生物磁化水對金頂側(cè)耳液體發(fā)酵的影響

1、<p>　　生物磁化水對金頂側(cè)耳液體發(fā)酵的影響</p><p>　　摘要：在金頂側(cè)耳液體培養(yǎng)過程中采用4種不同磁處理水，對空白對照組和4個(gè)處理下的金頂側(cè)耳的菌絲生長情況及胞外酶活性進(jìn)行測定。結(jié)果表明金頂側(cè)耳液體培養(yǎng)中采用磁化水可促進(jìn)金頂側(cè)耳的胞外酶分泌，提高胞外酶活性，增加生物量，增加菌絲球數(shù)量，減小菌絲球體積。最佳磁處理水條件為30min處理組和60min處理組，其中對于羧甲基纖維素酶最佳處理組為30

2、min處理組，峰值比空白對照組高45.5%。而對于淀粉酶分泌最佳處理組為60min處理組，峰值早于空白對照組1d出現(xiàn)，而且比空白對照組高12.4%。 </p><p>　　關(guān)鍵詞：食用菌；酶活性 </p><p>　　中圖分類號(hào)：S646.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：1674-0432（2013）-01-0049-2 </p><p>　　金頂側(cè)耳[Pleurot

3、us citrinopileatus Sing.] 又名榆黃蘑、金頂蘑，隸屬于擔(dān)子菌門（Basidiomycota）、層菌綱（Hymenomycetes）、傘菌目（Agaricales）、口蘑科（Tricholomataceae）、側(cè)耳屬（Pleurotus）。是一種營養(yǎng)十分豐富的食藥用菌，富含氨基酸，經(jīng)常食用有利于病體康復(fù)。野生的金頂側(cè)耳主要分布在歐洲，東南亞，北美洲和中國的東北三省，河北廣州和西藏等地多發(fā)生于潮濕多雨的夏秋季節(jié)，主要

4、腐生于榆、楊、柳、櫟樹等闊葉樹木的立枯腐木上。[1-3]金頂側(cè)耳的人工馴化栽培始于20世紀(jì)70年代，由王柏松等人在中國東北長白山地區(qū)使用菇木菌絲分離方法獲得了金頂側(cè)耳的野生菌種。[4]自20世紀(jì)80年代起，吉林，黑龍江，山西，浙江等省已經(jīng)有大面積人工栽培。近年來，關(guān)于金頂側(cè)耳的研究不斷深入和擴(kuò)展，而關(guān)于生物磁化水處理金頂側(cè)耳的研究鮮有報(bào)道。磁化水處理可為農(nóng)作物增產(chǎn)、改善品質(zhì)提供新途徑。本研究測定了液體培養(yǎng)過程中生物磁化水對金頂側(cè)耳液體發(fā)

5、酵的影響，現(xiàn)將試驗(yàn)結(jié)果報(bào)道如下。 </p><p><b>　　1 材料與方法 </b></p><p>　　1.1 供試菌種和儀器 </p><p>　　菌種來源：分離自野生金頂側(cè)耳。 </p><p>　　磁化設(shè)備：自行設(shè)計(jì)生物磁處理設(shè)備。 </p><p>　　磁場強(qiáng)度：220mT。 <

6、;/p><p>　　1.2 液體培養(yǎng)基的配方 </p><p>　　馬鈴薯200g， 葡萄糖20g， MgSO41.0g， KH2PO32.0g，pH自然。 </p><p><b>　　1.3 試驗(yàn)處理 </b></p><p>　　本試驗(yàn)在金頂側(cè)耳液體發(fā)酵過程中使用不同磁化時(shí)長的磁化水，設(shè)計(jì)5個(gè)處理，分別為空白對照（CK

7、），15min，30min，45min，60min。每個(gè)處理設(shè)20次重復(fù)。 </p><p>　　1.4 液體菌種培養(yǎng) </p><p>　　將配制好的液體培養(yǎng)基分裝于150mL三角瓶中，每瓶裝入100mL。滅菌冷卻后， 于超凈工作臺(tái)上接入已經(jīng)純化的直徑為0.8cm，菌齡7d的平板菌種1片。然后將其放入（25±1）℃的恒溫培養(yǎng)箱中靜止24h， 再置入（25±1）℃，17

8、5r/ min恒溫振蕩搖床上振蕩培養(yǎng)14d。 </p><p>　　1.5 菌絲生物量的測定 </p><p>　　每處理分別取3瓶發(fā)酵液，將發(fā)酵液用濾紙過濾， 濾液備用。后放入65℃恒溫鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)干燥至恒重。用電子天平稱重、記錄。計(jì)算公式：菌絲生物量（g/100mL）=菌絲干重（g）/發(fā)酵液體積（mL） </p><p>　　1.6 菌絲球計(jì)數(shù) </p&g

9、t;<p>　　培養(yǎng)結(jié)束后，每個(gè)處理下取3瓶混勻進(jìn)行計(jì)數(shù)并取平均值。 </p><p>　　1.7 菌絲球直徑測定 </p><p>　　培養(yǎng)結(jié)束后，每個(gè)處理下分別取3瓶混勻，使用坐標(biāo)紙進(jìn)行直徑測定。 </p><p>　　1.8 粗酶液的制備 </p><p>　　取濾液于4℃，5000r/min轉(zhuǎn)速， 離心10min。取其上

10、清液備用即可。 </p><p>　　1.9 酶活力測定 </p><p>　　羧甲基纖維素酶活的測定[5]，淀粉酶活性測定[6，7]。 </p><p><b>　　2 結(jié)果與分析 </b></p><p>　　2.1 不同處理下每天菌絲球生長情況 </p><p>　　從表1可得，不同時(shí)長的磁

11、處理水對菌絲生長情況均有促進(jìn)，而且隨著磁化時(shí)長的增加，菌絲球數(shù)量、菌絲球重量和生物量均增加，而菌絲球直徑呈遞減變化。磁化處理60min效果最佳，菌絲球數(shù)量比對照組高374%，菌絲球重量比對照組高264%，菌絲球直徑減少78%，生物量積累比對照組高374%。 </p><p>　　2.2 不同處理下對羧甲基纖維素酶分泌的影響 </p><p>　　從表2可得，在金頂側(cè)耳整個(gè)液體發(fā)酵過程中，5

12、種處理的金頂側(cè)耳纖維素酶活力變化總體趨勢基本保持一致。纖維素酶活性在液體培養(yǎng)初期較低，呈逐漸升高趨勢，到9d后呈下降趨勢。30min處理組的羧甲基纖維素酶分泌量變化比其他處理組增幅大，峰值比CK組高83.7%，而且下降緩慢。其次為60min處理組和45min處理組，前者分泌量下降趨勢緩于后者。 </p><p>　　2.3 不同處理下對淀粉酶分泌的影響 </p><p>　　淀粉酶是降解淀

13、粉的重要催化劑， 淀粉在淀粉酶的作用下降解為低聚糖， 可直接為菌絲吸收。淀粉酶活力的大小與菌絲前期的生長速度有著密切的關(guān)系。由表3可知，在金頂側(cè)耳液體培養(yǎng)過程中，不同時(shí)長的磁化處理水均對金頂側(cè)耳淀粉酶的分泌有促進(jìn)作用，60min處理組為最優(yōu)選擇，具體體現(xiàn)為：淀粉酶分泌量大，增幅高，且峰值提前一天出現(xiàn)，峰值出現(xiàn)后下降趨勢緩慢，最低值也高于其他處理組。 </p><p><b>　　3 結(jié)論 </b&

14、gt;</p><p>　　綜上所述，本研究結(jié)果表明：金頂側(cè)耳液體培養(yǎng)中采用磁化水可提高金頂側(cè)耳的胞外酶分泌量及活性，增加生物量，增加菌絲球數(shù)量減小菌絲球體積。最佳磁處理水條件為30min處理組和60min處理組，這兩種處理下的金頂側(cè)耳胞外酶活性均明顯增強(qiáng)。其中對于羧甲基纖維素酶最佳處理組為30min處理組，峰值比空白對照組高45.5%。而對于淀粉酶分泌最佳處理組為60min處理組，峰值早于空白對照組1d出現(xiàn)，而

15、且比空白對照組高12.4%。 </p><p><b>　　參考文獻(xiàn) </b></p><p>　　[1] 圖力古爾，李玉.我國側(cè)耳屬真菌的種類資源及其生態(tài)地理分布[J].中國食用菌，2001，20（5）：829. </p><p>　　[2] 上海農(nóng)業(yè)科學(xué)院.中國食用菌志[M].北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：22. </p>

16、<p>　　[3] 黃年來.中國大型真菌原色圖鑒[M].北京：中國農(nóng)業(yè)出版社，1998：94. </p><p>　　[4] 王柏松，江日仁.金頂側(cè)耳的生物學(xué)特性觀察[J].食用菌，1988，10（3）：6. </p><p>　　[5] 劉德海，揚(yáng)玉華，安明理，等.纖維素酶酶活的測定方法[J].中國飼料，2002，（17）：27-28. </p><p>

17、;　　[6] 周景祥，王佳芹，余濤.蛋白酶和淀粉酶活性檢測方法探討[J].山東飼料，2002，（5）：22-23. </p><p>　　[7] 張鳳芹.不同糖類對雞腿菇胞外酶活性及多糖分泌的影響[J].食用菌，1999，21（4）：5-6. </p><p>　　作者簡介：趙海寧（1987-），女，錫伯族，吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院在讀研究生，研究方向：植物病理；劉淑艷（1970-），女，漢族，