干化學法和濕化學兩種生化分析系統(tǒng)檢測結(jié)果評價及統(tǒng)一

1、干化學法和濕化學兩種生化分析系統(tǒng)檢測結(jié)果評價及統(tǒng)一,為什么要評價和統(tǒng)一？,第一部分,背景,檢驗醫(yī)學迅速發(fā)展，臨床檢驗工作量加 大，臨床實驗室逐步規(guī)?；?、自動化、多樣化、新的儀器設備與方法不斷引進更新。為了同時滿足急診和住院部檢測工作的需要，本實驗室內(nèi)存在干化學法和濕化學兩種不同的生化分析檢測系統(tǒng)。解決檢測結(jié)果的溯源性及和其它檢測系統(tǒng)的可比性，準備參加國家實驗室認可。,同一實驗室內(nèi)不同檢測系統(tǒng)之間檢測結(jié)果的一致性及可比性；同

2、一檢測項目在同一醫(yī)院可能得到差異比較大或完全不同的檢測結(jié)果；同一患者同一檢測項目在不同醫(yī)院可能得到差異比較大或完全不同的檢測結(jié)果。,疑問,不利影響,檢驗質(zhì)量遭到異議醫(yī)療糾紛醫(yī)療事故的發(fā)生,不同檢測系統(tǒng)的統(tǒng)一勢在必行！,怎樣評價和統(tǒng)一？,第二部分,評價依據(jù),美國全國臨床實驗室標準委員會（NCCLS)制定的 標準評價方案EP9-A文件《用患者樣品進行方法對比及偏倚評估》 EP9-A1文件 （1995年第一版）

3、 EP9-A2文件 （2002年第二版）,,實驗前準備,1.確定實驗方法（Y）和比較方法（X）實驗方法（Y）=強生950干化學檢測系統(tǒng)比較方法（X）＝AU640濕化學檢測系統(tǒng),,,對儀器進行一次完整的保養(yǎng)，確認儀器處于良好的狀態(tài)。應準備同一批號足夠的試劑盒。整個實驗過程都必須有分析過程的質(zhì)量控制弄清每個檢測項目的可報告范圍。,2.比較方法（X ）檢測系統(tǒng)的準備,,,熟悉儀器操作及保養(yǎng)程序。應準備好足夠的干片，每個產(chǎn)品

4、要求是同一 批號。整個實驗過程都必須有分析過程的質(zhì)量控制進行精密度實驗。（不能實現(xiàn)精密度要求的，應首先解決問題再做以下實驗）,3.實驗方法（Y ）檢測系統(tǒng)的準備,方法對比實驗,（方法和結(jié)果）,標本的選擇,標本必須充分地表現(xiàn)病人的種類和實驗室所研究的范圍。比較研究結(jié)果的好壞直接取決于使用的標本。適當?shù)臉吮緦Ψ治鲋陵P重要，比較理想的是用新鮮的血清，并在兩個小時內(nèi)同時用新分析儀和比較方法進行分析。必要是可以選擇冷凍的標本。但

5、注意：如果利用貯存的標本，必須用比較方法重新測定這些標本。并且兩種方法的標本貯存和處理應該保持一致。質(zhì)控血清不能提供和實際病人標本同樣的信息（由于不同的基質(zhì)效應，不同的同工酶等等。）,,樣本來源 －臨床上“典型”病人標本，不要使用溶血或其它含有干擾此方法組份的樣本。實驗標本數(shù) －40份,實驗樣品,測定標本,每天隨機抽取5份樣本，共測定8天。每個標本分別用干化學法和濕化學法測定，分別測定2次。按順序1---5進行測

6、定，再按相反順序5---1重復測定。,病人樣本檢驗結(jié)果－表1,分析數(shù)據(jù)過程,刪除超出可報告范圍以外的數(shù)據(jù)初步數(shù)據(jù)檢查線形回歸計算預期偏差及其可信區(qū)間,數(shù)據(jù)的刪除,EP9-A文件規(guī)定，不使用超出可報告范圍以外的數(shù)據(jù)。刪除超出可報告范圍以外數(shù)據(jù)，再繼續(xù)數(shù)據(jù)的處理。,初步數(shù)據(jù)檢查過程,方法內(nèi)雙份數(shù)據(jù)中離群值的檢查數(shù)據(jù)作圖線形相關的目測檢查方法間離群點的檢查X值合適范圍的檢查,計算標準化（相對）的絕對差值均值 DXi’

7、=∑ DXi’ /N,方法內(nèi)離群值的檢查過程,計算絕對差值 DXi=︱Xi1-Xi2︱,計算標準化（相對）的絕對差值 DXi’ =︱Xi1-Xi2︱/ Xi,,計算絕對差值均值 DX=∑DXi/N,,,以絕對差值均值DX、DY的4倍為可接受限，若絕對差值（DX或DY）超出此限，則附加計算標準化的絕對差值。以標準化的絕對差值均值DXi’ 、DYi’ 的4倍作為標準化的絕對差值的檢測界限，若超過此限則為離群值。排除離群點

8、數(shù)不能超過樣品總數(shù)的2.5%。,離群點判斷規(guī)則,,,,,方法內(nèi)離群值的檢查結(jié)果－表2,,,雙份測定平均值的散點圖：Yi Xi,數(shù)據(jù)作圖－散點圖,,,,全部結(jié)果的散點圖： Yij Xi,,,偏倚圖（雙份測定平均值之差） （Yi – Xi ） Xi,數(shù)據(jù)作圖－偏倚圖,,,,,偏倚圖（每次測定與平均值之差） （ Yij– Xi

9、 ） Xi,1.當比較方法X為參考方法,,,,偏倚圖（雙份測定平均值之差） （Yi – Xi ） （ Xi + Yi ） /2,數(shù)據(jù)作圖－偏倚圖,,,,,偏倚圖（每次測定與平均值之差） （ Yij– Xi ） （ Xi + Yi ） /2,2.當比較方法X不是參考方法,,,,,,線性相關的目測,線性關系滿意 進行下一步。 線性部分太窄，每種方

10、法線性部分必須分別檢查，找到非線性原因。,,,,存在明顯非線性相關,高濃度區(qū),低濃度區(qū),余下線性區(qū),截去非線性數(shù)據(jù),,,替換被排除樣品,,,非線性,非線性,是否包含醫(yī)學上有意義濃度范圍,確實如此,重新分析數(shù)據(jù),計算標準化（相對）的絕對差值均值 E’ =∑∑Eij’ /2N (N=40),方法間離群值的檢查過程,計算絕對差值 Eij=︱Yij-Xi︱,計算標準化（相對）的絕對差值 Eij’ =

11、︱Yij-Xi︱/ Xi,,計算絕對差值均值 E=∑∑Eij/2N (N=40),,,,N,i,2,j,N,2,i,j,,,相關分析－X最適范圍實驗,X變量存在誤差會影響相關系數(shù)r ，但如果數(shù)據(jù)X范圍足夠?qū)?，那么這個誤差對于回歸分析的影響被認為很小。,,r=,√∑∑(Xij– X )2,,√∑∑(Yij– Y )2,·,,,,∑∑(Xij– X )(Yij– Y ),,,X=∑∑Xij/2N (N=40),Y=

12、∑∑Yij/2N (N=40),,,,如果r≥0.975（或r2 ≥0.95 ），則認為X范圍適合，數(shù)據(jù)滿足要求。X的誤差可以由數(shù)據(jù)范圍給以適當補償，并且簡單的線性回歸可以用來評價斜率和截距。如果r2 <0.95 ，那么必須通過分析另外一些樣品以擴大數(shù)據(jù)范圍，然后再檢查全部數(shù)據(jù)系列。,回歸分析,直線方程式：y=mx+by＝比較方法的結(jié)果x＝Vitros方法的結(jié)果b＝直線的y 軸截距m＝直線的斜率,通過散點圖

13、的數(shù)據(jù)點，可以用線性回歸分析找出“最好”的適配的直線方程式。,截距（b）測定了恒定誤差。理想值＝0斜率（m）測定了比例誤差。理想值＝1,回歸分析的解釋,結(jié)果評價,偏差的評價方案,數(shù)據(jù)滿足最適范圍檢查 數(shù)據(jù)均勻離散分布,數(shù)據(jù)不滿足最適范圍檢查 使用分步偏差計算平均偏差,1.用線性回歸方程評價,3.用分步殘量程序評價,2.用分步偏差程序評價,數(shù)據(jù)存在精密度變化 用分步偏差計算分步的殘余值,殘量：一個給定的數(shù)

14、據(jù)點與回歸線之間在Y軸方向測定出的差別，成為此點的殘量。 殘量Rij = Yij – Yij = Yij –(a+b Xij ）評估標準差（the Standard Error of the Estimate）SEE，又稱殘量的標準差，是測定圍繞回歸線的離散度，也即是Sy.x。,殘量及其標準差,∧,Sy.x=√∑∑(Yij–Yij )/(2N-2),∧,,則68%的點應預期落在1Sy.x內(nèi)95%應在2Sy.x內(nèi)而99

15、.7%應在3Sy.x內(nèi)。,1.如果回歸直線的變異是呈正態(tài)分布,2.Sy.x測定了隨機誤差。理想值＝0 Sy.x 值較大，可能意味著：,一種或兩種方法的較差的精密度 兩種方法之間的不同特性 對Sy.x 解釋的前提是每個方法均有較好精密度。,,1.在給定的醫(yī)學決定水平Xc’，預期偏差Bc 的估計可按下式計算：,計算預期偏差,Bc=a+（b-1）Xc,∧,2.Bc的95％可信范圍（在Xc的真正偏差）可按下式計算：,Low