定量分析課件

1、第一節(jié) 樣品分析的前處理,一、幾類(lèi)典型藥物 1、有機(jī)鹵素藥物 所含鹵原子均直接和碳原子相連，但不同藥物中鹵素所處位置不同，則與碳原子結(jié)合的牢固程度就有差異，與芳環(huán)相連則結(jié)合牢固，與脂肪鏈相連則結(jié)合不牢固。,在藥物定量分析前，一般需要根據(jù)分析方法的特點(diǎn)和化學(xué)原料藥的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)及藥物制劑的處方組成采用不同的方法對(duì)試樣進(jìn)行前處理，以滿(mǎn)足所選分析方法對(duì)試樣的要求。,碘番酸（iopanoic acid）：,三氯叔丁醇（

2、chlorobutanol）,2、含金屬有機(jī)物,酒石酸銻鉀：,金屬原子不直接與碳原子相連，通常為有機(jī)酸及酚的鹽或配位化合物，稱(chēng)為金屬的有機(jī)藥物。其分子結(jié)構(gòu)中的金屬原子結(jié)合不牢固，在水中即可離解出金屬離子。,卡巴胂（carbarsone）：,金屬離子直接與碳原子以共價(jià)鍵的形式相連接，結(jié)合狀態(tài)比較牢固，稱(chēng)為有機(jī)金屬藥物。在溶液中其金屬離子一般不能解離成離子狀態(tài)。,二、前處理的方法,分析含金屬和鹵素的有機(jī)藥物之前，應(yīng)經(jīng)過(guò)適當(dāng)?shù)奶幚?，使金屬和鹵

3、素轉(zhuǎn)變?yōu)檫m于分析的狀態(tài)，方可進(jìn)行鑒別和含量測(cè)定。 1、不經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法 ⑴直接測(cè)定法 凡金屬原子不直接與碳原子相連的含金屬藥物或某些C-M鍵結(jié)合不牢固的有機(jī)金屬藥物，在水溶液中可以電離，因而不需要有機(jī)破壞，可直接選用適當(dāng)?shù)姆椒ㄟM(jìn)行測(cè)定。,如：①富馬酸亞鐵的測(cè)定：富馬酸亞鐵 溶于熱稀礦酸（不溶于水） 分解放出Fe2+ 硫酸鈰滴定

4、 領(lǐng)二氮菲作指示劑 指示劑與 Fe2+形成紅色配位化合物 （2） 經(jīng)水解后測(cè)定法① 直接回流后測(cè)定法： 適用于含鹵素有機(jī)藥物結(jié)構(gòu)中鹵素原子結(jié)合不牢固的藥物； 方法：將含有鹵素的有機(jī)藥物溶于適當(dāng)溶劑（如乙醇）中，加NaOH溶液或AgNO3溶液后，加熱回流使其水解，將有機(jī)結(jié)合的鹵素經(jīng)過(guò)水解作用轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)的鹵素離子，然后用間接銀量法進(jìn)行測(cè)定，如：三氯叔丁醇的測(cè)定：,,,

5、,,,原理： 三氯叔丁醇+NaOH CL-解離下來(lái) 與硝酸銀生成氯化銀沉淀 過(guò)量硝酸銀用硫氰酸銨液回滴定②硫酸水解后測(cè)定：如：硬脂酸鎂，與定量的硫酸溶液共沸，水解生成硬脂酸和硫酸鎂，剩余的酸以NaOH液滴定。,,,,（3）經(jīng)氧化還原后測(cè)定法① 堿性還原后測(cè)定： 鹵素結(jié)合于芳環(huán)上時(shí)，由于分子中碘的 結(jié)合較固定，需在堿性溶液中加還原劑（如鋅粉）

6、回流，使C-I鍵斷裂，形成無(wú)機(jī)碘化物后測(cè)定。如碘番酸、泛影酸的測(cè)定。② 酸性還原后測(cè)定： 碘番酸在醋酸酸性條件下用鋅粉還原，使C-I鍵斷裂，形成無(wú)機(jī)碘化物后用銀量法測(cè)定。,③ 利用藥物中可游離的金屬離子的氧化性測(cè)定含量。 a、含銻藥物：利用五價(jià)銻有機(jī)藥物中可游離的Sb5+的氧化性，在酸性液中氧化碘化鉀，并定量析出碘，可用硫代硫酸鈉滴定。 b、含鐵藥物：將含鐵藥物加酸溶解后，便游離出Fe3+，利用在酸性溶液中

7、氧化碘化鉀，析出的碘可用硫代硫酸鈉液滴定以測(cè)定含量。,2、經(jīng)有機(jī)破壞的分析方法,含金屬有機(jī)物及有機(jī)鹵素藥物結(jié)構(gòu)中的金屬原子、鹵素與碳原子結(jié)合牢固者，用上述方法難以將有機(jī)結(jié)合的金屬原子及鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)機(jī)的金屬化合物及鹵素化合物，此時(shí)必須采用有機(jī)破壞的方法將藥物分子破壞，使有機(jī)結(jié)合狀態(tài)的金屬及鹵素轉(zhuǎn)變?yōu)榭蓽y(cè)定的無(wú)機(jī)化合物，方可選用適合的分析方法進(jìn)行測(cè)定。,(1) 濕法破壞法①、硝酸-高氯酸法（HNO3-HCLO4） 破壞能力強(qiáng)，反應(yīng)比較激

8、烈。本法適用于血、尿、組織等生物樣品的破壞。所得到的無(wú)機(jī)金屬離子一般為高價(jià)態(tài)。 ②、硝酸-硫酸法（ HNO3-H2SO4 ） 本法適用于大多數(shù)有機(jī)物質(zhì)的破壞，如染料、中間體或藥物等。無(wú)機(jī)離子為高價(jià)態(tài)。③、硫酸-硫酸鹽法（H2SO4-MSO4）： 本法適用于含砷和銻有機(jī)藥物的破壞分解，最后得到低價(jià)態(tài)的金屬離子。④、其它濕法,（2） 干法破壞 本法適用于含有鹵素、硫、磷等有機(jī)藥物定量分析的前處理。①高溫灼燒法

9、 本法是將含有待測(cè)元素的有機(jī)物經(jīng)高溫灼燒灰化，使有機(jī)物結(jié)構(gòu)分解，而待測(cè)元素轉(zhuǎn)化為無(wú)機(jī)元素或可溶性無(wú)機(jī)鹽的前處理方法。 適用于濕法不易破壞完全的有機(jī)物以及某些不能用硫酸進(jìn)行破壞的有機(jī)藥物；不適用于含易揮發(fā)性金屬有機(jī)藥物的破壞。 常加無(wú)水碳酸鈉、硝酸鎂、氫氧化鈣、氧化鋅等輔助灰化。,②氧瓶燃燒法 a、原理：將有機(jī)藥物放入充滿(mǎn)氧氣的密閉的燃燒瓶中進(jìn)行燃燒，并將燃燒所產(chǎn)生的待測(cè)物質(zhì)吸收于適當(dāng)?shù)奈找褐校缓蟾鶕?jù)待測(cè)物質(zhì)的

10、性質(zhì)，采用適宜的分析方法進(jìn)行鑒別、檢查或測(cè)定含鹵素有機(jī)藥物或含硫、氮、硒等其他元素的有機(jī)藥物。,b、儀器裝置： 燃燒瓶為500、1000或2000ml磨口、硬質(zhì)玻璃錐形瓶，瓶塞應(yīng)嚴(yán)密、空心,底部熔封鉑絲一根（直徑為1mm），鉑絲下端作成網(wǎng)狀或螺旋狀，長(zhǎng)度約為瓶身長(zhǎng)度的2/3。,例：碘苯酯的測(cè)定方法： 取樣品約20mg，精密稱(chēng)定，照氧瓶燃燒法進(jìn)行有機(jī)破壞。用NaOH 試液2ml與水10ml為吸收液，待

11、吸收完全后，加溴醋酸溶液（取醋酸鉀10g，加冰醋酸適量使溶解，加溴0.4ml，再加冰醋酸使成100ml）10ml，密塞，振搖，放置數(shù)分鐘，加甲酸約1ml，用水洗滌瓶口，并通入空氣約3-5min以除去剩余的溴蒸汽，加碘化鉀2g，密塞，搖勻，用硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/ml）滴定，至近終點(diǎn)時(shí)，加淀粉指示液，繼續(xù)滴定至藍(lán)色消失，并將滴定的結(jié)果用空白試驗(yàn)校正。每1ml的硫代硫酸鈉滴定液（0.02mol/ml）相當(dāng)于1.388mg的C19

12、H29IO2.,三、生物樣品中藥物的分析前處理：,生物樣品：包括各種體液和組織，但實(shí)際上最常用的是比較容易得到的血液（血漿、血清和全血）、尿液和唾液，在特定情況下運(yùn)用乳汁、脊髓、精液等。藥物及其代謝物從血漿或尿中分離的實(shí)驗(yàn)步驟： （1）藥物從蛋白結(jié)合物或綴合物中釋出 ①、蛋白變性：如應(yīng)用三氯醋酸、HCLO4、有機(jī)溶劑（乙醇、丙酮、乙氰）使蛋白沉淀。 ②、鹽酸水解 ③、酶消化法（最常用的是蛋白水解酶——枯草菌溶素）,（2）凈化

13、 ①、溶劑提取加鹽或其他試劑 ②、固相提取柱法：離子交換樹(shù)脂、氧化鋁、XAD-2型樹(shù)脂、活性炭、凝膠、ODS（十八烷基硅烷。）（3）測(cè)定 ①、薄層色譜 ②、柱色譜CC（column chromatogr） ③、衍生化后進(jìn)行氣相色譜GLC：,第二節(jié) 藥物含量測(cè)定方法,一、重量分析法基本原理： 稱(chēng)取一定重量的樣品，用適當(dāng)?shù)姆椒▽⒋郎y(cè)組分與樣品中其他組分分離，根據(jù)被測(cè)組分和供試品的重量比計(jì)算組分

14、的百分含量。,優(yōu)點(diǎn) 準(zhǔn)確度高，精密度好,缺點(diǎn) 操作繁瑣、費(fèi)時(shí) 靈敏度低,方法：,揮發(fā)法萃取法沉淀法,（1）揮發(fā)法,利用被測(cè)組分具有揮發(fā)性或?qū)⑵滢D(zhuǎn)化為揮發(fā)性物質(zhì)，稱(chēng)取揮發(fā)前后供試品的重量，計(jì)算被測(cè)組分的含量。,,,a 直接揮發(fā)法 稱(chēng)得的重量或增加的重量就是被測(cè)組分的重量,①. 用高氯酸鎂吸收揮發(fā)的結(jié)晶水 計(jì)算其增加的重量,,,②. 熾灼殘?jiān)鼫y(cè)定法,b 間接揮發(fā)法

15、 樣品減少的重量是被測(cè)組分重量,干燥失重測(cè)定法,,（2）萃取法（提取重量法）,將待測(cè)組分從一種溶劑萃取到另一易揮發(fā)的溶劑中，揮去溶劑，稱(chēng)量干燥物的重量進(jìn)行計(jì)算,如： 苯巴比妥中“中性和堿性物質(zhì)”的檢查,（3）沉淀法,將待測(cè)組分以沉淀形式從溶液中分離，并轉(zhuǎn)化成稱(chēng)量形式，稱(chēng)定其重量進(jìn)行計(jì)算。,,,①基本原理,操作步驟：,取樣,濾渣,沉淀,,過(guò)濾,洗滌,稱(chēng)重,沉淀形式,稱(chēng)量形式,沉淀形式： 沉淀時(shí)物質(zhì)的化學(xué)組成形式,稱(chēng)量

16、形式： 稱(chēng)量時(shí)物質(zhì)的化學(xué)組成形式,如 Fe(OH)3·nH2O,如 Fe2O3,對(duì)沉淀形式的要求： 溶解度小，純凈，易過(guò)濾洗滌，易轉(zhuǎn)化為稱(chēng)量形式。,對(duì)稱(chēng)量形式的要求： 組成固定，化學(xué)穩(wěn)定性高，分子量大。,2、沉淀?xiàng)l件的選擇,（1）晶形沉淀 稀、攪、熱、慢、陳,（2）無(wú)定形沉淀 濃、熱、電解質(zhì)、不陳化,3、計(jì)算,①. 被測(cè)組分與稱(chēng)

17、量形式的組成 相同時(shí),如 SiO2,②. 被測(cè)組分與稱(chēng)量形式的組成不同時(shí),如 Fe Fe2O3,×a×b,換算因數(shù) 被測(cè)組分的摩爾質(zhì)量（或原子量）與稱(chēng)量形式摩爾質(zhì)量的比值。,如 Fe(55.847) O(15.9994),×2,被測(cè)物 沉淀形式 稱(chēng)量形式 換算因數(shù) Fe Fe(OH)3·nH2O

18、 Fe2O3 2Fe / Fe2O3 FeO Fe(OH)3·nH2O Fe2O3 2FeO / Fe2O3 SO42- BaSO4 BaSO4 SO4 / BaSO4 MgO MgNH4PO4 Mg2P2O7 2MgO / Mg2P2O7 SiO2

19、 SiO2 SiO2 SiO2 / SiO2,,二、容量分析法（滴定分析法）,根據(jù)已知濃度的滴定液與待測(cè)組分作用時(shí)所消耗的體積來(lái)計(jì)算待測(cè)物的含量的定量分析方法。,等當(dāng)點(diǎn)（化學(xué)計(jì)量點(diǎn)） 消耗的滴定液的摩爾數(shù)＝被測(cè)物摩爾數(shù),滴定終點(diǎn)指示劑的變色點(diǎn)（允許與化學(xué)計(jì)量點(diǎn)的誤差≤0.1％）,滴定方式,直接滴定法 剩余滴定法 置換滴定法,,滴定度

20、： 是指每毫升滴定液相當(dāng)于被測(cè)物質(zhì)的質(zhì)量（毫克）,T→滴定度(mg/ml) c→滴定液濃度(mol/L)M→被測(cè)物質(zhì)分子量n→為反應(yīng)式配平后滴 定液與被測(cè)物的摩 爾比或電子轉(zhuǎn)移數(shù),1、酸堿滴定法,基本原理： 利用酸和堿在水溶液中以質(zhì)子轉(zhuǎn)移為基礎(chǔ)的滴定分析方法 。,酸 能給出質(zhì)子的物質(zhì),堿 能接受質(zhì)子的物質(zhì),酸給出質(zhì)子后剩余部分是該酸的共軛堿,,堿接受質(zhì)子后，即成為該堿的共軛酸,,,,越容易給

21、出質(zhì)子的物質(zhì)酸性越強(qiáng)強(qiáng)酸的共軛堿是弱堿,越容易接受質(zhì)子的物質(zhì)堿性越強(qiáng)強(qiáng)堿的共軛酸是弱酸,（1）強(qiáng)酸強(qiáng)堿的滴定,化學(xué)計(jì)量點(diǎn)時(shí)，溶液呈中性,突躍范圍 pH 4.30～9.70,酚酞 （8.3 ~ 10.0）無(wú)色→紅甲基紅（4.2 ~ 6.3） 紅→黃甲基橙（3.2 ~ 4.4） 紅→黃,（2）強(qiáng)堿滴定弱酸,化學(xué)計(jì)量點(diǎn)時(shí)，溶液偏堿性,酚酞 （8.0 ~ 10.0）無(wú)色→紅百里酚酞（9.4 ~

22、10.6）無(wú)色→藍(lán),c · Ka＞10-8,（3）強(qiáng)酸滴定弱堿,化學(xué)計(jì)量點(diǎn)時(shí)，溶液偏酸性,甲基紅 （4.4 ~ 6.2）紅→黃溴甲酚綠（3.8 ~ 5.4）黃→藍(lán),c · Kb＞10-8,（4）多元酸的滴定,如 甲基橙和酚酞,可選擇混合指示劑,酸堿指示劑：,常用的酸堿指示劑是有機(jī)弱酸或弱堿，與其共軛堿或共軛酸呈現(xiàn)不同的顏色,指示劑變色范圍,酚酞 pKIn= 9.1,（8.0 ~ 10.0）,滴

23、定突躍 在化學(xué)計(jì)量點(diǎn)附近發(fā) 生突變的pH范圍,選擇原則 指示劑的變色范圍全 部或部分落在滴定突 躍范圍內(nèi),滴定液的標(biāo)定 ：,NaOH滴定液 基準(zhǔn)物 鄰苯二甲酸氫鉀 指示劑 酚酞（無(wú)色→粉紅）,HCl滴定液 基準(zhǔn)物 無(wú)水Na2CO3 指示劑 甲基

24、紅-溴甲酚綠(綠→暗紫),H2SO4滴定液 基準(zhǔn)物 無(wú)水Na2CO3 指示劑 甲基紅-溴甲酚綠(綠→暗紫),2 、 氧化還原滴定法,以氧化還原反應(yīng)（通過(guò)電子轉(zhuǎn)移）為基礎(chǔ)的滴定分析法。,氧化還原反應(yīng) 電子得失,在一個(gè)氧化還原反應(yīng)中,得到電子的物質(zhì) → 氧化劑失去電子的物質(zhì) → 還原劑,氧化劑,還原劑,電位越高 氧化態(tài)的氧化能力越強(qiáng)電位越低 還原態(tài)的還原能力越強(qiáng),氧化劑

25、 可氧化電極電位比它低的物質(zhì)還原劑 可還原電極電位比它高的物質(zhì),常見(jiàn)氧化還原滴定方法,碘量法 溴酸鉀法鈰量法 亞硝酸鈉法高錳酸鉀法 高碘酸鉀法重鉻酸鉀法,氧化還原反應(yīng)中常用的滴定液,碘液 硫代硫酸鈉液溴液 溴酸鉀液草酸液

26、高錳酸鉀液 硫酸鈰液,（1）碘量法,以碘為氧化劑，或以碘化物為還原劑的滴定法。,直接碘量法間接碘量法,注 反應(yīng)摩爾比 以碘原子數(shù)計(jì),指示終點(diǎn) 自身指示終點(diǎn)（無(wú)→黃） 淀粉指示液（無(wú)→藍(lán)紫）,a、 直接碘量法,用碘滴定液直接滴定的方法,測(cè)定條件,A、pH條件 酸性、中性、弱堿性,B、避光、立即滴定,b、間接碘量法,①、剩余碘量法,②、置換碘量法,,A、需用碘

27、量瓶,,測(cè)定條件 :,B、需做空白滴定,C、pH條件 弱酸性、中性、弱堿性,水解,加大 I- 濃度,A、增加 I2溶解度，并減少 I2 揮發(fā),B、降低 I2/I -氧化電位，反應(yīng)完全,配制碘滴定液時(shí) 加大量碘化鉀,滴定液的標(biāo)定：,碘滴定液 基準(zhǔn)物 三氧化二砷 指示劑 淀粉指示液（無(wú)→藍(lán)紫）,硫代硫酸鈉滴定液 基準(zhǔn)物 重鉻酸鉀 指示劑 淀粉指示液(藍(lán)紫→亮綠),（2）溴量

28、法（剩余溴量法）,原理：,,指示劑 淀粉指示液（藍(lán)紫→無(wú)）,測(cè)定條件：,B、反應(yīng)摩爾比 以溴原子數(shù)計(jì),C、需空白滴定,A、溴酸鉀與溴化鉀在鹽酸條件 下反應(yīng)產(chǎn)生新生態(tài)溴,溴滴定液的標(biāo)定：,加入碘化鉀，被剩余的溴氧化生成碘，再用硫代硫酸鈉液滴定指示劑 淀粉指示液（藍(lán)紫→無(wú)),（3）鈰量法,指示劑 鄰二氮菲亞鐵 還原型 → 氧化型 （紅色）

29、 （淺藍(lán)色）,原理：,優(yōu)點(diǎn)：,A、硫酸鈰滴定液穩(wěn)定,B、pH條件 HCl（防止Ce4+水解）,C、干擾因素少 適用于糖漿劑、片劑 如 硫酸亞鐵 高錳酸鉀法 硫酸亞鐵片 鈰量法,硫酸鈰滴定液的標(biāo)定:,基準(zhǔn)物 三氧化二砷指示劑 鄰二氮菲亞鐵 （紅→淡綠）,(4) 亞硝酸鈉滴定法,原理:,利用亞硝酸鈉在

30、鹽酸存在下可與具有芳伯氨基的化合物發(fā)生重氮化反應(yīng)，定量生成重氮鹽，根據(jù)滴定時(shí)消耗亞硝酸鈉的量可計(jì)算藥物的含量,具游離芳伯氨基的藥物可用本法直接測(cè)定。具潛在芳伯氨基的藥物，如具芳酰胺基藥物（對(duì)乙酰氨基酚等）經(jīng)水解，芳香族硝基化合物（如無(wú)味氯霉素）經(jīng)還原，也可用本法測(cè)定。,測(cè)定條件:,a、pH條件 過(guò)量HCl,穩(wěn)定重氮鹽，防止偶氮氨基化合物生成,1:2.5～6,b 反應(yīng)溫度,t ↑→ v↑,10 ~ 30℃,t ↑ 重氮鹽易分

31、解,t ↑ HNO2易分解逸失,c 催化劑 KBr,比 [ NO+ · Cl- ] 多300倍,快速滴定法： 滴定管尖插入液面下2／3處，在攪拌下一次性放下大部分滴定液，近終點(diǎn)前才提出滴定管，沖洗管尖，再緩緩滴定至終點(diǎn)。,d 滴定方式,ν↑ 來(lái)不及反應(yīng),ν↓ 亞硝酸分解逸失,e 指示終點(diǎn)的方法,A、永停滴定法 ChP（2010）,B、電位法,C、內(nèi)指示劑法 中性紅,D、外指

32、示劑法 KI－淀粉糊劑或試紙,亞硝酸鈉滴定液的標(biāo)定:,基準(zhǔn)物 對(duì)氨基苯磺酸指示終點(diǎn)方法 永停法,4、非水滴定法,在水以外的溶劑中進(jìn)行的滴定反應(yīng)。,分類(lèi) 非水堿量法 非水酸量法,對(duì)象 酸或堿性較弱的藥物 難溶于水的藥物,(一)溶劑 非水溶劑,溶劑的分類(lèi):,（a）酸性溶劑 冰醋酸 給出

33、質(zhì)子能力強(qiáng),（1）質(zhì)子性溶劑,（c）兩性溶劑 甲醇、乙醇 既能給出質(zhì)子，又能接受質(zhì)子,（b）堿性溶劑 乙二胺 接受質(zhì)子能力強(qiáng),（2） 無(wú)質(zhì)子溶劑 非質(zhì)子性溶劑 無(wú)轉(zhuǎn)移性質(zhì)子,（b）惰性溶劑 苯、氯仿 與質(zhì)子性溶劑混合使用 增大溶解度、滴定突躍,（a）偶極親質(zhì)子溶劑 二甲基甲酰胺 與被測(cè)組分形成氫鍵,

34、溶劑的性質(zhì),①、溶劑的離解性,僅惰性溶劑不能離解,溶劑的自身離解常數(shù)越大，突躍范圍越大，終點(diǎn)越敏銳,弱酸性藥物 溶于堿性溶劑時(shí)可增 加其相對(duì)酸性,弱堿性藥物 溶于酸性溶劑時(shí)可增 加其相對(duì)堿性,②、溶劑的酸堿性,③、溶劑的介電常數(shù),化合物在介電常數(shù)大的溶劑中易離解,化合物在介電常數(shù)

35、小的溶劑中難離解，多形成離子對(duì),均化效應(yīng)與區(qū)分效應(yīng):,均化效應(yīng)： 將不同強(qiáng)度酸或堿拉 平到同一強(qiáng)度的效應(yīng)。,均化性溶劑 具有均化效應(yīng)的溶劑,均化性溶劑,均化效應(yīng),共軛堿,（液氨）,堿性溶劑 是酸的均化性溶劑,酸性溶劑 是堿的均化性溶劑,區(qū)分效應(yīng) 能區(qū)分出酸或堿的不同強(qiáng) 度的效應(yīng),區(qū)分溶劑 具有區(qū)分效應(yīng)的溶劑,HClO4 ＞ HCl ＞ H2SO4 ＞ HNO3

36、,,酸性溶劑 是堿的均化性溶劑,堿性溶劑 是酸的均化性溶劑,酸性溶劑 對(duì)酸有區(qū)分效應(yīng),堿性溶劑 對(duì)堿有區(qū)分效應(yīng),(二)、堿的滴定 （非水堿量法）,（1）溶劑 酸性溶劑 （冰醋酸、醋酐）（2）滴定液 高氯酸（冰醋酸） 基準(zhǔn)物 鄰苯二甲酸氫鉀（3）指示劑 結(jié)晶紫

37、、電位法（4）測(cè)定對(duì)象 弱堿性藥物,有機(jī)弱堿 胺類(lèi)、生物堿類(lèi)有機(jī)酸的堿金屬鹽 枸櫞酸鉀有機(jī)堿的氫鹵酸鹽（加醋酸汞）鹽酸麻黃堿 有機(jī)堿的硫酸鹽 （硫酸在冰醋酸為一元酸） 硫酸奎寧有機(jī)堿的硝酸鹽 （電位法指示終點(diǎn)）有機(jī)堿的有機(jī)酸鹽 重酒石酸去甲腎上腺素,(三)酸的滴定 （非水酸量法）,（1）溶劑 乙二胺

38、 二甲基甲酰胺（2）滴定液 甲醇鈉（甲醇-苯） 基準(zhǔn)物 苯甲酸（3）指示劑 溴酚藍(lán)、百里酚藍(lán)（4）測(cè)定對(duì)象 有機(jī)弱酸性藥物,DMF,有機(jī)弱酸類(lèi)藥物,芳酸類(lèi) 苯甲酸酚類(lèi) 苯酚磺酰胺類(lèi) 磺胺嘧啶巴比妥類(lèi) 苯巴比妥,（四）滴定液的標(biāo)定,高氯酸滴定液 基準(zhǔn)物 鄰苯二甲酸

39、氫鉀 指示劑 結(jié)晶紫（紫→藍(lán)）,甲醇鈉滴定液的標(biāo)定 基準(zhǔn)物 苯甲酸 指示劑 麝香草酚藍(lán)（ 黃→藍(lán)）,5、 沉淀滴定法,以沉淀反應(yīng)為基礎(chǔ)的滴定分析法,應(yīng)用較廣的是銀量法,銀量法,鉻酸鉀法（Mohr法）鐵銨礬指示劑法（Volhard法）吸附指示劑法（Fajans法）,,（1）鉻酸鉀法（Mohr法）,原理（AgNO3滴定液）,終點(diǎn)時(shí):,終點(diǎn)前:,鉻酸鉀指示劑,測(cè)定條件,①、指示劑用量:

40、 25 ~ 50ml 溶液中 + 1ml 5%鉻酸鉀,②、溶液的酸度: pH6.5~10.5,③、滴定時(shí)要?jiǎng)×艺駬u 防止 AgCl 膠體吸附 Cl-,④、不宜測(cè)定 I- 和 SCN- (AgI↓)I- (AgSCN↓)SCN-,（2）鐵銨礬指示劑法（Volhard法）,原理（NH4SCN滴定液）,終點(diǎn)前,測(cè)定條件：,①、測(cè) Cl- 時(shí)要防止沉淀轉(zhuǎn)化,,防止沉淀轉(zhuǎn)化的措施,A

41、、將沉淀過(guò)濾除去后再回滴B、用有機(jī)溶劑包裹沉淀 鄰苯二甲酸二丁酯、硝基苯C、高濃度的硫酸鐵銨 指示劑 0.2mol/L 的 Fe3+,②、在強(qiáng)酸性介質(zhì)中滴定,③、測(cè) I- 時(shí)，指示劑須后加,④、除去干擾性物質(zhì) 能與SCN-作用的強(qiáng)氧化劑等,（3）吸附指示劑法（Fajans法）,原理（AgNO3滴定液）,測(cè)定條件:,①、要保護(hù)AgCl膠體 淀粉或糊精,I - ＞ 二甲基二碘

42、熒光黃 ＞ Br - ＞ 曙紅 ＞ Cl- ＞ 熒光黃,②、膠體顆粒對(duì)指示劑陰離子的吸 附應(yīng)小于對(duì)被測(cè)離子的吸附,③、選擇合適的pH 要保證指示劑電離，故常選在 指示劑的電離常數(shù)附近 熒光黃 pH7 ~ 10 曙紅 pH2 ~ 10,④、避免光照 AgX易感光變色,AgNO3滴定液

43、 基準(zhǔn)物 NaCl 指示劑 熒光黃（黃綠→微紅）,NH4SCN滴定液 基準(zhǔn)液 AgNO3滴定液 指示劑 硫酸鐵銨(無(wú)色→淡棕紅),（4）滴定液的標(biāo)定,6、配位（絡(luò)合）滴定法,基本原理： 以配位反應(yīng)為基礎(chǔ)的滴定分析法 配位劑中應(yīng)用最廣的是乙二胺四乙酸（EDTA） 配位滴定主要是指EDTA滴定，它可滴定數(shù)十種含金屬離子的藥物,（1）滴定劑

44、 EDTA,四元酸（H4Y）,,,,,兩個(gè)羧基上的H+轉(zhuǎn)移到兩個(gè)堿性氮原子上，形成雙偶極離子，故實(shí)際上它只是一種較強(qiáng)的二元酸（H2Y2-）,由于EDTA難溶于水，通常制成二鈉鹽（NaH2Y·2H2O），簡(jiǎn)稱(chēng)EDTA或EDTA二鈉鹽,EDTA與金屬離子絡(luò)合的特點(diǎn),①、EDTA能與大多數(shù)金屬離子 形成穩(wěn)定的絡(luò)合物②、反應(yīng)摩爾比1 ：1③、絡(luò)合物大多數(shù)易溶于水④、絡(luò)合物大多數(shù)無(wú)色,滴定條件的選擇

45、 ①、化學(xué)計(jì)量點(diǎn)的pM ②、滴定條件的判斷 ③、最高酸度控制 緩沖液,（2）金屬指示劑,終點(diǎn)前,原理（以絡(luò)黑T為例）,對(duì)指示劑的要求：,① 、MIn 與 In 的顏色應(yīng)不同② 、MIn 的穩(wěn)定性應(yīng)＜EDTA－M③、MIn 應(yīng)易溶于水④、In 應(yīng)穩(wěn)定,（3）滴定液的標(biāo)定,鋅滴定液 EDTA滴定液 指示劑 絡(luò)黑T（紫→純藍(lán)）,

46、乙二胺四醋酸二鈉滴定液 基準(zhǔn)物 ZnO 指示劑 絡(luò)黑T（紫→純藍(lán)）,例：下列測(cè)定中選擇的指示劑為 A. 硫酸鐵銨 B. 結(jié)晶紫 C. 淀粉 D. 二甲酚橙 E. 酚酞86. 以K2Cr2O7為基準(zhǔn)物標(biāo)定Na2S2O3滴定液87. 用EDTA滴定液測(cè)定氫氧化鋁88. 用HClO4滴定液測(cè)定鹽酸麻黃堿89. 用NaOH滴定液測(cè)定十一

47、烯酸90. 用AgNO3滴定液測(cè)定三氯叔丁醇,C,D,B,E,A,例：錯(cuò)誤的操作有 A.將AgNO3滴定液裝在堿式滴定管中 B.將K2Cr2O7滴定液裝在堿式滴定管 C.以K2Cr2O7標(biāo)定Na2S2O3溶液時(shí)用碘量瓶 D.上述滴定（C）中，淀粉指示劑宜在近 終點(diǎn)時(shí)加入 E.用EDTA滴定液直接滴定Al3+時(shí)，滴定速 度應(yīng)快,,,,例：配位滴定法中，EDTA和金屬離子

48、 配位的特點(diǎn)為 A、形成的配位物穩(wěn)定 B、形成的配位物溶于水 C、形成的配位物多無(wú)色 D、EDTA和金屬離子比為1:1 E、形成的配位物應(yīng)具顏色,,,,,三、儀器分析法,（一）光譜分析法 1、紫外-可見(jiàn)分光光度法 2、熒光分析法（二）色譜分析法 1、高效液相色譜法 2、氣相色譜法,第三節(jié) 分析方法的驗(yàn)證,1、藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)分

49、析方法驗(yàn)證的目的與范圍： 目的：證明采用的方法適合于相應(yīng)的檢測(cè)要求； 適用范圍：藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制定；藥物生產(chǎn)方法變更，制劑的組分（主要指輔料）變更，原分析方法進(jìn)行修訂時(shí)。2、具體內(nèi)容： （1）準(zhǔn)確度（accuracy）： 指測(cè)得結(jié)果與真實(shí)值（或參考值）接近的程度，表示分析方法測(cè)量的正確性。通常用回收率試驗(yàn)來(lái)表示。,2、制劑的含量測(cè)定,1、原料藥的含量測(cè)定 可以用已知純度的對(duì)照品或供試品進(jìn)行測(cè)定，并按下

50、式計(jì)算回收率；或用本法測(cè)定的結(jié)果與已知準(zhǔn)確度的另一方法測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較。,數(shù)據(jù)要求： ①、做高中低3個(gè)濃度：100%±20% ②、n=9次（樣本數(shù)為9，每個(gè)濃度取3個(gè)樣） ③、當(dāng)只有一個(gè)濃度時(shí)，n=6（即取該濃度下的6個(gè)樣） 回收率越接近100%表明分析方法準(zhǔn)確度越高,（2）精密度（precision）： 指用該法測(cè)定同一均勻供試品的一組測(cè)量值彼此接近的程度，它們?cè)浇咏驮骄?。在藥物?/p>

51、析中用標(biāo)準(zhǔn)偏差（s）和相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）表示：,（3）重現(xiàn)性（ruggedness）： 利用相同的方法在各種正常實(shí)驗(yàn)條件下對(duì)同一樣品進(jìn)行分析所得結(jié)果的重現(xiàn)程度。 分析方法的重現(xiàn)性的測(cè)定是通過(guò)不同實(shí)驗(yàn)室由不同的實(shí)驗(yàn)者對(duì)同一樣品的分別測(cè)試而獲得的。重現(xiàn)性是指不同實(shí)驗(yàn)室中使用此分析方法的精密度。（4）專(zhuān)屬性（specificity）： 指一種分析方法僅對(duì)一種分析成分產(chǎn)生唯一信號(hào)。

52、 鑒別反應(yīng)、雜質(zhì)檢查和含量測(cè)定方法，均應(yīng)考察其專(zhuān)屬性。,（5）檢測(cè)限（limit of detection，LOD）： 指分析方法能夠從背景信號(hào)中區(qū)分出藥物時(shí)，所需樣品中藥物的最低濃度，無(wú)需定量測(cè)定。 ①、非儀器分析目視法：用已知濃度的被測(cè)物，試驗(yàn)出能夠被可靠地檢測(cè)出的最低濃度或量作為L(zhǎng)OD。 ②、信噪比法：當(dāng)用儀器分析方法時(shí)，可用已知濃度的樣品與空白試驗(yàn)對(duì)照，記錄測(cè)得的被測(cè)物藥物信號(hào)強(qiáng)度S與噪音（或背景信號(hào)）強(qiáng)度

53、N，以能達(dá)到S/N=2或S/N=3時(shí)的樣品濃度最低藥物濃度為L(zhǎng)OD。（6）定量限（（limit of quantitation，LOQ）： 指在保證具有一定可靠性的前提下，分析方法能夠測(cè)定出的 樣品中藥物的最低濃度。（即能準(zhǔn)確定量的最低濃度或量） 用非儀器分析方法時(shí)，與（5）相同的確定方法；用儀器分析時(shí)S/N=10/1。,（7）線性： 分析方法的線性是在給定范圍內(nèi)獲取與樣品中供試物濃度成正比的試驗(yàn)結(jié)果的能力。即；供試物

54、的濃度變化與試驗(yàn)結(jié)果成線性關(guān)系：A=ac+b（或y=ax+b）相關(guān)系數(shù)r越接近1，表示線性越好。（8）范圍（range）： 線性范圍：指利用一種方法取得精密度、準(zhǔn)確度均符合要求的試驗(yàn)結(jié)果，而且成線性的供試物濃度的變化范圍，其最大量與最小量之間的間隔，可用mg/l ～ mg/l；或μg/ml ～μg/ml表示。若有C1 ，C2 ，C3 ，C4 ，C5五個(gè)濃度，當(dāng)r越接近于1，則范圍為C1～ C5。（9）耐用性（robustness）