特定蛋白分析平臺檢測項目的臨床應用培訓

1、HP083特定蛋白分析平臺檢測項目的臨床應用,禾柏生物技術(shù)股份有限公司,1,2018-12-16,檢測項目的臨床意義,1、超敏C-反應蛋白（Hs-CRP）2、糖化血紅蛋白（HbA1c）3、D-二聚體（D-Dimer）4、尿微量白蛋白（MALB）5、抗鏈球菌溶血素O（ASO）6、類風濕因子（RF）7、降鈣素原（PCT）,2,2018-12-16,CRP定義：C -Reactive Protein，簡稱CRP，是一類正急性時相

2、反應蛋白，隨著損傷、炎癥或各類疾病的發(fā)生迅速增加。1930年由Tillet和Francis發(fā)現(xiàn)這種能在Ca2+存在時與肺炎鏈球菌的莢膜C多糖結(jié)合的物質(zhì)，稱為C反應素。1941年Avery等測知它是一種蛋白質(zhì)，故稱為C反應蛋白(CRP)。,C反應蛋白,CRP的形成：在肝細胞內(nèi)持續(xù)合成, 分泌至各種體液中由細胞因子(IL-1, IL-6, TNF-?)刺激肝細胞和上皮細胞合成，由活化的吞噬細胞（巨噬細胞）釋放,1、CRP簡介,3,20

3、18-12-16,CRP的生物學特點：敏感：病理狀態(tài)可升高1-1000倍反應快速：在急性時相4-6小時濃度增高，24-48小時后達高峰;生物半衰期5-7小時,隨著恢復下降也快CRP濃度在細菌感染時增高，而病毒感染沒有標志性升高受影響因素少：不受生理活動、化療、放療和激素治療的影響濃度變化與病程同步：CRP 上升速度、幅度及持續(xù)時間與病情及組織損傷的嚴重程度密切相關(guān),CRP的理化特點：由五個相同的非共價結(jié)合的單體組成，呈環(huán)狀五

4、聚體，其亞基由206個氨基酸殘基組成。,4,2018-12-16,C反應蛋白和超敏C反應蛋白,C反應蛋白：采用臨床常規(guī)方法測定CRP時，檢測的線性范圍一般為8～200 mg/L，因檢測方法缺乏足夠的敏感性，無法測出血液中含量更低的CRP。超敏C反應蛋白：與普通CRP屬同一種蛋白，只是由于其測定方法更敏感而得名。近年來相繼采用膠乳增強的免疫散射比濁法、免疫投射比濁法、免疫發(fā)光法等技術(shù)使檢測的靈敏度得到了很大提高，檢測低限延伸為0.005

5、～0.10 mg/L，使得低濃度CRP（如0.15～10 mg/L）的測定更加準確。hs-CRP和CRP實際上測定的都是C反應蛋白，只是測定方法、靈敏度、精密度以及可測定的線性范圍不同。,5,2018-12-16,應用上的異同,近年來關(guān)于CRP、hs-CRP的研究越來越多，應用越來越廣泛。在感染、心腦血管性疾病、糖尿病、代謝綜合征、外周血管病、慢性阻塞性肺病、哮喘、腫瘤等多種疾病中用于指導臨床診療。目前已經(jīng)知道，CRP和hs-CRP

6、的臨床意義并不完全相同： CRP在感染性疾病和結(jié)締組織病中有較高的應用價值 hs-CRP近年來在心腦血管疾病、糖尿病中越來越受到關(guān)注,6,2018-12-16,參考值水平,不同人群C反應蛋白水平不一 健康成年人：≦10 mg/L 新生兒感染判定：≦2.0mg/L （新生兒免疫系統(tǒng)不完善，肝臟功能不強盛） 疑似或有心血管病史患者的風險控制：≦3.0mg/L（沒有其他因素的影響下）,7,2018-12-16,檢

7、測C反應蛋白的作用,一、判斷病情 評估病情的程度，動態(tài)監(jiān)控病情變化和治療療效 C反應蛋白的急相性能及時的體現(xiàn)病情的程度、變化，以及治療的效果。,8,2018-12-16,動態(tài)監(jiān)控病程 廣泛燒傷時 CRP顯著升高，如無感染，三天后即下降且在超過一個月的愈合期內(nèi)持續(xù)

8、 下降。如期間有感染發(fā)生，CRP又會升高，所以CRP可用來監(jiān)測整個病程。,燒傷病人血清CRP值變化圖,9,2018-12-16,治療時發(fā)生并發(fā)癥，此時動態(tài)檢測CRP是非常有效的方法,10,2018-12-16,二、鑒別感染源,區(qū)分細菌感染和病毒感染，指導抗生素使用，防止抗生素濫用。 細菌感染時，血清CRP的水平可以中等度至明顯升高，陽性

9、率可達90%以上。而病毒等感染時CRP水平多正常或輕度升高，因此可以幫助細菌感染與非細菌感染的鑒別診斷。,11,2018-12-16,此外，定量測定腦脊液、胸腔積液中的CRP水平亦可以對腦膜炎、胸膜炎的鑒別診斷有一定意義。不僅如此，CRP水平還與感染范圍和感染嚴重程度有一定關(guān)系。各種細菌感染均可引起CRP水平的升高，10～99 mg/L提示局灶性或淺表性感染，≥100 mg/L提示敗血癥或侵襲性感染等嚴重情況。使臨床能根據(jù)病情選擇治

10、療方案。,12,2018-12-16,鑒別細菌性或病毒性感染，指導是否使用抗生素,,13,2018-12-16,指導抗生素使用的檢測指標病原體檢測、培養(yǎng)、藥敏試驗WBC檢測ESR檢測CRP檢測,CRP與其他檢測指標的比較,病原體檢測、培養(yǎng)、藥敏試驗缺點：1、需要專業(yè)的設(shè)備、條件和人員 2、結(jié)果往往48小時以后出來 3、檢出率不是很高,14,2018-12-16,WBC檢測缺點：

11、1、敏感性差：升高較慢、幅度小，治療有效后變化緩慢 2、影響因素眾多：疾病初期，機體應激反應、劇烈運動、跑步、 緊張、恐懼、妊娠、腎上腺皮質(zhì)激素使用,CRP在區(qū)分細菌和病毒感染方面能提供比WBC更精確的信息,15,2018-12-16,ESR檢測缺點：1、感染時變化緩慢，2-3天可見升高，至少2-3周恢復正常 2、易受溫度、貧血、血沉管位置、異常免疫球

12、蛋白或復合物、藥物等 影響,骨髓炎病人抗生素治療后30天內(nèi)CRP、ESR變化,16,2018-12-16,CRP與常用感染指標WBC、ESR的比較,17,2018-12-16,三、超敏CRP提高心血管病風險性預測的準確度,現(xiàn)有研究證實，未被細菌感染的健康人，體內(nèi)CRP的低濃度值與動脈血栓危險性相關(guān)。超敏CRP被認為是心血管疾病危險評估的“金標準”。,18,2018-12-16,現(xiàn)認為：正常人的CR

13、P應≤1mg/L；若多次測試CRP≥2-3mg/L，這是炎癥持續(xù)存在的信號，提示存在動脈粥樣硬化危險。基本濃度>2.1mg/L,相當于(1)初發(fā)心梗危險度增加2.9倍；(2)發(fā)生缺血性中風危險度增加1.9倍；(3)發(fā)生嚴重外周動脈血管性疾病危險度增加4. 1倍。,四、超敏CRP為新生兒細菌感染診斷提供依據(jù)新生兒的CRP參考值比成人低，通常CRP ＜1-2mg/L；若CRP>2mg/L，提示可能有敗血癥的存在。由于新

14、生兒的細菌感染發(fā)展很快，沒有足夠時間產(chǎn)生大量CRP。,19,2018-12-16,CRP濃度的解釋,超敏CRP濃度的解釋,20,2018-12-16,五、結(jié)締組織病,結(jié)締組織病為多系統(tǒng)受累的自身免疫性疾病，包括系統(tǒng)性紅斑狼瘡（ SLE）、類風濕關(guān)節(jié)炎等多種疾病，盡管其病因、病理及臨床表現(xiàn)和治療各不相同，但自身免疫性炎癥在其疾病發(fā)生和發(fā)展過程中均發(fā)揮重要作用。CRP作為一種急性期反應蛋白，在大多數(shù)結(jié)締組織?。ㄈ珙愶L濕關(guān)節(jié)炎、幼年特發(fā)性

15、關(guān)節(jié)炎、系統(tǒng)性血管炎等）的活動期均可升高，CRP水平是類風濕關(guān)節(jié)炎早期關(guān)節(jié)破壞以及判斷預后的重要預測指標之一。風濕四項：RF+ASO+ESC+CRP,21,2018-12-16,5、CRP在不同臨床疾病中的應用,腦膜炎己經(jīng)證實腦膜炎時檢測CRP很有用處，因為它可以用來區(qū)別細菌或病毒感染，敏感性為96%，特異性93%，陰性預期值99%，其他實驗室指標無一能達到此水平。CRP<20mg/L提示病毒性腦膜炎。,肺炎對疑似肺炎者

16、，CRP被認為是篩查的第一線檢查方法。CRP>60mg/L提示為細菌性肺炎。,22,2018-12-16,上頜竇炎流感桿菌是急性上頜竇炎的最常見病原菌，此時的CRP約為20mg/L；CRP>40mg/L提示有可能為化膿性鏈球菌、肺炎鏈球菌感染。,咽喉炎測定CRP可以提高對咽喉部感染的診斷精度；細菌或非細菌性咽喉炎的CRP分界值約35mg/L。,尿路感染CRP在區(qū)分一般的下尿道感染（膀胱炎）及較嚴重的上尿道感染（腎

17、盂腎炎）時，是一個可靠的實驗室指標。CRP大約100-140mg/L提示腎盂腎炎,23,2018-12-16,心肌梗死廣泛梗死時CRP平均160mg/L；局部梗死時CRP平均60mg/L。,闌尾炎若WBC和CRP均正常，則急性闌尾炎的可能性不大；未穿孔者CRP輕度增高，在20mg/L以上；約15%-25％闌尾穿孔病人CRP>100mg/L。,24,2018-12-16,手術(shù)術(shù)前CRP升高者，術(shù)后感染發(fā)生率遠高于術(shù)前C

18、RP不高者，前者住院日也顯著大于后者。,器官移植器官移植后，CRP是個很有用的監(jiān)測指標。移植后頭3天升高，后即開始下降，如CRP不降可懷疑存在早期排異反應；推薦移植術(shù)前測每個患者的CRP基礎(chǔ)濃度，作為移植后的參考，這樣要比使用一個固定參考值準確得多。,25,2018-12-16,例1：,13歲女孩，咽痛3天，虛弱，體溫38－39℃，基本情況良好，咽喉中度紅腫初步診斷：急性咽炎，病因不明實驗室檢測：CRP＜8mg/L測試后診斷：

19、病毒性咽炎開止痛片，多喝熱茶，2天后熱退,病例,26,2018-12-16,37歲男性，腰部區(qū)域疼痛2－3天，體溫38℃。病人職業(yè)是林業(yè)工人，經(jīng)常暴露在濕冷的環(huán)境下，基本情況良好。觸診：后腰右側(cè)痛初步診斷：普通感冒，重體力勞動導致的腰痛實驗室檢測：CRP 117mg/L測試后診斷：急性腎盂腎炎開諾氟沙星，9天后癥狀緩解，CRP ＜8mg/L,例2：,27,2018-12-16,結(jié)論,CRP快速檢測在確保診斷的正確性和治療的有

20、效性方面堪稱一“完美工具”CRP檢測快速準確、立等可取是臨床得以廣泛開展的重要原因減少了不必要的抗生素使用和住院費用，節(jié)約經(jīng)濟，節(jié)省資源CRP快速檢測在疾病進程監(jiān)控，治療效果監(jiān)測方面作用重大最重要的是：醫(yī)生能據(jù)此制定正確的治療方案，患者能得到有效合理的治療,28,2018-12-16,檢測線性及樣本選擇,目前禾柏的散射比濁Hs-CRP檢測試劑盒線性范圍是0.5~200.0 mg/L 樣本為2.5 μl全血，末梢血或靜脈抗凝血均

21、可，使用抗凝血時注意混勻抗凝管，尤其是高血脂樣本，抗凝劑可以是EDTA、枸櫞酸鈉和肝素鈉保存條件可見試劑盒，使用前需要先復溫。,29,2018-12-16,糖化血紅蛋白定義：是一種糖蛋白，是血紅蛋白與血糖發(fā)生緩慢的、不可逆的、非酶促反應而形成的產(chǎn)物。主要成分是HbA1c，是血紅蛋白β亞基的N端與一個己糖相連構(gòu)成的糖蛋白。其比例與血糖濃度成正比，且保持120天左右，所以可以觀測到120天之前的血糖濃度。糖化血紅蛋白測試通常可以反映患者

22、近8～12周的血糖控制情況。,糖化血紅蛋白-HbA1c,HbA1c的生物學特點：不受短期內(nèi)或偶爾出現(xiàn)的血糖波動的影響，反映前兩個月的平均葡萄糖水平抽血時間、是否空腹、是否使用胰島素等因素對其干擾不大與血糖濃度、血糖與血紅蛋白接觸時間及紅細胞存活時間相關(guān),30,2018-12-16,HbA1c的臨床意義與應用：,1）是國際公認的監(jiān)測糖尿病的“金標準”2）評價血糖的總體控制情況血糖越高，糖化血紅蛋白就越高，所以能反映血糖控制水平

23、。如果患者經(jīng)常監(jiān)測血糖都顯示控制較好，而糖化血紅蛋白偏高，則需要考慮是否平時監(jiān)測血糖不夠全面。3）鑒別糖尿病性高血糖及應激性高血糖前者糖化血紅蛋白水平增高而后者正常。4）檢驗治療方案是否有效如果某糖尿病患者定期監(jiān)測糖化血紅蛋白均在6％－7％，而最近一次為8.2％，這表明以往的治療方案已不能較好的控制血糖，需重新調(diào)整。,31,2018-12-16,,對正常人： 4%-6%：正常值對糖尿病患者： 6%-7%：控制理想 7

24、%-8%：可以接受 8%-9%：控制較差 >9%：控制很差，慢性并發(fā)癥發(fā)生發(fā)展的危險因素，并有可能出現(xiàn)酮癥酸中毒等急性合并癥,世界權(quán)威機構(gòu)對于糖化血紅蛋白有著明確的控制指標，ADA（美國糖尿病學會）建議糖化血紅蛋白控制在小于7%，IDF（國際糖尿病聯(lián)盟）建議糖化血紅蛋白控制標準為小于6.5%，目前我國將糖尿病患者糖化血紅蛋白的控制標準定為6.5%以下。,結(jié)果解釋：,32,2018-12-16,糖化血紅蛋白不能作為診斷糖尿病的依

25、據(jù)，也不能取代糖耐量試驗，可作為糖尿病的普查和健康檢查的項目。對于不同的糖尿病患者，有的是需要控制餐后血糖，有的則是控制空腹血糖。同時測定血糖與糖化血紅蛋白可以更好地全面判斷病情，指導治療。,33,2018-12-16,①對昏迷病人的鑒別：在腦血管急癥時，由于應激反應可使血糖增高，但糖化血紅蛋白檢測正常。若糖化血紅蛋白增高預示患者處于高血糖狀態(tài)。②糖化血紅蛋白很高的患者要警惕酮癥酸中毒的發(fā)生。③對妊娠糖尿病僅測定血糖是不夠的，一定

26、要監(jiān)測糖化血紅蛋白，并使其保持在8%以下。如此可避免巨大胎兒、死胎和畸形胎兒的發(fā)生。④指導治療：如已測定了某病人的糖化血紅蛋白，可推算出平均血糖的水平，再用推算值與同一標本的空腹血糖值對比，可預測出近期血糖控制的好壞。,34,2018-12-16,特殊情況,1.如果一個糖尿病患者經(jīng)常發(fā)生低血糖或高血糖，由于糖化血紅蛋白是反映血糖的平均值，而其糖化血紅蛋白完全有可能維持在正常范圍，在這種情況下，它的數(shù)值就不能反映真正的血糖變化了。2.

27、糖化血紅蛋白還受紅細胞的影響，在合并影響紅細胞的質(zhì)和量的疾病時，所測得的糖化血紅蛋白可能反映不出真正的血糖水平。,35,2018-12-16,檢測線性及樣本選擇,目前禾柏的散射比濁Hs-CRP檢測試劑盒線性范圍是2.0~14.0 %樣本為10 μl全血，末梢血或靜脈抗凝血均可，使用抗凝血時注意混勻抗凝管，尤其是高血脂樣本，抗凝劑可以是EDTA、枸櫞酸鈉和肝素鈉保存條件可見試劑盒，使用前需要先復溫。,36,2018-12-16,D-

28、二聚體（D-Dimer）,D-二聚體是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子XIII交聯(lián)后，再經(jīng)纖溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解產(chǎn)物，是一個特異性的纖溶過程標記物。D-二聚體來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊。因此，D-二聚體的血清含量直接反應了體內(nèi)的纖維蛋白溶解功能。,37,2018-12-16,D-二聚體現(xiàn)在沒有統(tǒng)一的國際標準。由于其類型多樣，由于不同檢測試劑只測定其中某種類型，而非降解片段的全部，因此各類試劑在對同一標本進行測定時，其敏感性顯著

29、不同。目前，>30種檢測方法（20余種單克隆抗體）被應用于臨床，不同試劑間差異非常顯著。禾柏的D-二聚體試劑盒檢測的參考值是0~1.35 mg/L,38,2018-12-16,D-二聚體臨床應用,只要機體血管內(nèi)有活化的血栓形成及纖維溶解活動，D-二聚體就會升高。心肌梗死、腦梗死、肺栓塞、靜脈血栓形成、手術(shù)、腫瘤、彌漫性血管內(nèi)凝血、感染及組織壞死等均可導致D-二聚體升高。特別對老年人及住院患者，因患菌血癥等病易引起凝血異常而導

30、致D-二聚體升高。因此，D-二聚體主要用于陰性排查以及溶栓治療的檢測，最主要的臨床價值是用于排除靜脈血栓性疾?。ㄈ鏒VT和PE等）。D-Dimer的半衰期為6-8小時，當纖維蛋白形成終止后，D- Dimer可能在12-24小時內(nèi)發(fā)生較大幅度的變化。,39,2018-12-16,對于血栓的排除還有其他一些方法，比如造影，診斷DVT和PE的“金標準”，是最有效和直觀的方法，但是造影對人體有一定侵入性傷害，并且對小血栓同樣不能明確，收費也

31、相對高昂。其他的方法，比如多普勒、白細胞和中性變化都有一定的局限性檢測血清D-二聚體水品簡單便捷，價格低廉，特別適合普通人群的常規(guī)篩查。,40,2018-12-16,D-二聚體檢測溶栓治療,在溶栓治療中，D-二聚體含量變化一般有以下特點：①溶栓后D-二聚體含量在短期內(nèi)明顯上升，而后逐漸下降，提示治療有效；②溶栓后D-二聚體含量持續(xù)升高或下降緩慢，提示溶栓藥物用量不足；③溶栓治療應持續(xù)到D-二聚體含量下降至正常范圍。恢復正常的D

32、-二聚體是停止溶栓的指征。,41,2018-12-16,1.彌漫性血管內(nèi)凝血(DIC)的診斷： DIC時，由于廣泛的微血栓形成，以及繼發(fā)性纖溶亢進，導致D-二聚體水平顯著增高，其敏感性和特異性顯著高于血小板計數(shù)、纖維蛋白原定量、纖維蛋白（原）降解產(chǎn)物（FDP）等篩選檢測試驗。2.白血?。喊籽〖毎泻袕娏业拇倌镔|(zhì)，可激活外源凝血系統(tǒng)，血漿D-二聚體水平可以達到5000μg/L。發(fā)病早期D-二聚體水平即升高，化療后下降，動態(tài)觀察血漿

33、中D-二聚體水平變化，有助于病情判斷和療效觀察。,42,2018-12-16,3.急性心肌梗死及腦血栓形成：患者急性發(fā)病時血漿D-二聚體水平明顯增高，D-二聚體檢測不僅可作為觀察心肌梗死病情的一項指標，而且也是觀察溶栓治療的一種理想檢測方法。4.腫瘤輔助診斷：惡性腫瘤患者中血栓發(fā)生率約10-30%，癌癥患者術(shù)后血栓（特別是下肢靜脈血栓及肺栓塞）發(fā)生率可高達50%，其中90%患者D-二聚體水平升高。一般情況下，惡性腫瘤時D-二聚體的水平

34、顯著高于良性腫瘤，而形成的血栓多為靜脈血栓，少數(shù)為彌漫性血管內(nèi)凝血。對惡性腫瘤患者進行血漿D—二聚體檢測，對病人是否伴有DIC和血栓的診斷，具有十分重要的參考價值。,43,2018-12-16,5.外科手術(shù)：可使D-二聚體水平顯著增高，如果患者自身存在遺傳性抗凝缺陷，或者存在風險因素的情況下，易發(fā)生靜脈血栓，導致D-二聚體水平顯著增高。6.妊娠高危癥與先兆子癇：正常妊娠后期的生理性高凝狀態(tài)下，D-二聚體水平增高，孕婦血漿的D-二聚體水

35、平明顯高于非孕婦女，但低于妊高癥孕婦，測定血漿D—二聚體含量對妊高癥患者高凝狀態(tài)的診斷、療效檢測和預后判定有重要意義。,44,2018-12-16,7.肺栓塞(PE，pulmonary embolism）)和動脈血栓塞的診斷：肺栓塞時，D-二聚體水平顯著增高，且栓塞的面積以及栓子的大小與D-二聚體水平顯著相關(guān)。8.肝臟疾?。焊闻K疾病患者血漿中D-二聚體含量明顯增高，并與肝病的嚴重程度呈正相關(guān)。9.纖溶作用機制的早期測驗－血栓前危險評

36、價：繼發(fā)性纖溶亢進時，D-二聚體水平顯著增高，原發(fā)性纖溶癥時，D-二聚體不增高。陳舊性血栓形成時，D-二聚體不增高。,45,2018-12-16,10.組織損傷：D-二聚體水平增高，D-二聚體水平增高的幅度與損傷的時間與程度相關(guān)。11.急性失血與慢性失血：D-二聚體水平增高。12.長期臥床、口服避孕藥、遺傳性抗凝系統(tǒng)缺陷：會導致深靜脈血栓形成，D-二聚體水平顯著增高。13.糖尿?。捍嬖趶V泛的血栓病變時，D-二聚體水平顯著增高。

37、,46,2018-12-16,14.深靜脈血栓形成（DVT，Deep Vein Thrombosis）：幾乎所有的DVT患者D-二聚體呈陽性，血漿D-二聚體陰性可以基本排除DVT可能。D-二聚體可反映血栓大小的變化，因此可作為溶栓治療和肝素抗凝的用藥指導及療效觀察，治療期間持續(xù)較高，說明治療無效；含量再升高，預示血栓再發(fā)生。15.腎病綜合征以及腎功能衰竭：D-二聚體水平可顯著增高。,47,2018-12-16,檢測線性及樣本選擇,,

38、目前禾柏的散射比濁Hs-CRP檢測試劑盒線性范圍是0.5~20.0 mg/L 樣本為10.0 μl血清/血漿，抗凝劑可以是EDTA、枸櫞酸鈉和肝素鈉保存條件可見試劑盒，使用前需要先復溫。,48,2018-12-16,尿微量白蛋白（MALB）,尿微量白蛋白是指：尿中含有的、少量的但屬于不正常情況下分泌出的白蛋白。白蛋白是一種血液中的正常蛋白質(zhì)，占血漿總蛋白量的60％，分子量為69kD，是一種帶負電荷的非糖化大分子蛋白，其以每天約1

39、4克的速度在肝實質(zhì)細胞內(nèi)合成。但在生理條件下尿液中僅出現(xiàn)極少量白蛋白。,49,2018-12-16,微量白蛋白尿反映腎臟異常滲漏蛋白質(zhì)。是糖尿病腎病、高血壓腎病等的早期腎臟受損的表征。尿微量白蛋白的增高多見于糖尿病腎病、高血壓、妊娠子癇前期，是腎損傷的早期敏感指標。無論哪種疾病引起的尿微量白蛋白都是因起始原因不同造成的腎臟固有細胞的損傷，使腎臟固有細胞的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，功能隨結(jié)構(gòu)的變化而變化，在尿液中的體現(xiàn)。,50,2018-12-16

40、,參考值,人體代謝正常情況下，尿中的白蛋白極少，具體到每升尿白蛋白不超過25mg（有地地區(qū)是<20 mg/L），所以叫微量白蛋白。當尿微量白蛋白在正常范圍內(nèi)時，尿常規(guī)尿蛋白的顯示為陰性（-）或（+-）。,51,2018-12-16,尿微量白蛋白檢測的臨床意義,尿微量白蛋白是評估腎臟受損程度：當發(fā)現(xiàn)尿微量白蛋白在20mg/L-200mg/L范圍內(nèi)，尿常規(guī)尿蛋白的顯示為陰性(-)或(+-)，就屬于微量白蛋白尿，這個時候說明腎臟已經(jīng)損

41、傷。而當尿中微量白蛋白超過200mg/L時，尿常規(guī)測試尿蛋白陽性(+)~(+++)，就應該警惕了，此時證明機體已有大量白蛋白漏出，可能出現(xiàn)低蛋白血癥，腎病發(fā)展離不可逆期只有一步之遙，如果不及時進行醫(yī)治，就會進入尿毒癥期。,52,2018-12-16,微量白蛋白尿也是整個血管系統(tǒng)改變的征象，并可認為是動脈病變的“窗口”，因為它是腎臟和心血管系統(tǒng)改變的早期指征。定期檢測尿微量白蛋白(U-MA)，普通人應當每年一次，而已增高的患者應每3個月

42、測試一次。這樣，對于腎病的預防及早期治療都起的了積極作用。,53,2018-12-16,在糖尿病診斷中的作用：微量白蛋白尿癥最早出現(xiàn)，是糖尿病腎病和終末腎病的早期預測指標；微量白蛋白尿癥是1型或2型糖尿病人心血管發(fā)病率和死亡率增高的預兆指標,54,2018-12-16,在心血管疾病中的臨床意義： 微量白蛋白尿是心、腦、腎及血管損傷的標志，并與心血管疾病危險增加和死亡增加密切相關(guān)，原因可能是非酶糖化蛋白聚集在

43、腎小球基底膜上，使腎小球濾過屏障通透性增加，出現(xiàn)尿微量白蛋白，同時也積聚在全身大血管及微血管壁上，致大動脈中層脂質(zhì)堆積和微血管病變。,55,2018-12-16,在2型糖尿病合并冠心病中的臨床意義： 微量白蛋白尿是糖尿病患者腎臟和血管結(jié)構(gòu)發(fā)生改變的早期表現(xiàn)，是早期診斷糖尿病腎病的重要依據(jù)，也是冠心病的獨立預測因子。出現(xiàn)微量白蛋白尿的2型糖尿病患者，其動脈血管內(nèi)皮功能不全嚴重，可促進冠心病的發(fā)生和發(fā)展，導致左室功能明

44、顯受損。,56,2018-12-16,測試線性及樣本選擇,目前禾柏的散射比濁MALB檢測試劑盒線性范圍是10~220 mg/L，操作簡單，檢測快速，結(jié)果靈敏。 測定尿微量白蛋白最理想的方法是留取24小時標本，但因留取困難，在實際應用上受到限制。隨機尿測定是目前最常用，最易行的方法。 標本用量是10 μl。,57,2018-12-16,類風濕因子（RF）,類風濕因子（rheumatoid factor,RF）是由于感染因子

45、（細菌、病毒等）引起體內(nèi)產(chǎn)生的以變性IgG（一種抗體）為抗原的一種抗體，故又稱抗抗體。 是類風濕關(guān)節(jié)炎血清中針對IgG FC片段上抗原表位的一類自身抗體，可分為IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型（注：在臨床內(nèi)科學中描述為四型，沒有IgD型；但在實驗室診斷學中描述為5型）。,58,2018-12-16,RF對于診斷類風濕因子性關(guān)節(jié)炎具有重要意義。70-80%類風關(guān)患者RF為陽性，30%SLE患者為陽性，其他

46、結(jié)締組織病及慢性肝炎、老年人等具有一定的陽性率。,59,2018-12-16,參考值,人體正常情況下RF的血清含量一般<30 IU/ml 較高的RF值可提示相關(guān)疾病的可能，但不是獨立的判斷指標。對于已經(jīng)確診的患者，可作為評價藥物療效和判斷預后的指標。,60,2018-12-16,臨川應用,類風濕因子陽性可見于多種疾病，其中在類風濕關(guān)節(jié)炎患者中的陽性率最高，達80%左右，如伴類風濕結(jié)節(jié)和脾

47、腫大等時，陽性率達85％左右，嚴重病例可超過90％，是診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的血清學指標之一。,61,2018-12-16,同時，類風濕因子也存在于其他一些免疫性疾病病變中，如：干燥綜合癥、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、各種肝病、慢性支氣管炎、肺氣腫等。也就是說，類風濕因子陽性的病人，不一定就是類風濕關(guān)節(jié)炎，相反，類風濕因子陰性也不一定不是類風濕關(guān)節(jié)炎。類風濕關(guān)節(jié)炎的診斷，應結(jié)合癥狀、體征、化驗以及病理切片等各方面情況作具體分析。如類風濕因子陽性，應進一步

48、檢查其滴度，并測定用于早期診斷類風濕關(guān)節(jié)炎的血清學指標，如抗核周因子和抗角蛋白抗體等，以及診斷其他自身免疫性結(jié)締組織病的自身抗體，如抗核抗體和抗抗可溶性抗原抗體等。,62,2018-12-16,試劑盒線性及樣本選擇,目前禾柏的散射比濁RF檢測試劑盒線性范圍是5~160 IU/ml。 所用的標本為5.0 μl全血樣本，末梢血和靜脈血均可，抗凝劑可以是EDTA,枸櫞酸鈉和肝素鈉。,63,2018-12-16,抗鏈球菌

49、溶血素O,鏈球菌溶血素O：A組鏈球菌的代謝產(chǎn)物之一，可以溶解人紅細胞，具有很強的抗原性。即SLO?？规溓蚓苎豋：機體因咽炎、扁桃體炎、猩紅熱、丹毒、膿皮病、風濕熱等感染A組鏈球菌后，可產(chǎn)生鏈球菌溶血素O抗體，即“Anti-Streptolysin O（ASO）”。,64,2018-12-16,參考值,由于人們常與A族鏈球菌接觸，正常人也存在低效價的抗體，通常效價都低于200 IU/ml（<200 IU/ml）。

50、 兒童<250 IU/ml。 少于15-20%的健康人血清中的ASO含量高于200IU/ml。大多數(shù)新生兒的ASO含量高于其母親，但在其出生后數(shù)周內(nèi)ASO含量會急劇下降。學齡前兒童的ASO值通常低于100IU/ml，然后隨年齡的增加ASO值增加，并在學齡期達到頂峰，成年后ASO值下降。,65,2018-12-16,臨床應用,評估感染的情況 鏈球菌感染后抗“O”的產(chǎn)生一般在1－

51、2周左右，3－4周達高峰，2個月后逐漸恢復正常。某些病例因扁桃體肥大、對SLO過敏或鼻竇炎，ASO水平可持續(xù)數(shù)月不降。 當感染減退時，ASO值下降并在6個月內(nèi)回到正常值，如果ASO滴度不下降，提示可能存在復發(fā)性感染或慢性感染。多次測定，抗體效價逐漸升高對診斷有重要意義，抗體效價逐漸下降，說明病情緩解。,66,2018-12-16,風濕熱、急性腎小球腎炎、結(jié)節(jié)性紅斑、猩紅熱、急性扁桃體炎等ASO明顯升高

52、。少數(shù)肝炎、結(jié)締組織病、結(jié)核病及多發(fā)性骨髓瘤病人亦可使ASO增高。ASO動態(tài)檢測對病程及療效觀察意義較大，結(jié)合CRP檢測臨床意義更大。,67,2018-12-16,68,2018-12-16,ASO和RF的結(jié)合應用,除了急性階段外，類風濕關(guān)節(jié)炎患者的血清中通常檢測不到ASO值的升高。在腎病綜合征和抗體缺乏綜合征患者的血清中僅有極低含量的ASO。ASO升高、RF正常：見于風濕ASO升高、RF陽性：見于類風濕ASO正常、RF陽性：

53、預后不良ASO正常、RF正常：排除類風濕,69,2018-12-16,試劑盒線性及樣本選擇,目前禾柏的散射比濁ASO檢測試劑盒線性范圍是30~600 IU/ml 所用的標本為2.5μl全血樣本，末梢血和靜脈血均可，抗凝劑可以是EDTA,枸櫞酸鈉和肝素鈉。 保存時避免冷凍，檢測時需恢復室溫,70,2018-12-16,降鈣素原（PCT）,降鈣素原是近幾年發(fā)現(xiàn)的一種新的炎性因子。是一種由116個氨基酸組

54、成、分子量大約為13KD的糖蛋白,是無激素活性的降鈣素(CT)前肽物,其分子由降鈣素、下鈣素和一個含57個氨基酸的Ｎ 末端碎片組成。動物實驗證明, PCT可能是一種次級炎癥因子,本身不直接參與啟動膿毒血癥反應, 但可放大并加重膿毒血癥病理過程。,71,2018-12-16,PCT的產(chǎn)生：在人體正常狀態(tài)下，PCTPCT由甲狀腺的髓質(zhì)細胞分泌,不釋放入周圍循環(huán)血中,在體內(nèi)很穩(wěn)定。當人體處于嚴重細菌感染時全身的很多細胞都能產(chǎn)生PCT，但

55、具體產(chǎn)生的組織目前還不是很明確（甲狀腺全部切除的病人,當有嚴重的細菌感染時,血中PCT水平仍很高）,72,2018-12-16,參考值,PCT 在健康個體中的濃度非常低( < 0.1ng /ml ), 并且在活體內(nèi)外都是非常穩(wěn)定的蛋白, 半衰期大約20~ 24h。PCT 在內(nèi)毒素等細胞因子誘導下, 2~ 3h 開始增加, LPS 后2h血漿中可檢測到, 6 ~ 8h 體內(nèi)濃度快速升高, 12~ 48h到達峰值, 2~ 3d后恢復

56、正常。 臨床上常用的正常參考值是<0.5 ng/ml。,73,2018-12-16,PCT濃度會隨著細菌感染情況升高而病毒感染卻受到產(chǎn)生的?-干擾素抑制,74,2018-12-16,降鈣素原在體外有很好的穩(wěn)定性,無論放置4°C 或25°C 對PCT的檢測均無影響反復凍融也沒有影響,by Meisner M.et al., Eur.J.Clin.Chem Clin Biochem 1997,7

57、5,2018-12-16,PCT的臨床應用,當嚴重細菌、真菌、寄生蟲感染以及膿毒癥和多臟器功能衰竭時它在血漿中的水平升高。自身免疫、過敏和病毒感染時PCT不會升高。局部有限的細菌感染、輕微的感染和慢性炎癥不會導致其升高。,主要作為一個急性的參數(shù)來鑒別診斷細菌性和非細菌性感染和炎癥。以及感染程度的判定。,76,2018-12-16,臨床細菌感染/膿毒血癥的挑戰(zhàn),急診科 懷疑感染或不明原因發(fā)熱患者的鑒別診斷

58、重癥監(jiān)護室（ICU） 膿毒血癥的診斷、治療效果監(jiān)測等兒科/新生兒科 不明原因發(fā)熱的患兒、疑似感染的鑒別診斷呼吸科 呼吸系統(tǒng)感染的鑒別診斷、治療監(jiān)測、抗生素使用的管理外科病房 手術(shù)后是否發(fā)生細菌感染的監(jiān)測血液科 是否感染引起的發(fā)熱、白細胞異常的鑒別診斷風濕免疫科 自身免疫性疾病與感染的鑒別診斷腫瘤科 放療、化療后是否感染引起的發(fā)熱的鑒別

59、診斷,77,2018-12-16,PCT檢測的主要特點和優(yōu)勢,臨床上能用于診斷細菌感染和膿毒癥的指標不少：WBC 白細胞計數(shù)Endotoxin 內(nèi)毒素IL-6 白介素-6IL-10 白介素-10TNF 腫瘤壞死因子Procalcitonin 降鈣素原CRP C反應蛋白Protein CHMG-1sTREM-1........,但我們理想的標志物應該具備以下特點：檢測簡單方便

60、檢測快速，成本低，高的特異性和敏感性能夠反映疾病的嚴重程度早期準確診斷反映預后和治療的療效,78,2018-12-16,血培養(yǎng)是診斷膿毒癥/細菌感染的金標準但仍然面臨應用上的問題：,1、報告時間較長 (48 – 72 h)2、當前遇到的臨床靈敏度較低 *國內(nèi)大多數(shù)醫(yī)院陽性檢出率<15%

61、 *臺灣地區(qū)采取雙套瓶策略，陽性檢出率20%-35% 抽血時間點、部位、血量、瓶數(shù)等 抽血是否規(guī)范 感染部位是否容易導致血培養(yǎng)陽性 3、血培養(yǎng)污染 需要專門的隔離間等條件,79,2018-12-16,血常規(guī)和白介素-6,血常規(guī)（WBC計數(shù)） : 優(yōu)點：可檢項目多，成本低廉，技術(shù)成熟，臨床認知廣泛

62、， 缺點：缺乏敏感性和特異性，不同微生物感染時白細胞計數(shù)可以升高、降低甚至缺乏；方法學所限（coulter原理、化學染色、激光分類等），正常值范圍過寬、模糊，特異標本結(jié)果偏差較大。IL6： 優(yōu)點：細菌感染/膿毒癥時峰值出現(xiàn)最早的生物標志物； 缺點：特異性不高的一種前炎癥細胞因子，膿毒癥時IL6的水平可以診斷感染及判定預后, 非感染因素也會引起IL6的非特異性升高,80,2018-12-16,無論是對膿毒癥的診

63、斷、預后評估及治療監(jiān)測，PCT都體現(xiàn)出最優(yōu)異的性能,快速、高特異性的增長 在膿毒癥情況下，3-6小時即可檢測到其水平的增長,在疾病監(jiān)測方面，PCT有著自然的優(yōu)勢!峰值出現(xiàn)較晚，且半衰期較長，是（細菌感染性）膿毒癥的特異性的確診指標,在一次內(nèi)毒素刺激的人體試驗中不同的標志物的動力學變化,81,2018-12-16,國際關(guān)于膿毒癥的診斷指南,82,2018-12-16,臨床應用,一、外科應用 術(shù)后感染的鑒別診斷

64、 術(shù)后常見的發(fā)熱，是機體本能的應急反應？還是真正由細菌感染引起的發(fā)熱？PCT濃度不受業(yè)已存在的疾病如癌癥、變態(tài)反應或自身免疫性疾病的影響，PCT明顯優(yōu)于其他炎癥因子如CRP和細胞因子，是一種客觀肯易檢測的指標，有其獨特的診斷優(yōu)勢，甚至優(yōu)于那些帶有侵入性，風險性和造價均高的診斷方法，如細針穿刺病理檢查法。PCT可用于手術(shù)創(chuàng)傷或復合創(chuàng)傷的監(jiān)測。PCT用于心臟手術(shù)患者，心臟手術(shù)使用心肺機，即使患者有白細胞增多癥，中性粒細胞增多癥，嗜酸性細

65、胞減少癥或CRP升高不充分等疾病，PCT濃度通常不升高或僅有輕微升高，故PCT很適合用于敗血癥的檢測。,83,2018-12-16,外科術(shù)后血清PCT濃度變化規(guī)律,術(shù)后感染的鑒別診斷PCT+血常規(guī)+CRP評估術(shù)后感染風險,84,2018-12-16,二、移植外科,PCT應用于器官排斥反應，器官移植后監(jiān)測的主要任務之一就是能明確區(qū)分感染與器官排斥。因為PCT的釋放不是由急性或慢性器官排斥反應刺激引起的，所以高濃度的PCT即可認為有感染存

66、在。如果PCT濃度超過10 ng·ml，98℅的可能是感染而非器官排斥。PCT用于器官移植患者感染的診斷，免疫抑制療法嚴重削弱了器官移植患者的抗感染能力。PCT可早在感染發(fā)生僅2小時即可提示有系統(tǒng)性感染的存在。感染早期PCT>0.1 ng·ml，其靈敏度77℅，特異性100℅，逐月的PCT濃度監(jiān)測可對抗微生物療法的療效作出可靠的評價。,85,2018-12-16,三、新生兒科,PCT是新生兒敗血癥高度特異性的

67、指標：早產(chǎn)兒和新生兒敗血癥感染，PCT可作出較傳統(tǒng)方法更早更具特異性的診斷，它對新生兒診斷的靈敏度和特異性可達100℅。,許多疾病在早產(chǎn)兒和新生兒中無特異性表現(xiàn)。血液學檢查和傳統(tǒng)的實驗室指標和急性期蛋白對新生兒敗血癥均不能作出可靠的診斷。微生物檢查的結(jié)果需要幾天的時間，而且陰性結(jié)果并不能排除臨床感染的存在以及與此相關(guān)的高死亡率。與其他炎癥診斷指標相比，PCT是一種改進的實驗室指標，它對新生兒出生后敗血癥的診斷具有高度的靈敏度和特異性。,

68、早產(chǎn)兒和新生兒PCT年齡依賴性正常值：PCT于出生后24-30小時達其生理性高峰21ng·ml，但平均值僅為2 ng·ml，。出生后第三天起，PCT正常參考值同成人。建議PCT+CRP評估感染風險,86,2018-12-16,四、內(nèi)科,PCT選擇性地對系統(tǒng)性細菌感染、相似菌感染及原蟲感染有反應，而對無菌性炎癥和病毒感染無反應或僅有輕度反應。如：成人呼吸窘迫癥感染性和非感染性病因?qū)W的鑒別診斷；胰腺炎感染壞死和無菌