基于dTph1轉(zhuǎn)座子的矮牽牛突變體庫創(chuàng)建及部分突變體遺傳規(guī)律初步分析.pdf

1、矮牽牛（Petunia hybrida）屬于茄科多年生作一年生栽培草本花卉，近年來逐漸成為當(dāng)前分子生物學(xué)研究的模式材料，具有重要的科研價(jià)值。在矮牽牛的功能基因組學(xué)研究中，創(chuàng)建基因的功能缺失突變體是研究目的基因功能的最直接和有效的途徑，轉(zhuǎn)座子插入誘變因?yàn)樵诨蚯贸暇哂袠O大的優(yōu)勢而受到了廣泛地運(yùn)用。矮牽牛dTph1轉(zhuǎn)座子因其較高的轉(zhuǎn)座活性常被用于構(gòu)建插入突變體庫，成為分離和克隆功能基因的重要工具之一。
　　本研究采用具有多拷貝、高活

2、性dTph1轉(zhuǎn)座子的矮牽牛W138株系為材料，通過多代自交創(chuàng)建較大規(guī)模的轉(zhuǎn)座子插入突變體庫，并對創(chuàng)建過程中發(fā)現(xiàn)的突變體進(jìn)行初步遺傳分析，為進(jìn)一步研究矮牽牛的功能基因組學(xué)提供材料和技術(shù)支持，主要研究結(jié)果如下：
　　1. dTph1轉(zhuǎn)座子插入突變體庫的構(gòu)建
　　通過多代連續(xù)自交，構(gòu)建了一個(gè)含223個(gè)家系共2482單株的矮牽牛W138群體，其中包含S2代8個(gè)家系共98株，S3代27個(gè)家系共360株，S4代136個(gè)家系共1450株，

3、S5代52個(gè)家系共574株。從獲得的群體中選擇1000株（每家系4-5株）構(gòu)建維度為10×10×10的突變體庫，同時(shí)自交獲得每個(gè)單株的種子，保存?zhèn)溆谩Ｄ壳?，已?64個(gè)家系共820個(gè)單株進(jìn)行自交留種，并采取葉片樣品提取高質(zhì)量DNA，初步建立了一個(gè)插入突變體DNA文庫，其中包括S2代5個(gè)家系25株，S3代12個(gè)家系60株，S4代104個(gè)家系520株，S5代43個(gè)家系215株。
　　2.相關(guān)突變體遺傳規(guī)律初步分析
　?。?）不開

4、花突變體：植株不開花，其花分生組織轉(zhuǎn)變?yōu)榛ㄐ蚍稚M織，表現(xiàn)為一個(gè)節(jié)上產(chǎn)生兩個(gè)花序分枝，如此循環(huán)。通過同一分離群體中正常植株和突變植株自交后代性狀表現(xiàn)，確定不開花性狀為單基因控制；研究中發(fā)現(xiàn)，突變株偶爾出現(xiàn)一定比例的回復(fù)突變，表明該突變體為轉(zhuǎn)座子插入突變。
　?。?）不育突變體：植株花瓣褶皺、葉片卷曲，突變體植株可以開花，但自交不能結(jié)實(shí)。
　?。?）裂瓣突變體：花冠不規(guī)則開裂，部分花萼花瓣化，花藥部分?jǐn)∮?。裂瓣植株的自交后代?/p>