微生物免疫 ppt課件

1、第 九 章傳染與免疫,第一節(jié) 傳 染,一、傳染1.傳染的種類 隱性、潛伏和臨床感染。2.傳染病：鼠疫、埃博拉熱、幽門螺旋桿菌感染等。,二 決定傳染的三大因素,病原體,宿主免疫力,環(huán)境：內(nèi)+外,致病力：毒素+侵襲力,感染數(shù)量,感染途徑,防御,穩(wěn)定,監(jiān)視,天生有，相對穩(wěn)定，無特殊針對性。一、屏障結(jié)構(gòu)1.皮膚和粘膜 汗腺（乳酸）；皮脂腺（脂肪酸）；胃粘膜（胃酸）；呼吸道（溶菌酶）。2.血腦屏障 藥物改造，青霉素、氨芐

2、、氯霉素通過率高，紅霉素、頭孢通過性差。,第二節(jié) 非特異性免疫,腦毛細血管的剖面圖,3.血胎屏障子宮內(nèi)膜的基蛻膜和胎兒絨毛膜組成。母體感染乙肝時，如何避免胎兒患??？,二、吞噬細胞 能運動，吞噬和消化異?？乖?，如巨噬細胞。1.吞噬和殺菌,2.免疫調(diào)節(jié)（1）抗原遞呈：加工抗原→激活淋巴細胞。,抗原遞呈過程,（2）分泌白細胞介素-1、前列腺素等，激活淋巴細胞；3.分泌腫瘤壞死因子，協(xié)同或直接殺傷癌細胞。,三、體液或組織中的抗菌物

3、質(zhì) 主要配合免疫細胞、抗體發(fā)揮功能。 如補體系統(tǒng)、溶菌酶、干擾素、白細胞素等。,1.補體（系統(tǒng)） 人和動物體液中的一組血清蛋白，經(jīng)活化后可增強抗體介導的溶菌作用，起到“補助”作用。（1）發(fā)現(xiàn)（2）組成及表示方法（C1-C9）（3）特性 ①被抗原抗體復合物激活并結(jié)合； ②不穩(wěn)定，對熱敏感（56℃, 10min）。,（4）補體的激活途徑經(jīng)典途徑旁路途徑MBL途徑（甘露聚糖結(jié)合凝集素） 三種途徑總結(jié),（5）

4、作用 ①溶菌和殺傷細胞：紅細胞、白細胞或G-菌。 ②溶解和中和病毒 ③趨化作用：C3a、C5a ④免疫粘附：結(jié)合到巨噬細胞→抗原抗體和補體復合物被巨噬細胞吞噬。 ⑤過敏毒素：結(jié)合肥大細胞，釋放組胺→血管 透性增加，平滑肌收縮→支氣管痙攣。,2.干擾素（interferons, IFNs） 高等動物細胞受誘生劑（病毒或dsRNA，病原菌和毒素）刺激產(chǎn)生, 高活性、廣譜抗病毒的糖蛋白。（1）特點誘導產(chǎn)生

5、廣譜的抗病毒受宿主種屬特異性的限制。理化性質(zhì)較穩(wěn)定 60ºC，1h不被破壞，pH2－11內(nèi)不變性。,（2）誘導和作用機制 不直接作用于病毒。,（3）干擾素的類型Ⅰ型：IFN-α，IFN-β，分別由白細胞和成纖維細胞產(chǎn)生，耐酸→抗病毒，抗腫瘤。 Ⅱ型：IFN-γ，T細胞產(chǎn)生，不耐酸→免疫調(diào)節(jié)。,（4）功能抗病毒（乙肝、流感，皰疹），抗菌（下調(diào)轉(zhuǎn)鐵蛋白或產(chǎn)生NO），抗寄生蟲（激活巨噬細胞→產(chǎn)

6、NO合酶→催化L-精氨酸產(chǎn)NO）。免疫調(diào)節(jié):激活NK、巨噬細胞、T細胞、B細胞；殺傷癌細胞：抑制DNA合成與細胞增殖；改變表面抗原→治療癌癥。,四、炎癥反應1.機體對于病原體的入侵或其他損傷產(chǎn)生的保護性反應，紅、腫、熱、痛和功能障礙，病理過程+免疫反應。2.發(fā)生反應巨噬細胞、抗體聚集、抗菌因子（如滲出液能稀釋毒素；滲出的纖維蛋白原形成莢膜屏障）、組織增生（修復炎區(qū)產(chǎn)生的損傷）；乳酸↑，溫度↑，氧↓。,第三節(jié) 特異性免疫,后天

7、接觸外來抗原（病原菌或疫苗）獲得，體液+細胞免疫。一、特點與獲得方式1.特點：后天性，特異性，差異性。2.獲得方式自動：接種疫苗，類毒素，臨床感染；維持時間長；被動：注射抗血清、抗毒素等；維持時間短。,二、免疫應答（immune response）抗原刺激→識別抗原→活化，增殖與分化→體液和細胞免疫。感應階段→反應階段→效應階段。,三、免疫器官1.中樞免疫器官（一級淋巴器官）骨髓：T、B細胞的發(fā)源地，B細胞成熟場所。

8、胸腺：是T細胞分化和成熟的場所。法氏囊：鳥類特有，B細胞在此成熟。,2.外周免疫器官儲存免疫細胞，執(zhí)行免疫應答。包括：脾臟（體內(nèi)最大淋巴器官），淋巴結(jié)。,四、免疫細胞（immunocyte） 具有免疫功能的細胞，包括T、B、D、K以及粒細胞、單核細胞和巨噬細胞。1.免疫活性細胞 識別抗原，接受刺激，產(chǎn)生細胞因子和抗體，如T細胞、B細胞、巨噬細胞。,2.T細胞（1）表面受體綿羊紅細胞受體（E受體，T細胞表面的特有受體）→

9、中間是T細胞，周圍環(huán)繞綿羊紅細胞，像玫瑰花→E玫瑰花結(jié)試驗。（檢測外周血液中T細胞的數(shù)量）抗原受體：不能直接識別，只接受APC加工的抗原。有絲分裂原受體：結(jié)合有絲分裂原，刺激細胞合成DNA和進行有絲分裂。（2）作用：執(zhí)行細胞免疫，細胞毒作用+遲發(fā)型超敏反應，抗體合成和炎癥反應。,（3）分類 由標記和功能不同，分調(diào)節(jié)性和效應性T細胞。 ① 調(diào)節(jié)性T細胞（T regulator, TR）TH細胞：輔助活化B細胞產(chǎn)抗體。Ts

10、細胞：抑制TH、Tc和B細胞功能，控制淋巴細胞的分裂增殖。,② 效應性T細胞（T effector, TE）:遲發(fā)型超敏T細胞（TDTH）： 抗原刺激→活化成致敏淋巴細胞→再次接觸，增殖、釋放淋巴因子（24-48h）→炎癥（移植排異，接觸性皮炎）,此反應與抗體和補體無關。,速發(fā)型超敏反應4-5h,細胞毒T細胞（Tc） 特異溶解帶Tc抗原的靶細胞（如腫瘤細胞、移植細胞、病原菌感染的細胞等）。,效應T細胞的殺傷作用,4.B細胞受

11、抗原刺激后，可分化為漿細胞和記憶性B細胞?？乖荏w種類多樣，一個個體內(nèi)含109-1012種；是一種膜表面免疫球蛋白（IgM+IgD）；既是抗原受體，也是表面抗原→結(jié)合相應抗體→免疫熒光法鑒定B細胞。,5.第三淋巴細胞（1）NK細胞(自然殺傷細胞) 無抗體或補體時，殺傷腫瘤或靶細胞。（2）K細胞（殺傷細胞） 與NK細胞相似，專一性但非特異性的殺死被IgG抗體所覆蓋的靶細胞（腫瘤細胞、病菌感染的細胞）→抗體依賴性細胞介導

12、的細胞毒作用（ADCC）。6.第四淋巴細胞 同時具備T細胞和NK細胞特征的淋巴細胞，抑制癌癥轉(zhuǎn)移和延緩衰老，也可導致免疫缺陷癥。,,,四、免疫分子,免疫分子,膜表面免疫分子,膜表面抗原受體（免疫細胞表面）,組織相容性抗原：代表組織特異性。,白細胞分化抗原,粘附因子：綿羊紅細胞受體、B細胞受體等。,體液免疫分子,抗體,補體,細胞因子,,,,（一）、抗原（antigen，Ag） 刺激機體產(chǎn)生（特異性）免疫應答，并能與免疫應答產(chǎn)物抗

13、體和致敏淋巴細胞在體外結(jié)合，發(fā)生免疫效應（特異性反應）的物質(zhì)。 1.特性 免疫原性（抗原性）+免疫反應性（反應原性）。,2.種類（1）完全抗原：免疫原性+免疫反應性。（2）半抗原（多糖和類脂）復合半抗原：只有免疫反應性，如莢膜多糖。簡單半抗原：都沒有，但與抗體發(fā)生不可見結(jié)合，如莢膜多糖的水解物。,半抗原→完全抗原 半抗原+載體（蛋白質(zhì)）→完全抗原 B細胞識別半抗原，T細胞識別載體。,載體(Carrier，C) ：大

14、 分子，Pro.等半抗原(Hapten，H)： H1、H2、H3 ……完全抗原(Ag)=C +nH,3.作為抗原的條件(1)相對分子量大：一般>10000；低于4000，無活性。(2)結(jié)構(gòu)組成復雜免疫原性：蛋白質(zhì)＞多糖＞核酸＞類脂蛋白質(zhì)含芳香Aa越多，結(jié)構(gòu)越復雜。注：抗原和細胞結(jié)合強弱的影響因素結(jié)構(gòu)復雜與否；立體構(gòu)象（抗原決定簇和細胞表面受體是否密切結(jié)合）；易接近性（抗原決定簇和受體接觸的難易

15、程度）有關。,(3)異物性與自身成分相異未與宿主胚胎期免疫細胞接觸過。,4.抗原的特異性（1）抗原決定簇（antigenic determinant） 位于抗原表面，決定抗原特異性，結(jié)合抗原受體，啟動免疫應答。（2）抗原結(jié)合價(antigenic valence) 抗原上與抗體接合的抗原決定簇的總數(shù)目。 半抗原為單價，天然抗原為多價。,5.抗原代表-細菌抗原表面抗原：莢膜或微莢膜抗原；菌體抗原：細胞壁、細胞膜

16、和細胞質(zhì)上的抗原。如O抗原（G-細菌表面耐熱、抗乙醇的脂多糖-蛋白抗原）；鞭毛和菌毛抗原；外毒素和類毒素。注：外毒素主要通過體液免疫中和；內(nèi)毒素通過細胞免疫中和。,6.共同抗原和交叉反應（1）共同抗原：多種抗原系統(tǒng)都具有。（2）特異性抗原：一些細胞所特有。 一種細菌都含有共同和特異性抗原。（3）交叉反應：由于存在共同抗原，兩抗原系統(tǒng)和對方的抗體之間發(fā)生的較弱的免疫反應。（4）凝集吸收反應：多種特異抗血清+顆粒狀共同抗

17、原→獲特異抗體。,,,,7.補充概念自身抗原：機體中引起自身免疫應答的抗原。腫瘤抗原：癌變中產(chǎn)生的新抗原及過度表達的抗原。 有腫瘤特異性和腫瘤相關抗原（正常細胞中的量＜癌細胞）。超抗原（superantigen，SAg）：低濃度，直接結(jié)合免疫細胞→激活T或B細胞→免疫應答。佐劑：非特異性免疫增強劑，預先或同抗原一齊注射→增強或改變免疫應答。如Al(OH)3佐劑、脂多糖、明礬等。,（二）、抗體（antibody，Ab）1.什

18、么是抗體？ 機體受抗原刺激后，由B細胞分化而成的漿細胞產(chǎn)生的免疫球蛋白，能與抗原分子發(fā)生特異性結(jié)合。2.什么是免疫球蛋白？ 具有抗體活性或化學結(jié)構(gòu)與抗體分子相似的球蛋白。,,3.免疫球蛋白的特點魚類以上脊椎動物漿細胞，需抗原刺激產(chǎn)生；與相應抗原發(fā)生特異性、非共價和可逆性的結(jié)合；可作為抗原，刺激產(chǎn)生抗抗體。,4.結(jié)構(gòu)（1）四條鏈：2條H鏈+2條L鏈，-S-S-鍵（2）兩個端：N端+C端（3）三個區(qū)：穩(wěn)定，可變（特異性

19、）和鉸鏈區(qū)（改變構(gòu)型）。（4）水解片段(木瓜蛋白酶和胃蛋白酶)（5）有多個功能區(qū)：結(jié)合抗原（Fab）,結(jié)合補體 （Fc-CH2）,結(jié)合細胞（Fc-CH3，CH4）。,,,5.抗體的構(gòu)象未結(jié)合抗原→T型；結(jié)合抗原→Y型。6.人體抗體的類型根據(jù)重鏈的血清學類型、相對分子量和糖含量的不同。IgG，IgA（母乳中），IgM，IgD，IgE 。IgG能通過胎盤。,7.抗體的作用與抗原特異結(jié)合參與激活補體結(jié)合細胞的F

20、c受體通過胎盤和粘膜,8.TD抗體生成原理 APC細胞加工抗原→T細胞活化，分泌淋巴因子→B細胞活化→產(chǎn)抗體。,9.抗體形成的一般規(guī)律（1）初次應答潛伏期(疫苗5-7天,類毒素2-3周)后，產(chǎn)抗體。IgM，量少, 時間短。（2）二次應答（與記憶性B細胞有關）再次注射，量升高。IgG為主，量多，時間長。,（3）規(guī)律的應用需采用二次或多次接入疫苗→獲得免疫力；多次注射抗原（牛馬等）→制備抗體；根據(jù)抗體出現(xiàn)的種類，做出

21、早期快速診斷。,10.單克隆抗體與淋巴雜交瘤技術（1）單克隆抗體(monoclonal antibody,McAb) 成分和特異性較單一，由純系B細胞經(jīng)分化、增殖成漿細胞后產(chǎn)生的。,（2）淋巴細胞雜交瘤技術①骨髓瘤細胞（癌變的漿細胞，HGPRT-或TK-）,HAT培養(yǎng)基（次黃嘌呤-氨基蝶呤-胸苷培養(yǎng)基），B細胞。氨基蝶呤是葉酸拮抗劑。②營養(yǎng)缺陷型理論基礎細胞合成DNA主途徑：由糖和氨基酸合成核苷酸，葉酸為輔酶；輔助途徑：利

22、用次黃嘌呤和胸腺嘧啶核苷，經(jīng)次黃嘌呤磷酸核糖轉(zhuǎn)化酶（HGPRT）和胸腺嘧啶核苷激酶（TK）的催化作用合成DNA。,（3）應用基礎研究：為免疫球蛋白的結(jié)構(gòu)、生物合成機制、代謝調(diào)控等提供材料。實踐應用：免疫磁珠（吸附細胞，特異生物分子如核酸、多糖等，用于分離純化）、提純抗原、診斷疾病、抗病毒治療劑，制備藥物導彈。,第四節(jié) 免疫學反應及其應用,一、反應的規(guī)律二、主要反應類型三、免疫標記技術,一、反應的規(guī)律1.特異性2.可逆性3

23、.定比性4.階段性：①時間短（數(shù)秒），不可見；②時間長（數(shù)分鐘到數(shù)小時），可見。5.條件依賴性：pH6-8，37-45℃，生理鹽水。,二、抗原抗體間的主要反應1.凝集反應（經(jīng)典方法） 顆粒性抗原（如細菌）+抗體→凝集成團，有直接凝集和間接凝集→病菌診斷和鑒定，抗體檢測。,2.沉淀試驗（1）經(jīng)典方法（試管或凹玻片中） 環(huán)狀沉淀反應：試管中先加已知抗體，再加抗原→界面上白色沉淀環(huán)→用于抗原定性檢測，如血跡鑒定，食品中肉類鑒定；

24、絮狀沉淀：用于診斷梅毒或抗毒素的測定。,沉淀環(huán)面積與抗原濃度成正比→抗原的定量檢測。,① 單向瓊脂擴散法,（2）現(xiàn)代方法,② 雙向瓊脂擴散法(double immunodiffusion):常用于定性檢測，分析抗原，不適合定量測定。,3.補體結(jié)合試驗 靈敏度較高，測定樣品中是否有抗原或抗體。（1）組成 ①檢測系統(tǒng):已知Ag(或Ab)+待測Ab(或Ag) ②指示系統(tǒng): 綿羊紅細胞+溶血素(綿羊紅細胞的特異性抗體) 補

25、體: 取自豚鼠的新鮮血清。,（2）原理補體可與任何抗原抗體復合物結(jié)合游離補體遇到抗原抗體復合物，具有溶解細胞作用。,三、免疫標記技術,用熒光素、酶、放射性同位素等，將抗原或抗體等加以標記，以提高反應靈敏度。,（一）免疫熒光技術 用熒光物標記抗原或抗體，熒光鏡檢測。,（二）、免疫酶技術 酶標記抗體或抗原→加底物→根據(jù)顯色反應來測定抗原或抗體的存在。,1.直接法（1） 檢測抗原：待測樣品(Ag)固定滴定板上?加酶標抗體，洗滌?

26、加入底物，測反應強度。,（2） 檢測抗體：待測樣品（抗體）固定滴定板上?加入酶標抗原，洗滌?加入底物，測反應強度。2.雙抗體夾心法：定量測定抗原。3.間接免疫吸附測定法（測抗體量）,人工免疫中，用來預防、治療和診斷用的，來自生物的各種制劑，統(tǒng)稱為生物制品。一、自動免疫類-疫苗 接種抗原，刺激機體產(chǎn)生疫苗，維持時間長。1.疫苗分類（1）活疫苗：減毒或微毒，不穩(wěn)定，只需一次接種，如卡介苗、鼻腔噴霧H1N1流感疫苗。（2）死疫苗

27、：需多次接種+佐劑，如霍亂、傷寒、肌肉注射H1N1流感疫苗、狂犬疫苗。,第五節(jié) 生物制品,2.自身疫苗 從病人病灶中分離的病原體制成的死疫苗(治療抗生素難治療的感染），如金葡球菌引起的慢性化膿。3.亞單位疫苗（新） 處理病原體，只保留免疫原成分（不含有核酸）的疫苗。如乙肝表面抗原、E.coli菌毛等。4.化學疫苗（新） 提取微生物體有效免疫原，如肺炎鏈球菌莢膜多糖。,5.基因疫苗（新） 編碼抗原的基因?qū)胭|(zhì)粒上，注

28、射人體細胞內(nèi)→表達抗原→獲免疫力。如流感病毒核蛋白、丙肝病毒核心抗原基因疫苗。需注入大量DNA才能發(fā)揮作用。6.抗獨特型抗體疫苗（新） 抗體作為抗原，刺激產(chǎn)生抗抗體，可克服抗原不易獲得，病原物抗原性較弱等缺點，如抗寄生蟲疫苗。7.多價疫苗（新） 來源于多種病菌，制成的疫苗。,二、被動免疫類（一）、免疫治療劑1.抗毒素：蛇毒抗血清、破傷風抗毒素、白喉抗毒素，用于緊急預防和治療。2.病毒抗血清：乙型腦炎、狂犬病毒，用于治療

29、無藥物可以治療的感染。3.球蛋白：從血漿（IgG+IgM）或胎盤(IgG)中提取，治療麻疹、灰質(zhì)炎、甲肝。,（二）、免疫調(diào)節(jié)劑 增強T、B細胞的反應性和巨噬cell的吞噬能力，對免疫力正常的人無作用。1.轉(zhuǎn)移因子：核苷酸和多肽復合物，無免疫原性，從患病或正常人淋巴細胞中提取，增強細胞免疫。2.白細胞介素：如IL-1（巨噬細胞產(chǎn)生）， IL-2（T細胞產(chǎn)生），促進T、B的活化和增殖，后者還能刺激和活化NK細胞。3.TC細胞:補

30、充體內(nèi)Tc細胞。,練習題1.名詞：類毒素、抗毒素、補體、干擾素、ADCC、APC、遲發(fā)型超敏反應、速發(fā)型超敏反應、抗原、抗原決定簇、抗體、單克隆抗體、自身抗原、超抗原、補體結(jié)合試驗、中和反應、組織相容性抗原、佐劑、抗原結(jié)合價、抗毒素、免疫調(diào)節(jié)劑、活疫苗、死疫苗、亞單位疫苗、基因疫苗、藥物導彈。2.免疫的三種功能是什么？3.非特異性免疫包括哪幾個方面。4.外毒素和內(nèi)毒素的不同點有哪些？5.為什么干擾素的抗病毒特性具有種屬特異性的