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文檔簡介
1、有效霉素又名井岡霉素,是一種由吸水鏈霉菌產(chǎn)生的得到廣泛應用的重要抗真菌病害農(nóng)用抗生素。發(fā)酵溫度是影響發(fā)酵過程的一種重要因素,但是有關發(fā)酵溫度對抗生素發(fā)酵過程中基因和酶層次的研究十分有限。本研究以吸水鏈霉菌5008發(fā)酵有效霉素為例,詳細考察了在不同溫度發(fā)酵產(chǎn)生有效霉素A的過程,發(fā)現(xiàn)發(fā)酵溫度在35oC與37oC之間產(chǎn)量存在溫度響應閾值。當高于溫度閾值時,發(fā)酵產(chǎn)量顯著高于較低溫度的發(fā)酵產(chǎn)量,同時發(fā)酵的早期蛋白合成和糖消耗速率高。本研究進一步利
2、用qRT-PCR測定了不同發(fā)酵溫度下發(fā)酵前期,中期和后期三個階段的樣品中有效霉素A生物合成必需的8個基因所在的3個操縱子轉(zhuǎn)錄水平。研究發(fā)現(xiàn)在閾值溫度下valABC, valKLMN和valG轉(zhuǎn)錄水平迅速提高,其中valKLMN最為顯著。同時磷酸戊糖途徑中的6-磷酸葡萄糖脫氫酶和有效霉素生物合成ValG酶活性測定表明,較高發(fā)酵溫度下細胞在發(fā)酵前期6-磷酸葡萄糖脫氫酶和ValG都具有更高的酶活。論文還通過黃色熒光蛋白原位跟蹤溫度對valG表
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