甜、糯玉米品種標(biāo)準(zhǔn)DNA指紋技術(shù)的研究及應(yīng)用.pdf

1、本文以165個(gè)甜、糯玉米雜交品種為材料，以普通玉米DNA指紋技術(shù)為基礎(chǔ)，探討了不同方法提取的甜、糯玉米DNA對(duì)指紋圖譜的影響，篩選出10對(duì)核心引物，構(gòu)建了甜、糯玉米品種標(biāo)準(zhǔn)DNA指紋數(shù)據(jù)庫(kù)，并首次對(duì)甜、糯玉米品種進(jìn)行了純度和真實(shí)性鑒定。主要結(jié)果如下： 1.建立了適合甜、糯玉米品種DNA分析的SSR技術(shù)體系。包括DNA提取(種子DNA、葉片DNA)，PCR擴(kuò)增體系(20μL反應(yīng)液中包括：11.4μLddH2O，2μL1×Buffe

2、r，2μL2.5 mmol/L MgCl2，0.4μL0.15 mmol/L dNTP，2μL0.25μmol/L SSR引物，0.2μL1U Taq DNA聚合酶，2μL DNA模板)，變性聚丙烯酰胺凝膠電泳、改進(jìn)的銀染顯色等。 2.引物篩選：從普通玉米的40對(duì)SSR核心引物中篩選出多態(tài)性豐富，帶型清晰，重復(fù)性好的核心引物，綜合考慮擴(kuò)增帶型統(tǒng)計(jì)的難易及引物的重復(fù)性高低，確定bnlg439、bnlg125、umc2105、phi

3、072、umc1705、bnlg161、bnlg1792、phi080、phi065、bnlg1450共10個(gè)引物對(duì)作為甜、糯玉米品種鑒定和指紋庫(kù)構(gòu)建的核心引物。 3.構(gòu)建我國(guó)甜、糯玉米品種的DNA指紋庫(kù)。按照甜、糯玉米的SSR技術(shù)體系，構(gòu)建了通過(guò)一致性和真實(shí)性檢測(cè)的甜、糯玉米共62個(gè)品種的DNA指紋庫(kù)。 4.利用SSR分子標(biāo)記技術(shù)進(jìn)行甜、糯玉米品種的純度檢測(cè)是可行的。純度檢測(cè)結(jié)果：2006年一致性差、較差的甜、糯玉米共