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1、微量元素與維生素異常的生物化學(xué)檢驗(yàn),1,臨床檢驗(yàn)教研室龔曉華,,1、掌握微量元素與維生素的概念;常用微量元素與維生素的檢測(cè)方法及參考區(qū)間;微量元素與維生素在體內(nèi)含量變化的臨床意義,2、熟悉微量元素及維生素的種類(lèi)、代謝特點(diǎn)及功能,本章教學(xué)要求:,2,第一節(jié) 微量元素的生化檢驗(yàn),,3,必需微量元素:對(duì)維持人的生命,保持正常生理功能所必需的,缺乏時(shí)會(huì)導(dǎo)致某種疾病或嚴(yán)重功能不全的微量元素,4,一、樣本的收集,1、血液樣本:是臨床上常用的檢測(cè)
2、樣本,常用血清,通常為清晨空腹靜脈血或毛細(xì)血管血,采血后立即檢測(cè)。紅細(xì)胞中含有高濃度的鋅,要防止樣本溶血,造成血清鋅濃度偏高。2、尿液樣本:可反映體內(nèi)微量元素的代謝和排泄?fàn)顩r。但尿液標(biāo)本影響因素較多,且濃度偏低,只有在特殊情況下才會(huì)使用3、毛發(fā)和指甲樣本:有一定的局限性4、唾液樣本:采樣在早晨空腹時(shí)進(jìn)行,5,二、樣本的制備和處理方法,稀釋法高溫干灰化法常壓濕消化法高壓濕消化法燃燒法水解法等,6,三、樣本的分析測(cè)定方法,分
3、光光度法原子吸收光譜法電感耦合等離子體發(fā)射光譜法中子活化分析法質(zhì)譜法色譜法等,7,四、主要的微量元素,(一)鐵和總鐵結(jié)合力,血清總鐵結(jié)合力(TIBC):是指血清中的轉(zhuǎn)鐵蛋白全部被鐵飽和所能結(jié)合的鐵量。正常人血液循環(huán)中的轉(zhuǎn)鐵蛋白約30%被飽和。鐵飽和度:血清鐵和總鐵結(jié)合力的百分比 鐵飽和度=血清鐵/血清總鐵結(jié)合力×100%,8,人體內(nèi)鐵分類(lèi):功能鐵(2/3)、貯存鐵(1/3) 含量:約為3~5g
4、吸收部位:整個(gè)消化道均可吸收排泄:每日約排泄0.5~1mg,1、檢驗(yàn)項(xiàng)目,鐵(Fe),9,2、檢測(cè)方法,亞鐵嗪比色法,血清鐵:血清鐵和轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合成復(fù)合物,在酸性介質(zhì)中鐵從復(fù)合物中解離出來(lái),再被還原劑還原成二價(jià)鐵,并與亞鐵嗪生成紫紅色化合物,在波長(zhǎng)562nm處有一吸收峰,與同樣處理的標(biāo)準(zhǔn)液比較,即可求得血清中鐵的含量。,10,2、檢測(cè)方法,亞鐵嗪比色法,總鐵結(jié)合力:將過(guò)量的鐵標(biāo)準(zhǔn)液加到血清中,使之與未帶鐵的轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合,多余的鐵被輕質(zhì)
5、碳酸鎂粉吸附除去,然后測(cè)定血清中的總鐵含量,即為總鐵結(jié)合力。,11,3、參考區(qū)間,血清鐵男性:11-30 umol/L(170-600ug/dL)女性:9-27 umol/L(500-1500ug/dL)血清總鐵結(jié)合力男性:50-77 umol/L(2800-4300ug/dL)女性:54-77 umol/L(3000-4300ug/dL),12,4、臨床意義,(1)降低:主要見(jiàn)于缺鐵性貧血,缺鐵三個(gè)階段 鐵減少期:儲(chǔ)存鐵減
6、少,血清鐵濃度下降,無(wú)臨床癥狀 紅細(xì)胞生成缺鐵期(無(wú)貧血缺鐵期):血清鐵、鐵蛋白下降,TIBC增高,處于亞臨床癥狀階段缺鐵性貧血期:Hb和HCT下降,出現(xiàn)不同程度的低色素性貧血。,治療常用硫酸亞鐵,13,4、臨床意義,(2)增加:鐵中毒,急性鐵中毒:過(guò)量誤服亞鐵鹽;食用鐵器煮的食物 ;靜脈注射鐵劑過(guò)量 慢性鐵中毒:長(zhǎng)期過(guò)量服用或注射鐵劑;攝入含鐵量高的特殊食品;慢性酒精中毒;多次大量輸血,14,(二)鋅,1、檢驗(yàn)項(xiàng)目,正常成年人含
7、鋅總量為2-3g鋅存在于人體所有組織中,視網(wǎng)膜、胰腺及前列腺含鋅較高鋅主要由糞便、尿液、汗液、乳腺、頭發(fā)排泄,失血也是丟失鋅的重要途徑。,15,2、檢測(cè)方法,3、參考區(qū)間,成人血清鋅9.0-20.7 umol/L(170-600ug/L)尿鋅2.3-19.9 umol/L(2800-4300ug/dL),吡啶偶氮酚比色法,16,4、臨床意義,血清鋅降低見(jiàn)于(1)酒精性肝硬化及慢性肝臟疾病(2)急慢性傳染病,急性組織損傷等
8、(3)腎病綜合征、慢性腎功能不全(4)胃腸道吸收障礙、糖尿病的等(5)肺癌及惡性淋巴瘤,17,血清鋅升高見(jiàn)于(1)兒童不適當(dāng)補(bǔ)鋅(2)工業(yè)污染中的急性鋅中毒(3)甲狀腺功能亢進(jìn)、高血壓等,18,(三)銅,1、檢驗(yàn)項(xiàng)目,經(jīng)消化道吸收,主要吸收部位是十二指腸和小腸上段,少量由胃吸收銅藍(lán)蛋白是運(yùn)輸銅的基本載體肝臟是儲(chǔ)存銅的倉(cāng)庫(kù),含銅量最高,腦和心臟也含有較多的銅,19,2、檢測(cè)方法,3、參考區(qū)間,成人血清銅男性:10.99-2
9、1.98umol/L(700-1400ug/L)女性:12.56-23.55umol/L(800-1500ug/L)尿銅0.24-0.47 umol/24小時(shí),環(huán)己酮草酰二腙比色法,20,血清銅生理性變化(1)性別:女性略高于男性(2)年齡:隨年齡增長(zhǎng)呈增高趨勢(shì)(3)月經(jīng)周期與妊娠,4、臨床意義,21,血清銅降低見(jiàn)于(1)肝豆?fàn)詈俗冃裕貉蹇傘~及Cp均降低(2)營(yíng)養(yǎng)不良、腎病綜合征及燒傷所致的低蛋白血癥,4、臨床意義,2
10、2,血清銅升高見(jiàn)于(1)肝內(nèi)外膽汁瘀滯:如肝硬化、肝轉(zhuǎn)移癌或其他惡性腫瘤 血清銅和Cp均升高(2)各種感染、白血病、貧血、心肌梗死及淋巴瘤等(3)風(fēng)濕病、甲亢、妊娠或注射雌激素等,4、臨床意義,23,第二節(jié) 維生素異常的生化檢驗(yàn),維生素:指存在于大多數(shù)食物中的一類(lèi)含量少,彼此無(wú)關(guān),但又為維持機(jī)體正常代謝功能所必需的有機(jī)物。在生物體,其主要功能是作為輔酶的成分,調(diào)節(jié)機(jī)體代謝。如果缺乏會(huì)出現(xiàn)維生素缺乏癥。,24,維生素缺乏癥的原因
11、1、攝入不足2、機(jī)體的吸收利用率降低3、維生素的需要量相對(duì)增高4、食物以外的維生素供給不足,25,一、主要維生素的代謝及其紊亂,按溶解性能分為兩類(lèi)(一)脂溶性維生素:不溶于水,溶于脂類(lèi)及有機(jī)溶劑。如:維生素A、D、E、K。(二)水溶性維生素:能溶于水,如維生素B1、B2、B6、B12、C、PP、葉酸。,,,27,二、維生素異常的生化檢驗(yàn),(一)維生素測(cè)定的樣品及分析方法,28,(二)維生素代謝異常的檢測(cè),1、維生素A,又稱(chēng)抗
12、眼干燥癥維生素,有A1(視黃醇)和A2(3-脫氫視黃醇)兩種,臨床上多為A1。維生素A只存在于動(dòng)物性食物中,植物食品中含有維生素A原--胡蘿卜素。維生素A在體內(nèi)的活性形式包括視黃醇、視黃醛和視黃酸。,29,維生素A生物學(xué)作用: 促進(jìn)視覺(jué)細(xì)胞感光物質(zhì)的合成與再生 參與糖蛋白的合成 促進(jìn)生長(zhǎng)發(fā)育 具有抑癌作用 維持機(jī)體正常免疫功能,30,(1)檢測(cè)方法,三氯化銻比色法,分光光度法易受β-胡蘿卜素干擾,適用于樣品中含
13、維生素A高的樣品??焖?、方法簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確、樣品用量少,最低檢出量0.8ng。一般以血清視黃醇來(lái)代表維生素A的水平,HPLC法是目前測(cè)定視黃醇的推薦方法。,31,(2)參考區(qū)間,<20ug/L為缺乏,20~30ug/L為可疑缺乏,(3)臨床意義,維生素A缺乏:夜盲癥、干眼癥、角膜軟化病等 維生素A過(guò)量:急性、慢性及致畸毒性,32,2、維生素D 見(jiàn)十五章內(nèi)容,3、維生素E,維生素E是指具有α-生育酚生物活性的一類(lèi)物質(zhì)。在膽汁酸
14、存在下,維生素E被小腸吸收,多數(shù)通過(guò)淋巴進(jìn)入血液,并與CM和VLDL結(jié)合。維生素E存在于多種組織,以脂肪組織最多,其中植物種子油中含量最為豐富。,33,維生素E生物學(xué)作用:抗氧化作用,預(yù)防衰老促進(jìn)血紅素代謝促進(jìn)蛋白質(zhì)合成與生殖功能有關(guān),34,(1)檢測(cè)方法,熒光法和HPLC法,(2)參考區(qū)間,26.30±5.15umol/L,(3)臨床意義,維生素E缺乏:溶血性貧血維生素E過(guò)量:抑制生長(zhǎng),干擾血液凝固出現(xiàn)骨骼萎縮、凝
15、血時(shí)間延長(zhǎng)等表現(xiàn),35,4、維生素C,又稱(chēng)抗壞血酸,來(lái)源于新鮮水果和綠葉蔬菜中,在小腸被吸收,從尿中排出。在體內(nèi)以垂體、腎上腺等組織中和血液中的血小板和白細(xì)胞中濃度最高,其次肝、腎、心肌、胰等組織含量也高。,36,維生素C生物學(xué)作用:促進(jìn)鐵的吸收促進(jìn)膠原蛋白的合成是7-α羥化酶的輔酶參與芳香族氨基酸的代謝參與體內(nèi)氧化還原反應(yīng),37,(1)檢測(cè)方法,直接碘量法,還可用分光光度法、熒光法和HPLC法,(2)參考區(qū)間,28.4~79
16、.5umol/L(5~14mg/L)<11.4umol/L(2mg/L)可出現(xiàn)癥狀尿液中<20mg可診斷為維生素缺乏,38,(3)臨床意義,維生素C缺乏:壞血病維生素C過(guò)量:惡心、腹瀉、鐵的吸收過(guò)度、膽固醇升高、腎結(jié)石、膀胱結(jié)石等,39,5、維生素B12,又稱(chēng)鈷胺素,是唯一含金屬元素的維生素。肝臟中維生素B12含量豐富,在回腸吸收。因結(jié)合的基團(tuán)不同,可形成多種存在形式,如羥鈷胺素、氰鈷胺素、甲鈷胺素、5’-脫氧腺苷鈷胺
17、素,后兩者是維生素B12的活化型,也是血液中存在的主要形式。,40,(1)檢測(cè)方法,放射免疫法,(2)參考區(qū)間,148~660pmol/L,(3)臨床意義,維生素B12缺乏:惡性貧血、出血時(shí)間延長(zhǎng)、精神抑郁、厭食等維生素B12過(guò)量:哮喘、濕疹等過(guò)敏反應(yīng),神經(jīng)興奮、心悸等。導(dǎo)致葉酸缺乏,41,6、葉酸,葉酸又稱(chēng)維生素M,亦稱(chēng)蝶酰谷氨酸,體內(nèi)活性形式為四氫葉酸(FH4)。動(dòng)植物食物中都含有葉酸,肝與腎中含量豐富,在小腸吸收,排泄主要通過(guò)膽
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