespleen.（n=6，）xs?ASLP1gml???GroupPositiveLPS51gml???ConA101gml???800400200100splenocyte3.500.151.600.18△2.600.18△3.500.15△3.220