化學(xué)發(fā)光微流控順序注射生化分析系統(tǒng)的建立及表征.pdf

1、微流控芯片是微全分析系統(tǒng)的核心技術(shù)，具有便攜、易于集成、分析速度快和消耗試劑量少等優(yōu)點(diǎn)。順序注射具有系統(tǒng)簡(jiǎn)單，進(jìn)樣量及進(jìn)樣次序可程序控制等特點(diǎn)。而化學(xué)發(fā)光法，設(shè)備簡(jiǎn)單，靈敏度高，是微全分析系統(tǒng)較為理想的檢測(cè)方法之一?；陧樞蜃⑸涞脑韺⑽⒘骺匦酒夹g(shù)與化學(xué)發(fā)光檢測(cè)方法相結(jié)合，在生化分析中將有很大的潛力，尤其在流動(dòng)焦磷酸測(cè)序中可能得到很好的體現(xiàn)。
　　第一章重點(diǎn)對(duì)典型的基于發(fā)光檢測(cè)的焦磷酸測(cè)序法的原理，應(yīng)用及主要的影響因素進(jìn)行了綜述

2、，指出在保證熒光素酶熱穩(wěn)定性的條件下，提高溫度有利于焦磷酸測(cè)序的可靠性提高。
　　第二章以葡萄糖的酶的轉(zhuǎn)化和魯米諾-鐵氰化鉀化學(xué)發(fā)光檢測(cè)作為模型，對(duì)所建立的化學(xué)發(fā)光微流控順序注射生化分析系統(tǒng)進(jìn)行了表征。先將GOX(葡萄糖氧化酶)固定在Affimag SLE磁珠上，通過磁鐵將其固定，形成流動(dòng)磁珠微反應(yīng)器。基于石英毛細(xì)管以及Tygon建立了具有“Y”型通道的微流控順序注射分析系統(tǒng)，成功實(shí)現(xiàn)了酶反應(yīng)與化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的空間分離，同時(shí)初步展示

3、了該系統(tǒng)在葡萄糖的化學(xué)發(fā)光分析檢測(cè)中的可能應(yīng)用。
　　第三章將微區(qū)溫度控制單元引入建立的流動(dòng)分析系統(tǒng)中，以優(yōu)化酶反應(yīng)溫度條件。使用ITO玻璃作為加熱元件，鉑電極作為溫度傳感器，PC機(jī)溫度程序控制系統(tǒng)進(jìn)行溫度控制。通過對(duì)固定化的葡萄糖氧化酶反應(yīng)區(qū)的溫度來改變葡萄糖氧化酶的催化活性，對(duì)酶反應(yīng)的溫度進(jìn)行優(yōu)化。
　　此生化分析系統(tǒng)容易建立和控制，有望克服焦磷酸測(cè)序過程中發(fā)生正配的堿基數(shù)目與所得到的熒光信號(hào)不成比例的問題。