瓜類細菌性果斑病菌tvrR基因的克隆及功能研究.pdf

1、燕麥嗜酸菌西瓜亞種（Acidovorax avenae subsp.citrulli，Aac）引起的細菌性果斑病是瓜類生產上的一種嚴重的病害，主要危害西、甜瓜的葉片和果實，產生大量病斑并造成果實腐爛，常造成毀滅性的后果。近年來，瓜類細菌性果斑病在我國新疆、內蒙古、海南、吉林、寧夏等地嚴重發(fā)生，并有上升趨勢，對我國甜瓜、西瓜及其他葫蘆科作物的生產構成了嚴重的威脅，已經成為阻礙和限制瓜類作物進一步發(fā)展的首要障礙，尤其是在以西瓜、哈密瓜為重要

2、經濟作物的新疆地區(qū)。因此，需要我們盡快找到相應的防治措施，而對瓜類細菌性果斑病菌致病機理的研究則對該病害的防治具有重要的指導意義。
　　 目前，對瓜類細菌性果斑病菌的研究主要集中在病原菌鑒定、病原菌檢測方法和技術、抗病品種的鑒定等方面。本課題組首次從果斑病菌中鑒定到了酰基高絲氨酸內酯類化合物（acyl-homoserine lactones，簡稱AHLs）介導的群體感應（quorum sensing，簡稱QS）調節(jié)系統(tǒng)，并初步明

3、確了該系統(tǒng)對病原菌致病性的影響。然而，對果斑病菌致病的分子機理仍然知之甚少。
　　 本研究根據丁香假單胞菌番茄致病變種（Pseudomonas syringae pv.tomato）DC3000中新的毒性基因tvrR（TetR-like virulence regulator）的序列，利用生物信息學知識，從瓜類細菌性果斑病菌（A.avenae subsp.citrulli，Aac）的全基因組中克隆到tvrR基因的同源物。通過同源

4、重組的方法，構建了tvrR基因的插入突變體，并且經過PCR及Southern雜交驗證確認。對胞外多糖的產量、菌體游動性和25％葡萄糖的趨化應答能力檢測發(fā)現，突變體的胞外多糖產量、游動性和趨化能力與野生型菌株相比沒有明顯差異。煙草過敏反應檢測顯示，突變體和野生型菌株一樣可以激發(fā)非寄主的過敏性反應。致病性試驗結果顯示，突變體比野生型菌株發(fā)病晚，病程延長，但最終致病情況與野生型無差異。接種的寄主組織中菌體生長能力檢測發(fā)現，突變體的繁殖速度慢于