Ac-Ds-Enh轉(zhuǎn)座插入的棉花抗病突變體主要特性分析.pdf

1、本研究實(shí)驗(yàn)材料是經(jīng)過多代篩選形成的T4、T5代的不同抗病性棉花突變體，旨在通過對不同抗病性突變體的篩選及主要農(nóng)藝性狀的調(diào)查，找出綜合性狀優(yōu)良的高抗突變體植株，并通過對篩選的部分抗、耐株系的分子檢測(PCR及southern印記雜交)、主要生理和品質(zhì)指標(biāo)的測定，找出抗、耐株系的遺傳差異、生理差異及品質(zhì)差異。研究結(jié)果如下：
　　 1.T4代高抗轉(zhuǎn)基因株系農(nóng)藝性狀分析
　　 T4代高抗轉(zhuǎn)基因株系中，雖然它們之間的抗病能力基本相

2、當(dāng)，但它們的株高、單株果枝數(shù)、單株結(jié)鈴數(shù)各不相同，部分株系有極顯著差異，這說明抗病性和株高、單株果枝數(shù)、單株結(jié)鈴數(shù)沒有必然的聯(lián)系；同時(shí)，使用農(nóng)藝性狀較好的株系作為受體有利于得到綜合性狀良好的轉(zhuǎn)基因系；統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，約50％的轉(zhuǎn)基因后代的株高與受體相比具有極顯著差異，而轉(zhuǎn)基因后代的單株果枝數(shù)和單株結(jié)鈴數(shù)與受體之間存在極顯著差異的植株比例均為16.67％，可見，轉(zhuǎn)基因引起的棉花不同性狀的變異程度差異較大。
　　 2.T4、T5代高抗

3、和耐病轉(zhuǎn)基因株系分子檢測（PCR、southern印記雜交）分析
　　 在T4、T5代高抗和耐病轉(zhuǎn)基因株系中，大多數(shù)株系的Bar和NPTII基因的PCR擴(kuò)增陽性率都達(dá)到了50％以上；PCR擴(kuò)增中僅Bar基因?yàn)殛栃缘闹仓瓯壤秊?8.65％-23.54％，略高于水稻中報(bào)道的13％，同時(shí)1107轉(zhuǎn)基因后代中僅Bar基因?yàn)殛栃缘闹仓瓯壤哂?105轉(zhuǎn)基因系，并且T5代高于T4代，初步表明Bar和NPTII基因在T4、T5株系代中存在較為

4、穩(wěn)定，在T4代中能有效篩選具有穩(wěn)定遺傳特性的Ac、Ds分離株系。Southern印跡雜交結(jié)果表明，供試株系中外源Ds序列穩(wěn)定存在于棉花基因組DNA中。
　　 3.T5代高抗和耐病轉(zhuǎn)基因株系生理指標(biāo)分析
　　 蕾鈴期和伏桃期時(shí)，T5代高抗株系的葉綠素含量、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量均高于耐病株系，可能與高抗株系具有相對較高的光合能力有關(guān)；在不同發(fā)育時(shí)期轉(zhuǎn)基因株系的不同生理指標(biāo)的變化趨勢存在差異：從蕾鈴期到伏桃期，葉綠素含