顆粒病毒gv簡(jiǎn)介

1、顆粒體病毒(GV),馮建 馬俊鋒,顆粒體病毒(GV),顆粒體病毒（granulosis virus，簡(jiǎn)稱GV）在分類上屬桿狀病毒科B亞組，是有包涵體的昆蟲病毒。目前為止國(guó)內(nèi)外發(fā)現(xiàn)GV約130株，中國(guó)發(fā)現(xiàn)約42株，其中26株為首次發(fā)現(xiàn)。,GV的一般形態(tài)特征,包涵體稱顆粒體(granule) 或莢膜(capsule)。先在被感染細(xì)胞的核內(nèi)形成，但當(dāng)核膜破裂后可溢出到細(xì)胞質(zhì)內(nèi)。包涵體很小。在電子顯微鏡下觀察，顆粒體的形狀有卵形、橢圓形

2、、長(zhǎng)卵形等，通常直徑為0.1～0.3μm，長(zhǎng)0.3～1.0μm。每個(gè)包涵體內(nèi)一般只有一個(gè)病毒粒子。有時(shí)也出現(xiàn)不正常的形狀。,左圖：霜天蛾GV的形態(tài),右圖：小菜蛾GV經(jīng)堿處理后的病毒粒子,GV的理化性狀,不溶于水和一般的有機(jī)溶劑如乙醚、乙醇、丙酮、二甲苯等。遇強(qiáng)酸或強(qiáng)堿，包涵體能迅速溶解，并可使病毒粒子變性而失去侵染力。,GV的理化性狀,可在室溫下保存5年以上而不失侵染力。高溫可使其失活。冰凍無多大危害。較低的溫度有可能延長(zhǎng)貯存的

3、時(shí)期。紫外線或其他輻射線能使完整的病毒失活。用稀堿處理后可獲得完整和具侵染性的病毒粒子。,GV對(duì)昆蟲的侵染,感病特征： 感染初期無明顯病征 之后出現(xiàn)反應(yīng)遲鈍和停止取食 隨后蟲體顏色發(fā)生改變，血液漸變?nèi)榘?感病蟲體可能膨大或收縮 已死幼蟲體壁脆弱，破后流出大量顆粒體。 染病幼蟲可存活較長(zhǎng)時(shí)間。 病死蟲體有時(shí)用腹足倒掛枝葉上，呈“Λ”形。,GV的感病特征,染病幼蟲常于幼蟲期即死，有時(shí)也可活至蛹期

4、或成蟲期。從染病到死亡所經(jīng)時(shí)間因蟲而異。一般4～5天，可長(zhǎng)至34天，如粘蟲。幼蟲齡期、侵染劑量、溫度等因素也能影響這段時(shí)期的長(zhǎng)短。,GV的感染途徑,通過口服進(jìn)入易感蟲體，顆粒體在中腸中溶解，游離的病毒粒子通過腸道柱形細(xì)胞的微絨毛而侵入，在這些細(xì)胞核中增殖，新形成的顆粒體病毒釋放于血淋巴中而導(dǎo)致對(duì)其他組織的繼發(fā)感染。蟲體外傷和寄生天敵產(chǎn)卵可引起GV對(duì)皮下感染，也可經(jīng)卵垂直傳播。,GV的?；?顆粒體病毒的?；暂^強(qiáng)，交叉感染的情況甚為少

5、見，一般認(rèn)為顆粒體病毒是包涵體病毒含DNA的各類中專化性最強(qiáng)的一類。以往尚無顆粒體病毒能在植物或其他動(dòng)物細(xì)胞中增殖的報(bào)道。近年我國(guó)用小菜蛾細(xì)胞系BCIRL-Px2-HNU3復(fù)制小菜粉蝶GV和用家蠶細(xì)胞系Bm-21E-HNU5復(fù)制小菜蛾GV成功。,GV的交叉感染現(xiàn)象,鱗翅目幼蟲可合并感染NPV和GV兩種病毒。如黃地老虎、菜粉蝶、粘蟲等可同時(shí)感染顆粒體病毒和NPV。粘蟲的六齡幼蟲如單感染NPV，死亡率3.4％，單感染顆粒體病毒，死亡率20

6、%，如二種合并感染，則死亡率為80％，死體為NPV病征，體內(nèi)主要是核型多角體，也有些同時(shí)存在顆粒體。,昆蟲病毒的生產(chǎn),病毒為專性寄生病原，至今尚未研究出能在人工培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，只能在活細(xì)胞中增殖。因此，目前國(guó)內(nèi)外應(yīng)用于害蟲防治的昆蟲病毒制劑主要是通過活蟲體增殖和細(xì)胞培養(yǎng)法繁殖。,在昆蟲活體中大量增殖昆蟲病毒,3種途徑：直接在自然種群中繁殖 從野外采回大量活蟲接種繁殖 在室內(nèi)條件下飼育大量害蟲接種繁殖 可采用自然飼

7、料或人工飼料。,在細(xì)胞系中大量增殖昆蟲病毒,用組織培養(yǎng)增殖的病毒在致病性、?；约捌渌匦苑矫嬗袩o變異，尚待進(jìn)一步研究。同時(shí)，因組織培養(yǎng)法要求條件較嚴(yán)格，大量增殖病毒還存在不少問題，目前尚未達(dá)到實(shí)用階段。,顆粒體病毒殺蟲劑,我國(guó)在基礎(chǔ)和應(yīng)用方面研究較詳細(xì)的顆粒體病毒有菜粉蝶GV，小菜蛾GV，黃地老虎GV，茶小卷葉蛾GV等，其中菜粉蝶GV列入國(guó)家“七五”攻關(guān)項(xiàng)目進(jìn)行研究，并完成了中試生產(chǎn)。,顆粒病毒殺蟲劑的生產(chǎn)實(shí)例菜粉蝶GV殺蟲劑的生產(chǎn)

8、,菜粉蝶為世界性重要害蟲。其幼蟲又名菜青蟲，是我國(guó)分布最普遍，為害最嚴(yán)重，經(jīng)常成災(zāi)的害蟲，幼蟲偏嗜十字花科蔬菜，幼蟲將葉片咬成孔洞和缺刻，嚴(yán)重發(fā)生時(shí)可將葉片全部吃光。,菜粉蝶GV的生產(chǎn)工藝,1 人工飼料飼養(yǎng)菜青蟲 將菜粉蝶卵于人工模擬產(chǎn)卵卡上孵化后，人工飼料飼養(yǎng)至3齡，大部分用來增殖病毒，小部分繼續(xù)飼養(yǎng)傳代，每代21－28天。2 感染回收 將飼養(yǎng)的3齡菜青蟲防于特制的塑料籃子中饑餓3－4小時(shí)，將病毒用電動(dòng)噴霧器均勻噴在

9、菜葉上，喂食菜青蟲。一般經(jīng)過6－7天后，菜青蟲開始感病死亡，及時(shí)收集病蟲。,菜粉蝶GV的生產(chǎn)工藝,3 顆粒體的提取 經(jīng)感染的病蟲用0.7％NaCl浸泡，投入電動(dòng)勻漿機(jī)。將蟲漿加入5－10倍的鹽水，電動(dòng)攪拌機(jī)攪拌，用30－80目尼龍過濾3次。濾液2000r/min離心30min，收集沉淀。5 拌和、分裝 將標(biāo)定含量的病毒原粉中加入展著劑，粘著劑，保護(hù)劑等拌和均勻，定量分裝。6 產(chǎn)品質(zhì)量檢驗(yàn),GV在害蟲防治上的應(yīng)用,

10、加拿大研究菜青蟲的黃絨繭蜂能在寄主種群中傳播GV。,利用病毒防治害蟲一方面可以起到微生物殺蟲劑的短期防治作用，另一方面使用后有可能使病毒長(zhǎng)期存在于農(nóng)林生態(tài)系中，作為一類被引入的生態(tài)因子而起調(diào)節(jié)害蟲種群密度的作用。 常規(guī)方法施用或釋放帶毒昆蟲散布一定限量的病毒后，病原可在昆蟲種群間自行傳播。毒餌劑和散布帶毒蟲體具有較高的經(jīng)卵巢傳播的潛力，其他昆蟲或寄生物和捕食者有機(jī)械傳播病毒的潛能。,局限性,昆蟲病毒對(duì)害蟲的防治