馬鈴薯晚疫病菌抗阿米西達(dá)突變體的誘導(dǎo)及其DNA指紋分析.pdf

1、由于馬鈴薯晚疫病菌對常用殺菌劑抗藥性的產(chǎn)生，明顯降低了化學(xué)防治晚疫病的效果。本研究從馬鈴薯晚疫病菌對殺菌新藥--阿米西達(dá)的敏感性測定、抗阿米西達(dá)菌株的誘導(dǎo)以及抗阿米西達(dá)分子標(biāo)記篩選等方面進(jìn)行研究，旨在初步評價(jià)馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達(dá)的抗性風(fēng)險(xiǎn)，并得到能夠用于鑒定阿米西達(dá)抗、感菌株的分子標(biāo)記。為阿米西達(dá)的科學(xué)使用和馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達(dá)產(chǎn)生抗藥性后治理策略的制定提供理論依據(jù)。 1．測定了采自不同地區(qū)、不同年份的30株馬鈴薯晚疫病

2、菌菌株對阿米西達(dá)的敏感性。結(jié)果表明：不同地區(qū)、不同年份的馬鈴薯晚疫病菌菌株對阿米西達(dá)均表現(xiàn)敏感，其抑制馬鈴薯晚疫病菌菌絲生長的EC<,50>值介于0.0351～0.1492μg/mL。此外，馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達(dá)和甲霜靈之間沒有正負(fù)交互抗藥性。 2．建立了馬鈴薯晚疫病菌對阿米西達(dá)的敏感基線，其EC<,50>值為0.0604±0.0226μg/mL。 3．選取5株對阿米西達(dá)敏感的馬鈴薯晚疫病菌菌株進(jìn)行阿米西達(dá)馴化抗性誘導(dǎo)

3、和人工誘變(阿米西達(dá)+紫外線)，獲得了1株對阿米西達(dá)具有穩(wěn)定的低水平抗性菌株X-DC98-3，抗性水平是野生菌株的20倍。獲得的其它對阿米西達(dá)具有低水平抗性的菌株，經(jīng)過抗性穩(wěn)定性驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，抗性程度均有不同程度的下降，抗性不穩(wěn)定。 4．利用AFLP分子標(biāo)記對阿米西達(dá)誘導(dǎo)后的抗性菌株和誘導(dǎo)前的野生敏感菌株進(jìn)行研究，從144對AFLP引物組合中篩選出8對引物組合能在誘導(dǎo)后的抗性菌株和誘導(dǎo)前的野生菌株之間擴(kuò)增出差異性條帶。其中：引物組合

4、E4/M5、E4/M8、E7/M5、E15/M6、E16/M9均能在菌株X-DC98-3與DC98-3之間擴(kuò)增出1～2條穩(wěn)定的特異條帶；引物組合E19/M4除能在菌株X-DC98-3中擴(kuò)增出一條穩(wěn)定250bp左右的特異條帶外，在菌株X-DC98-3、X-DK98-1和DK98-1中均能擴(kuò)增出170bp左右的特異條帶；引物組合E15/M19在菌株X-DC98-3和UV-HD01-4中均能擴(kuò)增出穩(wěn)定280bp左右的特異條帶；引物組合E20/