納米氧化鎳致大鼠肺毒性及其分子機(jī)制研究.pdf

1、 分類號(hào)：R114 密級(jí)： 專 業(yè) 學(xué) 位 研 究 生 學(xué) 位 論 文 論 文題 目（ 中文） 論 文題 目（ 中文） 納米氧化鎳致大鼠肺 納米氧化鎳致大鼠肺毒性 毒性及其分子機(jī)制研究 及其分子機(jī)制研究 論 文題 目（ 論 文題 目（ 外文） 文） Molecular mechanisms related to nickel

2、oxide nanoparticles-induced pulmonary toxicity in rats 研 究 生 姓 名 研 究 生 姓 名 朱安 朱安 學(xué) 位 學(xué) 位 類 別 類 別 公共衛(wèi)生 公共衛(wèi)生 學(xué) 位 級(jí) 別 學(xué) 位 級(jí) 別 碩士 碩士 校內(nèi)導(dǎo)師姓名、職稱 校內(nèi)導(dǎo)師姓名、職稱 孫應(yīng)彪 孫應(yīng)彪 教授 教授 校外導(dǎo)師單位 校外導(dǎo)師單位、姓名 姓名 蘭州市疾病預(yù)防控制中心 蘭州市疾病預(yù)防控制中心 李盛 李盛

3、論 文 工 作 論 文 工 作 起 止 年 月 起 止 年 月 201 2015 年 3 月至 月至 201 2016 年 6 月 論 文 提 交 日 期 論 文 提 交 日 期 201 2017 年 4 月 論 文 答 辯 日 期 論 文 答 辯 日 期 201 2017 年 5 月 學(xué) 位 授 予 日 期 學(xué) 位 授 予 日 期 201 2017 年 6 月 校址：甘肅省蘭州市 校址：甘肅省蘭州市I 納米氧化鎳致大鼠肺毒性及

4、其分子機(jī)制研究 納米氧化鎳致大鼠肺毒性及其分子機(jī)制研究 摘 要 目的： 目的：通過氣管滴注納米氧化鎳（nickel oxide, NiO）染毒，建立大鼠亞慢性肺損傷模型， 從氧化應(yīng)激及 NF-κB、 TGF-β1/Smad 信號(hào)通路等角度探討其相關(guān)的分子機(jī)制。 方法 方法：40 只健康成年雄性 Wistar 大鼠（200~240 g）隨機(jī)分為對(duì)照組（生理鹽水） ，納米 NiO 組（0.015、0.06 和 0.24 mg/kg b.w）

5、和微米 NiO 組（0.24 mg/kg b.w） ，1 ml/kg b.w 氣管滴注，每周 2 次，連續(xù) 6 周。染毒結(jié)束并心臟采血后處死大鼠并摘取肺組織。 （1） 記錄大鼠體重和進(jìn)食量， 計(jì)算食物利用率； 稱量肺濕重，計(jì)算臟器系數(shù)。 （2）常規(guī)制備肺組織 HE 染色和 Masson 染色切片，光學(xué)顯微鏡下分別觀察肺損傷和肺組織纖維化程度。 （3） 制備肺組織勻漿， ELISA 法測(cè)定 8-羥基脫氧鳥苷（8-OHdG）和致纖維化因子轉(zhuǎn)

6、化生長因子 β1（TGF-β1）水平，以及炎性反應(yīng)因子白介素-6（IL-6） 、IL-10、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）和中性粒細(xì)胞趨化因子-1（CINC-1） 、CINC-2αβ 和 CINC-3 含量。生化法測(cè)定氧化應(yīng)激效應(yīng)指標(biāo)羥自由基（?OH） 、脂質(zhì)過氧化物（LPO） 、過氧化氫酶（CAT） 、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）和總抗氧化能力（T-AOC）水平。 （4）采用 RT-qPCR 檢測(cè)肺組織細(xì)胞血紅素加氧酶-1（HO

7、-1） 、金屬硫蛋白酶（MT-1） 、核因子-κB（NF-κB） 、 IκB 激酶-α （IKK-α） 、 NF-κB 誘導(dǎo)激酶 （NIK） 、 T 細(xì)胞表達(dá)的 T 盒 （T-bet） 、GATA-3、TGF-β1、Smad2、Smad4、E-鈣黏蛋白（Ecadherin） 、肌動(dòng)蛋白 α（α-SMA） 、 波形蛋白（Vimentin） 、 基質(zhì)金屬蛋白酶-9 （MMP-9） 、 基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-1（TIMP-1）和結(jié)締組織生長因

8、子（CTGF）的 mRNA 表達(dá)水平。 （5）采用Western blot 檢測(cè) I 型膠原（COL1A1） 、III 型膠原（COL3A1） 、NF-κB、IKK-α、NIK、T-bet 和 GATA-3 的蛋白表達(dá)水平。 結(jié)果 結(jié)果： （1）納米 NiO 染毒第 5 和 6 周，0.06 和 0.24 mg/kg 納米 NiO 組大鼠體重和食物利用率均低于對(duì)照組（P<0.05） 。染毒結(jié)束后，0.24 mg/kg 納米 NiO

9、組肺濕重及其臟器系數(shù)均高于對(duì)照組（P<0.05） 。 （2）HE 染色可見染毒組肺組織炎性細(xì)胞浸潤、肺泡間隔增寬，并有 NiO 顆粒沉積，尤以 0.24 mg/kg 納米 NiO組多見。 （3）Masson 染色可見染毒組肺組織中膠原沉積明顯，羥脯氨酸含量、COL1A1 和 COL3A1 蛋白表達(dá)量均明顯升高，尤以 0.24 mg/kg 納米 NiO 組肺纖維化顯著。 （4）0.24 mg/kg 納米 NiO 組肺組織中促炎因子