三種鵝絨藤屬植物中苯乙酮類化合物的高速逆流色譜法分離(白首烏、牛皮消、徐長卿).pdf

1、白首烏(Cynanchum bungei Decne)，牛皮消(Cynanchum auriculatumRoyle ex Wight)和徐長卿(Cynanchum paniculatum Bunge)是三種常見的蘿藦科(Asclepiadaceae)鵝絨藤屬(Cynanchum)植物。三者藥用范圍廣泛，越來越成為天然藥物研究的的熱點(diǎn)。高速逆流色譜(high speed counter-currentchromatography，HSC

2、CC)是一種新的液液分配分離技術(shù)。它消除了對(duì)樣品的不可逆吸附和變性等影響，分離度高、重現(xiàn)性好、分離量大，尤其適用于植物成分等方面的分離和制備。 本文主要采用HSCCC或結(jié)合二氧化碳超臨界(CO2-SFE)萃取技術(shù)對(duì)三種植物的化學(xué)成分進(jìn)行提取分離研究。并用得到的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)對(duì)白首烏化學(xué)成分進(jìn)行了含量測(cè)定。此外還對(duì)牛皮消和白首烏的五種提取部位進(jìn)行了譜學(xué)對(duì)比分析，從化學(xué)成分角度解釋了二者的異同，為其開發(fā)應(yīng)用提供理論依據(jù)。 1.HS

3、CCC分離白首烏中的化學(xué)成分 溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2:3:3:3，v/v)，上相作為固定相，120min前的流動(dòng)相為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2:3:3:3，v/v)的下相，120min后的流動(dòng)相為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4:3:3，v/v)的下相，流速為1.7mL/min，檢測(cè)波長為254nm，轉(zhuǎn)數(shù)為850rmp/min，分離時(shí)間為270nun。從600mg白首烏的正丁醇提取物中分離出白首烏二苯酮6

4、2.3mg(1)，4-羥基苯乙酮18.9mg(2)，2，4-二羥基苯乙酮15.0mg(3)和2，4-二羥基苯乙酮4.5mg(4)，純度均在96％以上。 2.HPLC測(cè)定白首烏中四種苯乙酮的含量 色譜條件為色譜柱Symmetry-C18(4.6mm×250mm，5μm)，流動(dòng)相CH3OH-H2O(26:74，v/v)，流速1.0mL/min，測(cè)定溫度為30℃，PDA檢測(cè)器，化合物1、3、4檢測(cè)波長為280nm，化合物2檢測(cè)

5、波長為224nm，進(jìn)樣20μL。結(jié)果表明泰安栽培種白首烏中化合物1-4的含量分別為80.8μg/g、8.1μg/g、447.0μg/g、67.0μg/g。 3.白首烏和牛皮消的譜學(xué)對(duì)比分析 對(duì)牛皮消和白首烏的石油醚、氯仿、乙酸乙酯、甲醇、水等五個(gè)提取部位分別進(jìn)行紫外-可見光譜(UV-Vis)，傅里葉變換紅外光譜(FT-IR)及高效液相色譜(HPLC)分析。尋找二者在譜學(xué)上的異同。 在牛皮消和自首烏不同提取部位紫外

6、光譜對(duì)比分析中，相同濃度下，發(fā)現(xiàn)五個(gè)提取部位的紫外波譜形狀都很相近，只是在石油醚和水提取部位二者吸收強(qiáng)度有較大差別。 在牛皮消和白首烏不同提取部位紅外光譜對(duì)比分析中，石油醚、氯仿和水部位波譜形狀差別較大，尤其在2300cm-1-2400cm-1內(nèi)，以石油醚為提取溶劑時(shí)，白首烏有吸收，而牛皮消沒有吸收：以氯仿為提取溶劑時(shí)，牛皮消有吸收，而白首烏沒有吸收。 在牛皮消和白首烏不同提取部位液相色譜對(duì)比分析中，選擇了280nm和2

7、54nm檢測(cè)波長進(jìn)行比較。280nm時(shí)，牛皮消和白首烏中總共檢測(cè)到22個(gè)組分。在牛皮消中檢測(cè)出14個(gè)組分；檢測(cè)波長為254nm時(shí)，牛皮消和白首烏中總共檢測(cè)到26個(gè)組分。在牛皮消中檢測(cè)出21個(gè)組分，在白首烏中檢測(cè)出25個(gè)組分。通過液相色譜分析比較發(fā)現(xiàn)，牛皮消和白首烏所含主要成分的種類基本相同，但是不同類成分的含量有差異。 4.HSCCC分離牛皮消中的化學(xué)成分 溶劑系統(tǒng)為石油醚-乙酸乙酯-甲醇-水(4:9:6:6，vtv)，

8、上相為固定相，下相為流動(dòng)相，流速為1.8mL/min，檢測(cè)波長為280nm，轉(zhuǎn)數(shù)為900rmp/min，分離時(shí)間為300min。從牛皮消根的乙醇提取物400mg中分離得到白首烏二苯酮35.0mg，4-羥基苯乙酮10.2mg和2，4-二羥基苯乙酮8.3mg，純度均大于95％。 5.CO2-SFE-HSCCC分離徐長卿中的丹皮酚 CO2-SFE萃取采取進(jìn)行L9(3)4的正交試驗(yàn)優(yōu)化條件為：壓力為15Mpa，溫度為55℃，時(shí)