天然產(chǎn)物化學(xué)課程論文-香椿葉中槲皮素的提取分離與鑒定

1、<p>　　香椿葉中槲皮素的提取分離與測定</p><p><b>　　摘 要</b></p><p>　　本文主要介紹了槲皮素的結(jié)構(gòu)和各種物化性質(zhì)及其藥理作用，繼而對槲皮素的提取分離方法進行綜述，還敘述了黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)鑒定方法。后續(xù)提出實驗方案，對香椿葉中槲皮素的提取分離以及測定方法進行了研究，用萃取的方法從香椿葉中提取黃酮類化合物，然后再運用聚酰胺色

2、譜柱法分離出槲皮素。接著對分離出的物質(zhì)測定與結(jié)構(gòu)鑒定。</p><p>　　關(guān)鍵詞 ：槲皮素；紫外光譜；超聲提取法；香椿葉；萃?。痪埘０飞V法</p><p><b>　　Abstract</b></p><p>　　This article mainly introduced the structure and various physica

3、l and chemical properties of quercetin and its pharmacological action, then for extraction and separation methods of quercetin were summarized, also describes the structure identification methods of flavonoids. Subsequen

4、t experiment scheme is put forward, the cedrela sinensis leaves in the extraction and separation of quercetin and determination method were studied, with the extraction method to extract flavonoid compounds from cedr<

5、/p><p>　　Keywords：Quercetin；ultraviolet spectrum；ultrasonic extraction；cedar leaf；extraction；polyamide column chromatography</p><p><b>　　1. 文獻綜述</b></p><p>　　1.1 槲皮素結(jié)構(gòu)及物化性質(zhì)

6、</p><p>　　槲皮素是一種多羥基黃酮類化合物，化學(xué)名為3，3’，4’，5， 7- 五羥基黃酮，具有多種生物學(xué)活性及很高的藥用價值。槲皮素廣泛存在于植物的花、葉、果實中，已知有 100 多種中草藥中含有槲皮素，如槐米、槐花、 </p><p><b>　　圖1</b></p><p>　　

7、丹皮、香椿葉、菊花、田基黃、車前子、桑寄生、仙鶴草、杠板歸、絞股藍、山</p><p>　　楂、貫葉連翹、菟絲子、銀杏葉、刺五加、白花蛇舌草、雞冠花、魚腥草、余甘子、三白草、番石榴葉、蜜柑草、紫花地丁、垂盆草等。</p><p>　　槲皮素，又名櫟精，槲皮黃素，溶于冰醋酸，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。二水合物為黃色針狀結(jié)晶（稀乙醇），在95-97°C成為無水物

8、，熔點314°C（分解）。能溶于冷乙醇（1:290），易溶于熱乙醇（1:23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等，不溶于水、苯、乙醚、氯仿、石油醚等，堿性水溶液呈黃色，幾乎不溶于水，乙醇溶液味很苦。黃色針狀結(jié)晶, 槲皮素屬黃酮類化合物，多以甙的形式存在，經(jīng)酸水解可得到槲皮素?？勺鳛樗幤?，具有較好的祛痰、止咳作用，并有一定的平喘作用。櫟精為五羥黃酮，其分子中2、3位間有雙鍵，37、47位處有2個羥基故具有能作為金屬螯合

9、作用或油脂等氧化過程中產(chǎn)生的游離基團接受體的功能，可作為油脂、抗壞血酸的抗氧化劑。此外還有降低血壓、增強毛細血管抵抗力、減少毛細血管脆性、降血脂、擴張冠狀動脈，增加冠脈血流量等作用。用于治療慢性支氣管炎。對冠心病及高血壓患者也有輔助治療作用。</p><p>　　1.2槲皮素等中藥的基本提取方法與原理</p><p>　　用于中藥有效成分的提取方法主要是溶劑提取法,溶劑提取法是指利用溶劑對

10、中藥不同成分的溶解性差異,將有效成分提取出來,對不需要的成分盡量少的溶解,從而將有效成分從藥材組織內(nèi)溶解出來的方法?，F(xiàn)今中藥中大部分的有效成分,均可以采用溶劑提取法來進行提取。</p><p>　　溶劑提取法的原理很簡單。將中藥浸泡于溶劑中,溶劑通過擴散和滲透作用進入到藥物的細胞內(nèi),將可溶性物質(zhì)溶解。此時細胞內(nèi)外形成了目標(biāo)成分的濃度差,于是目標(biāo)成分在細胞內(nèi)外間不斷交換,直至細胞內(nèi)外濃度達到動態(tài)平衡。將此溶液濾出,

11、繼續(xù)多次加入新的溶劑,就可以把所需要的成分近于完全溶出或大部溶出。傳統(tǒng)的溶劑提取法包括煎煮法、浸漬法、滲流法、回流法、連續(xù)回流提取法、升華法等'。但傳統(tǒng)的溶劑提取法工藝復(fù)雜、流程長,具有許多固有的缺點。下面分別介紹一下傳統(tǒng)的溶劑提取方法及其優(yōu)缺點。</p><p>　　煎煮法,是將經(jīng)過處理的藥材,加入適量水加熱煮沸次,使其有效成分煎出,這也是一種簡便、常用的方法。該法能煎出大部分有效成分,但煎出液雜質(zhì)較多

12、,容易霉變、腐敗,并且一些不耐熱或揮發(fā)性成分在煎煮過程中易被破壞、揮發(fā)而損失。</p><p>　　浸漬法,是最常見的簡便浸出方法。除特別規(guī)定外,浸漬法一般在常溫下進行。其最適用于有效成分遇熱揮發(fā)或易被破壞的藥材。缺點是操作時間長,且往往不易完全浸出有效成分。</p><p>　　滲渡法,是用流動的溶劑滲過藥粉而進行提取。由于隨時保持相對大的濃度差,故提取效率高,浸出液比較澄清,缺點是溶劑

13、消耗量太大,費時,且操作較為麻煩。</p><p>　　回流法,是在應(yīng)用乙醇等易揮發(fā)有機溶劑時,為減少溶劑消耗,提高效率而采用的方法。在回流時要加熱,故對受熱易破壞成分不適用,且溶劑消耗量仍大,操作較麻煩。</p><p>　　連續(xù)回流法,又稱索氏提取法。索氏提取器由冷凝器、燒瓶以及帶有虹吸管的提取器這三部分組成。此種方法克服了簡單回流法提取時溶劑量大、操作繁瑣的缺點,但仍需較長時間加熱,

14、對受熱易破壞的成分不適用。</p><p>　　升華法,是利用中藥中有些成分具有升華的性質(zhì),直接對固體加熱,將可升華的成分氣化,氣體遇冷又凝固為固體,從而達到提取的目的。但此種方法僅限具有升華性質(zhì)的某些成分使用,并且在升華過程中常伴有揮發(fā)性焦油狀物產(chǎn)生,并粘附在升華物上,不易除去。</p><p>　　近年來,一些新的提取分離技術(shù)己開始引入中藥有效成分提取的研究中。這些新方法、新技術(shù)包括超

15、聲提取法、超臨界流體提取法、微波輔助提取法、半仿生提取法、酶法、反膠團溶劑提取法、雙水相提取技術(shù)、空氣爆破法、破碎提取法和液泛法等。許多研究結(jié)果表明,與傳統(tǒng)方法相比,這些技術(shù)有產(chǎn)率高、純度高、速度快、物耗能耗少等特點,有著廣闊的研究和應(yīng)用前景。本節(jié)將對超聲提取法和超高壓提取法進行較深入的介紹。</p><p><b>　　1.3微波提取法</b></p><p>　　

16、微波技術(shù)在人們的生產(chǎn)生活中應(yīng)用越來越廣泛，此法在黃酮類物質(zhì)的提取上也取得了良好的效果。它的原理是利用磁控管所產(chǎn)生的每秒24．5億次超高頻率的快速震動，使藥材內(nèi)分子間相互碰撞、擠壓，這樣有利于藥材有效成份的浸出。龔盛昭等用微波協(xié)同提取槐米中蘆丁的研究表明，協(xié)同提取10 min，其提取率94．1％。在銀杏葉中提取黃酮，用60％乙醇溶液做萃取溶劑，僅僅用微波處理15 min，用70℃水浴浸提1 h便可與70℃水裕

17、浸提4h的黃酮得率相當(dāng)，這大大地降低了成本和時間。微波在提取過程中具有反應(yīng)高效性和強選擇性等特點，而且操作簡便，副產(chǎn)物少，產(chǎn)率高及產(chǎn)物易提純等優(yōu)點；并且浸出過程中藥材細粉不凝聚，不糊化，克服了熱水法易凝聚易糊化的不足。但微波技術(shù)不適于熱敏性物質(zhì)的提取，而且高頻電場和微波輻射對人體機能有不利影響，使用時應(yīng)防止微波泄露，注意加強安全防護措施。此外微波提取是否會影響藥物的穩(wěn)定性、及療效等尚需深入研究和探討。</p><p&

18、gt;<b>　　1.4超聲提取法</b></p><p>　　中藥中許多有效化學(xué)成分為細胞內(nèi)成分,提取時需要破碎細胞壁或細胞膜,而現(xiàn)有的化學(xué)和機械方法破碎細胞往往很難起到理想的破碎效果,從而影響提取結(jié)果。超聲提取法因其獨特的提取機制與理想的提取效果,在中藥化學(xué)成分的提取中已經(jīng)顯示出了明顯的優(yōu)勢。超聲提取法一是近年來應(yīng)用于中藥有效成分提取分離中的一種手段。</p><p&

19、gt;　　1.4.1超聲提取法的原理</p><p>　　超聲波是一種高頻率的機械波,一般其頻率高于。現(xiàn)普遍認為超聲技術(shù)空化效應(yīng)、熱效應(yīng)和機械作用是其在中藥提取中的三大理論依據(jù)。</p><p>　　空化作用。液體中存在一些真空的或含有少量氣體或蒸汽的小氣泡,當(dāng)一定頻率的超聲波作用于液體時,尺寸適宜的小泡便能發(fā)生共振現(xiàn)象,大于共振尺寸的小泡被趕出液體,而小于共振尺寸的小泡在超聲作用下會逐漸

20、變大。小泡長大到接近共振尺寸時,聲波的稀疏階段使小泡迅速脹大,在聲波的壓縮階段,小泡又突然被絕熱壓縮,直至湮滅。湮滅過程中,小泡內(nèi)部溫度可達幾千度,壓力可達幾千個大氣壓,上述現(xiàn)象稱為空化現(xiàn)象?？栈饔帽挥糜谇逑础㈧F化、乳化及加速化學(xué)反應(yīng)速度等方面。</p><p>　　熱效應(yīng)。熱效應(yīng)是指由于介質(zhì)吸收超聲波以及內(nèi)摩擦消耗,分子產(chǎn)生劇烈振動,超聲波的機械能轉(zhuǎn)化為介質(zhì)的內(nèi)能,引起介質(zhì)溫度升高。超聲波的強度愈大,產(chǎn)生的熱

21、作用愈強。在提取中,控制超聲強度,可使藥物組織內(nèi)部的溫度瞬間升高,加速有效成分的溶出,并且不改變其性質(zhì)。</p><p>　　機械作用。超聲波是機械波,可在液體中形成有效的攪動與流動,破壞介質(zhì)的結(jié)構(gòu),擊碎液體中的顆粒,其效果是普通低頻機械攪動所達不到的'“。機械作用常用于擊碎、切割、凝集等方面。超聲波可以使常溫常壓不能發(fā)生的化學(xué)反應(yīng)在空化作用下發(fā)生,甚至使非常堅硬的固體被粉碎?？刂埔欢ǖ某曨l率和強度,空

22、化作用產(chǎn)生的極大壓力造成生物細胞壁及整個生物體破裂,而且整個破碎過程在瞬間完成,同時超聲波產(chǎn)生的振動作用加強了胞內(nèi)物質(zhì)的釋放、擴散及溶解。被浸提的物質(zhì)在被破碎瞬間生物活性保持不變,同時提高破碎速度和提取率。</p><p><b>　　1.5超高壓提取法</b></p><p>　　超高壓技術(shù)是一種新興技術(shù),廣泛用于食品加工,達到滅菌、滅酶、改變生物大分子結(jié)構(gòu)的目的張

23、守勤等在國際上率先開展了超高壓提取中藥有效成分的研究,為天然藥物有效成分的提取提供了一種新技術(shù)、新工藝。</p><p>　　超高壓提取法的基本原理。超高壓提取,也稱超高冷等靜壓提取,它是在常溫下用一的液體靜壓力作用于藥液上,使提取溶劑滲透到藥物細胞內(nèi),在預(yù)定壓力下保持一段時間使有效成分達到溶解平衡后迅速卸壓,由于細胞內(nèi)外滲透壓力差突然增大,細胞內(nèi)的有效成分轉(zhuǎn)移到細胞外的提取液中,于是達到了提取有效成分的目的。&

24、lt;/p><p>　　1.6槲皮素等黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)測定與含量分析</p><p>　　隨著對黃酮類化合物的深入研究和不斷開發(fā)利用，其分析方法近年來也得到了迅速的發(fā)展。分析對象有天然產(chǎn)物(如中草藥、水果、蔬菜)及其加工制品(如藥品、功能食品)、人體液(如血液、尿液)。分析方法有分光光度法，熒光法、極譜法、庫侖測定法、離子選擇電極法、薄層色譜法、薄層掃描法、氣相色譜法以及近年來發(fā)展迅速的結(jié)合

25、紫外檢測、熒光檢測、電化學(xué)檢測的高效液相色譜法，高效毛細管電泳法和色譜新技術(shù)，如超臨界液體色譜、色譜和質(zhì)譜聯(lián)用。其中液相色譜是從20世紀(jì)70年代被應(yīng)用于黃酮類化合物的分析和鑒定，也是唯一的可以分離鑒定6大類黃酮物質(zhì)的分析系統(tǒng)，同時黃酮類作為重要的天然產(chǎn)物也成為現(xiàn)代HPLC最早分析的樣品之一。 </p><p>　　錢秋霞等用高效液相色譜法以水一乙睛一磷酸為流動相分離測定不同干燥方法的貫葉連翹中黃酮類化合物的含量，

26、檢測在60℃烘干4h時測得的蘆丁和金絲桃昔的含量最高。楊潔等對血漿中蘆丁和棚皮素的HPLC檢測方法及其在大鼠體內(nèi)的藥物動力學(xué)進行研究，其藥效主要是由于蘆丁、棚皮素在腸內(nèi)酶和細菌叢的作用下發(fā)生代謝和分解作用，而進入血漿中的為其代謝產(chǎn)物所致。該結(jié)果表明，蘆丁和棚皮素同時給藥有協(xié)同作用，使棚皮素藥效增加，蘆丁消除減慢，此結(jié)果對中藥單方、復(fù)方給藥劑量方面有參考價值。從中也可以發(fā)現(xiàn)研究食品及中藥中黃酮類化合物原型成分的必要性。</p>

27、<p>　　1.6.1紫外吸收光譜在黃酮類結(jié)構(gòu)測定方面的應(yīng)用</p><p>　　大多數(shù)黃酮類化合物在甲醇中的紫外吸收光譜由兩個主要吸收帶組成。出現(xiàn)在300～400nm之間的吸收帶稱為帶Ⅰ，出現(xiàn)在240～280nm之間的吸收帶稱為帶Ⅱ。不同類型的黃酮化合物的帶Ⅰ或帶Ⅱ的峰位、峰形和吸收強度不同，因此從紫外光譜可以推測黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)類型?！?lt;/p><p><b>

28、;　　表1</b></p><p>　　當(dāng)向黃酮類化合物的甲醇（或乙醇）溶液中分別加入甲醇鈉（NaOMe）、乙酸鈉（NaOAc）、乙酸鈉-硼酸（NaOAc-H3BO3）、三氯化鋁或三氯化鋁-鹽酸（AlCl3/HCl）試劑能使黃酮的酚羥基離解或形成絡(luò)合物等，導(dǎo)致光譜發(fā)生變化。據(jù)此變化可以判斷各類化合物的結(jié)構(gòu)，這些試劑對結(jié)構(gòu)具有診斷意義，稱為診斷試劑。</p><p>　?。ㄒ唬S

29、酮、黃酮醇類在甲醇中的UV光譜特征</p><p>　　黃酮或黃酮醇的帶Ⅰ是由B環(huán)桂皮酰基系統(tǒng)的電子躍遷所引起的吸收，帶Ⅱ是由A環(huán)的苯甲酰基系統(tǒng)的電子躍遷所引起的吸收。</p><p>　　黃酮和黃酮醇的UV光譜圖形相似，僅帶Ⅰ位置不同，黃酮帶Ⅰ位于304～350nm，黃酮醇帶Ⅰ位于358～385nm。利用帶Ⅰ的峰位不同，可以區(qū)別這兩類化合物。</p><p>　　

30、黃酮、黃酮醇的B環(huán)或A環(huán)上取代基的性質(zhì)和位置不同將影響帶Ⅰ或帶Ⅱ的峰位和形狀。例如，7和4＇位引入羥基、甲氧基等含氧取代基，可引起相應(yīng)吸收帶向紅位移。又如3-或5-位引入羥基，因能與C4＝O形成氫鍵締合，前者使帶Ⅰ向紅位移，后者使帶Ⅰ、帶Ⅱ均向紅位移。B環(huán)上的含氧取代基逐漸增加時，帶Ⅰ向紅位移值（nm）也逐漸增加，但不能使帶Ⅱ產(chǎn)生位移。有時（例如3＇，4＇-位有2個羥基或2個甲氧基或亞甲二氧基）僅可能影響帶Ⅱ的形狀，使帶Ⅱ歧分為雙峰或1

31、個主峰（Ⅱb位于短波處）和1個肩峰（sh）或彎曲（Ⅱa位于長波處）。</p><p>　　A環(huán)上的含氧取代基增加時，使帶Ⅱ向紅位移，而對帶Ⅰ無影響，或影響甚微（但5-羥基例外）。</p><p>　　黃酮或黃酮醇的3-，5-或4＇-羥基被甲基化或苷化后，可使帶Ⅰ向紫位移，3-OH甲基化或苷化使帶Ⅰ（328～357nm）與黃酮的帶Ⅰ的波長范圍重疊（且光譜曲線的形狀也相似），5-OH甲基化使帶

32、Ⅰ和帶Ⅱ都向紫位移5～15nm，4＇-OH甲基化或苷化，使帶Ⅰ向紫位移3～10nm。其他位置上的羥基取代對甲醇中的紫外光譜幾乎沒有影響。</p><p>　?。ǘ├迷\斷試劑對黃酮、黃酮醇類化合物UV光譜的影響檢出羥基位置</p><p>　　1．甲醇鈉（NaOMe），主要是判斷是否有4＇-OH，3、4＇－二OH或3、3＇、4＇－三OH。</p><p>　　2．

33、乙酸鈉，較為突出的是判斷是否有7-OH?！才e例說明〕</p><p>　　3．乙酸鈉/硼酸　主要判斷A環(huán)或B環(huán)是否有鄰二酚羥基（5，6-二OH除外）。</p><p>　　4．三氯化鋁及三氯化鋁/鹽酸，為判斷有無鄰二酚羥基，3-OH、5-OH提供信息。</p><p>　?。ㄈ┊慄S酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類在甲醇中的UV光譜特征</p><p&

34、gt;　　這三類化合物都有苯甲酰系統(tǒng)，而無桂皮酰結(jié)構(gòu)，所以它們的紫外光譜都有強的帶Ⅱ吸收，異黃酮帶Ⅱ吸收在245～270nm，而二氫黃酮和二氫黃酮醇的帶Ⅱ在270～295nm，一般只受A環(huán)的含氧取代基的影響，A環(huán)含氧取代基數(shù)增加，吸收峰向紅位移。</p><p>　?。ㄋ模├迷\斷試劑對異黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類化合物的UV光譜的影響判斷羥基位置 </p><p><b>　

35、　1．甲醇鈉</b></p><p>　?、賻Б蛳蚣t位移，示A環(huán)上有羥基。</p><p>　　②如有5，6，7-或5，7，8-三羥基或3＇，4＇-二羥基，則吸收帶將隨放置的延長而逐漸衰退。</p><p>　?、鄱潼S酮、二氫黃酮醇帶Ⅱ向紅位移的大小取決于是否有游離的5-OH。</p><p><b>　　2．乙醇鈉&

36、lt;/b></p><p>　?、僖掖尖c使7-羥基異黃酮的帶Ⅱ向紅位移6～20nm，但6-位有含氧取代基時，乙醇鈉幾乎不能使帶Ⅱ產(chǎn)生移動。4＇，5，6，7-四羥基異黃酮的紫外光譜隨時間延長而衰退。</p><p>　?、谝掖尖c使5，7-二羥基二氫黃酮和5，7-二羥基二氫黃酮醇帶Ⅱ向紅位移34～37nm，而其相應(yīng)的5-去氧化合物則移動51～58nm。5，6，7-三羥基二氫黃酮的紫外光

37、譜隨時間延長而衰退。</p><p><b>　　3．乙醇鈉/硼酸</b></p><p>　　不能用NaOAc/H3BO3對異黃酮、二氫黃酮和二氫黃酮醇類的紫外光譜的影響來檢查B環(huán)鄰位二羥基，因為它們的B環(huán)與主要發(fā)色團缺少有效的共軛。但它們中的A環(huán)有6，7-二羥基時，加入NaOAc/H3BO3后使帶Ⅱ向紅位移10～15nm。</p><p>

38、　　4．三氯化鋁和三氯化鋁/鹽酸</p><p>　?、佼慄S酮、二氫黃酮（可能也包括二氫黃酮醇）的A環(huán)如有鄰二羥基（6，7-或7，8-，不包括5，6-），則帶Ⅱ在AlCl3中比在AlCl3/HCl中向紅位移11～30nm。</p><p>　?、谟?-羥基的異黃酮，其帶Ⅱ在AlCl3/HCl存在下與在甲醇中的光譜相比，向紅位移10～14nm，而有5-羥基的二氫黃酮和有5-羥基的二氫黃酮醇類

39、的帶Ⅱ在同樣情況下向紅位移20～26nm。目標(biāo)檢測：黃酮類化合物的鑒別與結(jié)構(gòu)測定現(xiàn)在多依賴于譜學(xué)的綜合解析，而化學(xué)方法和色譜方法已降至輔助地位。未知黃酮類化合物的鑒定，多在測定分子式的基礎(chǔ)上，利用PPC或TLC得到的Rf值或hRf值與文獻比較或分析對比樣品在甲醇溶液中及加入各種診斷試劑后得到的紫外及可見光譜進行剖析。同時，對于化合物的顏色反應(yīng)，以及在提取分離過程中所表現(xiàn)的行為（如溶解度、酸或堿中的溶解情況、鉛鹽沉淀等）也應(yīng)注意分析。但這

40、些方法均有一定局限性，并曾導(dǎo)致得出過一些錯誤結(jié)論。質(zhì)子核磁共振（1H—NMR）因為可定量測定H的個數(shù)，以及根據(jù)質(zhì)子的化學(xué)位移和芳香氫核之間的自旋偶合所提供的信息（裂分?jǐn)?shù)目及偶合常數(shù)大?。纱_定黃酮母核上的取代模式。近來由于儀器分辨率的不斷改進，加以同核去偶、溶劑位移以及核磁共振技術(shù)的使用，1H－NMR譜的測定對分析天然黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)已經(jīng)成為一種非常重要的手段。但是正如以后談到的那樣，在黃酮類化合物的1H</p>&l

41、t;p>　　實際工作中常常根據(jù)需要，靈活、綜合運用上述方法和手段，并輔以必要的化學(xué)方法，以求結(jié)構(gòu)鑒定獲得滿意的結(jié)果。 </p><p><b>　　2.實驗方案設(shè)計</b></p><p><b>　　2.1實驗?zāi)康?lt;/b></p><p>　　2.1.1了解槲皮素的黃酮化合物結(jié)構(gòu)及其物化性質(zhì)</p>

42、<p>　　2.1.2能夠運用溶劑萃取法提取天然產(chǎn)物中的槲皮素</p><p>　　2.1.3掌握聚酰胺色譜柱法分離黃酮化合物</p><p>　　2.1.4掌握黃酮化合物的多種結(jié)構(gòu)測定方法</p><p>　　2.1.5熟悉紫外光譜和紅外光譜在黃酮結(jié)構(gòu)鑒定中的應(yīng)用</p><p><b>　　2.2實驗原理</

43、b></p><p>　　槲皮素（quercetin）：C15H10O7·2H2O，黃色結(jié)晶，mp313～314℃（2分子結(jié)晶水），316℃（無水物）。能溶于冷乙醇（1：290），易溶于沸乙醇（1：23），可溶于甲醇、乙酸乙酯、冰醋酸、吡啶、丙酮等；難溶于水、苯、石油醚等溶劑。</p><p><b>　　圖2 </b></p><

44、p>　　因此可運用石油醚、氯仿等有機溶劑萃取的方法把黃酮類化合物提取出來。</p><p><b>　　2.3儀器與藥品</b></p><p>　　80%乙醇溶液，石油醚，氯仿，25%HCL，乙酸乙酯，苯，甲醇，2%氯化鋯，枸櫞酸溶液，鎂粉，</p><p>　　三口燒瓶，回流管，電動攪拌器，分液漏斗，燒杯玻璃棒，電熱恒溫水浴鍋，電熱套

45、，聚酰胺色譜柱，紫外光燈，紫外分光光度計，紅外光譜儀，高效液相色譜儀</p><p><b>　　2.4實驗步驟</b></p><p><b>　　2.4.1萃取</b></p><p><b>　　圖3</b></p><p>　　2.4.2聚酰胺色譜法分離</p&g

46、t;<p><b>　　圖4</b></p><p>　　2.4.3實驗具體操作與時間安排</p><p><b>　　表2</b></p><p><b>　　2.5結(jié)構(gòu)鑒定</b></p><p>　　1.熔點315～317℃ ，(分解)紫外燈下顯蘭色熒光，加

47、AlCl3乙醇溶液螢光變黃綠色，鹽酸一鎂粉反應(yīng)顯紅色，a-萘粉濃硫酸反應(yīng)不顯紫色。</p><p>　　鋯一枸櫞酸反應(yīng)：當(dāng)加2%氯化鋯甲醇液時顯黃色，再加2 %櫞酸甲醇液用水稀釋黃色不褪。</p><p>　　2.紫外光譜UV：λmax，nm，255，301sh 370(MeOH)；241sh，331，412(NaOMe)；271，342sh，446(AlCl3)；266，302sh，35

48、9，427(AlCl3／HCl)；258sh，270，324，382(NaCAC)；260，386(NaCAC／H3BO3)，與槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品的紫外光譜一致。</p><p>　　3.紅外光譜IR νmax cm-1 3459—3284(OH)，1670(c= 0)</p><p>　　4.HPTLC(高效薄層層折)：展開劑為苯：乙酸乙酯：甲酸(40：10：5)，PA—TLC(聚酰胺薄膜層析

49、)：展開劑為苯：甲醇(1：1)，所得斑點的Rf值與顯色螢光皆與槲皮素標(biāo)準(zhǔn)品一致。</p><p>　　根據(jù)以上論據(jù)確定該化臺物為槲皮素。</p><p><b>　　3.結(jié)語</b></p><p>　　本論文以香椿葉為原料，對香椿葉中的黃酮類化合物進行提取、分離、純化、結(jié)構(gòu)鑒定。萃取的方法提取香椿葉中的槲皮素，聚酰胺色譜法分離得到槲皮素。該分

50、離方法方便快捷，綠色節(jié)儉，具有一定的可行性。槲皮素是一種天然的黃酮類化合物，具有廣泛的生理活性。槲皮素可擴張冠狀血管，降低血脂，抗血小板聚集，抗炎和抗氧自由基等。近年來槲皮素對腫瘤的化學(xué)預(yù)防作用和治療作用日益受到人們的重視。</p><p><b>　　參考文獻</b></p><p>　　[1]《從槐米中提取槲皮素的研究》 駱陽葆 第28卷第2期

51、2007年1月</p><p>　　[2]Mason T. J..Chemistry with ultrasound (Critical reports on applied chemistry :V28)[M].London and New York, ElsevierScience Publishers Ltd 1990, 4-6</p><p>　　[3]王昌利，楊景亮，宋小妹.超聲

52、技術(shù)在中草藥提取方面的應(yīng)用.陜西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報[J]. 1993, 16 (3):33-35</p><p>　　[4]張曉東，潘國鳳，呂圭源.超聲提取在中藥化學(xué)成分提取中的應(yīng)用研究進展.時珍國醫(yī)國藥.2004, 15(12):861-862</p><p>　　[5]肖崇厚，中藥化學(xué)[M].上海，上?？茖W(xué)技術(shù)出版社.2000, 1-30.</p><p>　　[6]

53、馮育林，謝平，孫葉兵，吳蓓.中藥提取工藝應(yīng)用進展.中藥材[J]. 2002,25(12):908-911</p><p>　　[7]馮年平，范廣平，韓朝陽.中藥提取技術(shù)研究進展.中國中醫(yī)藥信息雜志[J].2000, 7(10):15一16</p><p>　　[8]劉程 周汝忠．食品添加劑實用大全.北京工業(yè)大學(xué)出版社，1994</p><p>　　[9]李炳奇 廉宜

54、君.天然產(chǎn)物化學(xué)實驗技術(shù).北京化學(xué)工業(yè)出版社2012.1</p><p>　　[10]羅玲,吳凱南，吳曉?。纹に貙θ橄侔┘毎鸐CF-7 增殖及凋亡的影響 [J]．中草藥，2004.35(1)：71—73．</p><p>　　[12]向廷秀，王丕龍，高青．槲皮素對胃癌細胞SGC -79OI和 BGC- 823生長的影響 [J]_ 胃腸病學(xué) 和肝病學(xué)雜志.2003，12(6)：560—56