如何提高血培養(yǎng)陽(yáng)性率

1、檢驗(yàn)科 余素飛,血培養(yǎng)的規(guī)范化操作 ——降低污染，提高陽(yáng)性率,一、血培養(yǎng)送檢的臨床重要性二、血培養(yǎng)樣本的采集三、血培養(yǎng)樣本的運(yùn)送四、與臨床的溝通、常見(jiàn)問(wèn)題解答五、趣味題,一、血培養(yǎng)的臨床重要性,診斷重要性：血培養(yǎng)陽(yáng)性是評(píng)估或確認(rèn)患者患有感染的重要依據(jù)為抗生素敏感試驗(yàn)提供了病原學(xué)依據(jù)，從而使得抗生素治療達(dá)到優(yōu)化,預(yù)后重要性從預(yù)后角度看，分離到具有重要臨床意義病原菌的血培養(yǎng)意味著宿主的防御機(jī)制

2、，和（或）以往的臨床治療手段不能將原發(fā)部位感染的病原菌清除。,二、血培養(yǎng)樣本的采集,采集前總體要求血培養(yǎng)的采集程序,,血培養(yǎng)的送檢指征采集時(shí)機(jī)采集最佳方案,血液培養(yǎng)的送檢指征,癥狀指征： 發(fā)熱（≥38℃）、皮疹、肝脾腫大、關(guān)節(jié)疼痛、神志不清、昏迷或休克。,疾病指征： 血液疾病、惡性腫瘤、呼吸道感染、呼吸衰竭、導(dǎo)管介入疾病、血液透析患者、糖尿病、艾滋病、肝臟疾病、長(zhǎng)期輸液、化膿性病灶或損害、粘膜損傷性疾病。

3、,一般情況：患者出現(xiàn)寒戰(zhàn)，體溫升高之前。使用抗菌藥物之前，應(yīng)立即采集 血培養(yǎng)。 若病人已服藥，應(yīng)在第二次服藥 前采血。,采集時(shí)機(jī),采集時(shí)機(jī),不明原因發(fā)熱：　例如：隱性膿腫、傷寒熱和波浪熱先從不同體位采集2-3次血標(biāo)本間隔大于或等于1h，24-36h后估計(jì)體溫升高之前再采集2份以上若24h培養(yǎng)結(jié)果陰性，應(yīng)重新采集血標(biāo)本,采集時(shí)機(jī),沙門(mén)菌感染患者血培養(yǎng)采集： 根據(jù)不同的

4、病程、病原體存在部位不同，發(fā)病早期（第1-2周）采集血液標(biāo)本可獲得80%-90%的陽(yáng)性率，之后血培養(yǎng)陽(yáng)性率也將下降。,采集時(shí)機(jī),急性心內(nèi)膜炎或亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎血培養(yǎng)采集： 懷疑急性心內(nèi)膜炎時(shí)，應(yīng)在抗生素治療前 1-2h內(nèi)分別從3個(gè)不同部位，間隔≥15min ，采集3份標(biāo)本，分別進(jìn)行培養(yǎng)。,懷疑亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎時(shí)，應(yīng)在抗生素治療前1-2h內(nèi)分別在3個(gè)不同部位采集血標(biāo)本進(jìn)行培養(yǎng)，間隔≥15min ，若24h培養(yǎng)陰性，重新采集2-3

5、份或更多標(biāo)本送檢。,認(rèn)清各種類(lèi)型的血培養(yǎng)瓶,標(biāo)準(zhǔn)需氣瓶和厭氣瓶?jī)?yōu)良的品質(zhì)經(jīng)濟(jì) 可加入 10 ml 血液或體液標(biāo)本,FAN 需氧/厭氧中和抗生素瓶中和抗生素能力（活化碳粉）培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)成份更豐富最多可容納10ml血液/體液標(biāo)本,小兒需氧瓶可中和抗生素可加入 4 ml 血液標(biāo)本,血培養(yǎng)標(biāo)本在接種前注意事項(xiàng)？,所有培養(yǎng)瓶必須檢查有無(wú)變色或渾濁按一人一瓶一帶原則，嚴(yán)禁多個(gè)患者同時(shí)采樣，以防張冠李戴注意培養(yǎng)瓶的有效期，不能過(guò)期培

6、養(yǎng)用75%酒精消毒瓶蓋，不能用碘酒,采集最佳方案,“How many blood culture sets do I need to draw?”應(yīng)該采幾份血液標(biāo)本?,采血份數(shù) NUMBER OF SETS,Weinstein MP, Reller LB, Murphy JR, and Lichtenstein KA Rev Inf Dis 5:35, 1983,Cockerill, CID 2004,表皮葡萄球菌的臨床意義分析,

7、需要抽取多少份血培養(yǎng)樣本？,答案:每位患者采血最少2份，每份包含需氧跟厭氧（小兒除外）注意：一次穿刺采血，算“一份”。,標(biāo)本須間隔多久采集?,答案： 1. 每份標(biāo)本應(yīng)在5分鐘內(nèi)采集完成,因?yàn)轶w內(nèi)巨細(xì)胞吞噬系統(tǒng)會(huì)在15 – 30分鐘內(nèi)清除掉進(jìn)入人體內(nèi)的細(xì)菌.2. 懷疑亞急性心內(nèi)膜炎患者每間隔一個(gè)小時(shí)采集一份,共采集3份標(biāo)本.,我們應(yīng)該采集多少血液呢?,,采血量與檢出率的關(guān)系,Overall/Mayo,答案:1、采血量是影響靈敏

8、度最關(guān)鍵因素。2、一份標(biāo)本2個(gè)瓶子,最少要10ml,最好采20ml,分別注入2個(gè)瓶?jī)?nèi)。2份4個(gè)瓶子,最少20ml，最好40ml。3、嬰幼兒1-2ml，兒童3-5ml。,,如何區(qū)分污染？ 感染？,體表定植的正常微生物群與臨床檢出的主要致病菌,1.翁心華等.現(xiàn)代感染病學(xué).上海醫(yī)科大學(xué)出版社.1998年第一版：23-292.汪復(fù)等. 中國(guó)感染與化療雜志. 2010;10(5):325-334.,大多數(shù)臨床檢出

9、的主要致病菌同時(shí)也是人體體表定植的正常菌群，因此，臨床報(bào)告的細(xì)菌檢出可能包含了人體定植的細(xì)菌！,檢測(cè)非培養(yǎng)的感染性指標(biāo),WBC計(jì)數(shù)各種病原體的抗原或抗體檢測(cè)CRP定量?jī)?nèi)毒素定量降鈣素原（PCT）其他,,,,血培養(yǎng)的采集程序,,皮膚消毒培養(yǎng)瓶消毒靜脈穿刺和接種,,,培養(yǎng)瓶消毒,75%酒精擦拭血培養(yǎng)瓶橡皮塞， 作用60s;用無(wú)菌紗布或無(wú)菌棉 簽清除橡皮塞子表面殘余酒精； 注意不能用碘酒消毒。,皮膚消毒,75%

10、酒精擦拭靜脈穿刺部位待30s以上;1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用90s以上，從穿刺點(diǎn)向外畫(huà)圈消毒,區(qū)域直徑3cm以上。75%酒精脫碘。對(duì)碘過(guò)敏的患者,用75%酒精消毒60s，待酒精揮發(fā)后采血,對(duì)酒精過(guò)敏者可用1%新潔爾滅消毒。,靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種,在穿刺前或穿刺 期間為防止靜脈 滑動(dòng)，可戴乳膠 手套固定靜脈；用注射器無(wú)菌穿刺取血后， 直接注入血培養(yǎng)瓶 （勿換針頭、先注入?yún)捬跹亢?

11、注入需氧血瓶）;血培養(yǎng)標(biāo)本接種到血培養(yǎng)瓶后輕輕 顛倒混勻以防血液凝固，立即送檢。,三、血培養(yǎng)樣本的運(yùn)送,注入標(biāo)本后的血培養(yǎng)瓶應(yīng)立即送檢。常規(guī)運(yùn)送時(shí)間<2小時(shí)。若天氣寒冷應(yīng)注意保暖。,血液標(biāo)本采集后不能立即送檢怎么辦？,血液標(biāo)本采集后的血培養(yǎng)瓶如果不能及時(shí)送檢，需室溫保存或置35-37℃孵箱中，切勿冷藏！因?yàn)橛行┛琉B(yǎng)菌如肺炎雙球菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等遇冷很容易死亡。,,四、加強(qiáng)與臨床的溝通,1、臨床抗感染治療與實(shí)驗(yàn)

12、室結(jié)果不符可能原因,檢測(cè)到的微生物為非病原菌細(xì)菌存在有隱性的耐藥機(jī)制非常規(guī)培養(yǎng)能檢測(cè)的感染性病原體,臨床的抱怨（常見(jiàn)）的解答,,,臨床問(wèn)題（常見(jiàn)）的解答,2、如何解答臨床醫(yī)師提出的問(wèn)題？ 能否給我加做一些抗菌物的藥敏 檢測(cè)？ 能否分析一下分離到的細(xì)菌是污 染菌還是致病菌？,1、能否給我加做一些抗菌藥物的藥敏檢測(cè)？,如何回答？視所要加的抗菌藥物來(lái)定加的理由，不加的理由說(shuō)明A、是否有CLSI的解釋標(biāo)

13、準(zhǔn)B、是否已有了指導(dǎo)性菌物在報(bào)告中C、是否有標(biāo)準(zhǔn)的藥物紙片………..,2、能否分析一下分離到的細(xì)菌是污染菌還是致病菌？,分析分離菌株的來(lái)源分析病人的狀況：檢測(cè)非培養(yǎng)的感染性指標(biāo) 記住任何所謂的正常寄駐菌都有可能成為 病原菌！！,如何突現(xiàn)血培養(yǎng)的臨床價(jià)值？,三級(jí)報(bào)告一級(jí)報(bào)告： 陽(yáng)性結(jié)果，立即口頭報(bào)告，主要包括革蘭 染色特性和形態(tài).二級(jí)報(bào)告： 報(bào)告直接抗菌藥物敏感試驗(yàn)結(jié)果和細(xì)菌種

14、屬的初步鑒定結(jié)果.三級(jí)報(bào)告——最終結(jié)果（書(shū)面）報(bào)告 陽(yáng)性培養(yǎng)結(jié)果（最終鑒定結(jié)果、最終藥敏結(jié)果） 培養(yǎng)5日?qǐng)?bào)告無(wú)菌生長(zhǎng),,培養(yǎng)結(jié)果（48h陽(yáng)性） ：表皮葡萄球菌,患者：男，15歲 臨床診斷：肺炎 （T38.5℃） 標(biāo)本：左側(cè)靜脈血液（單瓶）,,趣味問(wèn)題2,1.此檢測(cè)結(jié)果可信嗎？2.如果可信選用什么藥物？如果不可信請(qǐng)說(shuō)明理由！,Thank You !,檢驗(yàn)前樣本的正確操作,