山羊骨橋蛋白基因(OPN)多態(tài)性及其與胎盤效率、繁殖性能的相關(guān)性研究.pdf

1、山羊繁殖性能是山羊重要育種指標(biāo)。提高山羊的窩產(chǎn)羔數(shù)對于保障養(yǎng)羊業(yè)持續(xù)健康發(fā)展、提高養(yǎng)羊業(yè)的經(jīng)濟(jì)效益和農(nóng)牧民養(yǎng)殖積極性都具有重要意義。由于山羊產(chǎn)羔數(shù)具有遺傳力低(h2=0.1～0.15)和負(fù)的母體效應(yīng)等特點(diǎn),多年來通過表型選擇直接提高母羊的窩產(chǎn)羔數(shù)的途徑?jīng)]有獲得較大的遺傳研究進(jìn)展。胎盤效率(placental efficiency,PE)即出生窩重與胎盤重之比,是1999年Wilson等人在對豬產(chǎn)仔數(shù)的選育研究中提出的概念,一些在豬、綿羊

2、上的研究結(jié)果表明,窩產(chǎn)仔數(shù)與PE呈正相關(guān)。在分子水平上,骨橋蛋白(osteopontin,OPN)是子宮一胎盤微環(huán)境的重要組成部分,該分子幾乎參加了生殖的全過程,包括受精、胚泡著床及胎盤形成等,OPN基因是影響胎盤性狀、繁殖性能的一個(gè)重要候選基因。然而,OPN基因能否作為山羊繁殖性狀輔助選擇的分子標(biāo)記,其與胎盤效率、繁殖性能的相關(guān)性如何,在山羊上尚未有明確的報(bào)道。本研究借鑒其它畜種的研究成果,探索山羊OPN基因遺傳多樣性及其與胎盤效率、

3、繁殖性能相關(guān)性,為建立穩(wěn)定有效的山羊繁殖力選育方法提供理論依據(jù),促進(jìn)山羊高繁新品系的選育。
　　 本研究分兩部分。第一部分,山羊胎盤效率、胎盤性狀測定及其與繁殖性能之間的相關(guān)性研究。具體方法:(1)繁殖性能測定。選取樂至黑山羊健康分娩母羊30只,測定其胎次、窩產(chǎn)羔數(shù)和窩產(chǎn)重。(2)胎盤效率、胎盤性狀測定。收集分娩后胎盤,測定胎盤重量、子葉數(shù)量和子葉重量。(3)相關(guān)性比較。比較不同個(gè)體間的胎盤性狀指標(biāo)和繁殖性能指標(biāo)之間的關(guān)系。第二

4、部分,OPN基因多態(tài)性及其與胎盤效率、繁殖性能之間的相關(guān)性研究。具體方法:(1)利用PCR-SSCP技術(shù)分析樂至黑山羊母羊共計(jì)70個(gè)樣本的OPN基因啟動(dòng)子、外顯子6、外顯子7的單核苷酸多態(tài)性(single-nucleotide polymorphism,SPN)。(2)相應(yīng)母羊的SNPs與胎盤效率、窩產(chǎn)羔數(shù)等進(jìn)行關(guān)聯(lián)和相關(guān)性分析,探索優(yōu)勢基因。主要研究結(jié)果如下:
　　 1.樂至黑山羊平均初生窩重為4682.40±3022.91

5、g(n=30),平均胎盤效率為10.45±3.51(n=30):不同個(gè)體間的胎盤效率差異極顯著(P＜0.01);在窩產(chǎn)羔數(shù)方面,高胎盤效率組顯著高于低胎盤效率組(2.56±0.44 vs1.30±O.15,P＜0.05);經(jīng)產(chǎn)組母羊的窩產(chǎn)羔數(shù)、羔羊平均重、胎盤重、子葉重和子葉均重分別為2.53±0.30,2636.27±119.57 g,622.33±57.64 g,262.80±30.38 g和2.35±0.21 g,初產(chǎn)組分別為1.

6、33±0.48,2261.60±106.85 g,288.87±32.35 g,140.53±18.11 g和1.14±0.09 g,對應(yīng)指標(biāo)相比較,差異顯著或極顯著(P＜0.05或P＜0.01);不同產(chǎn)羔類型對胎盤性狀影響顯著,隨著羔數(shù)的增加,胎盤重、子葉重和子葉均重顯著性增高(P＜0.05),子葉密度顯著性減少(P＜0.05):窩產(chǎn)羔數(shù)與胎盤效率、胎盤重、子葉重和子葉均重之間呈顯著正相關(guān)(r=0.439;r=0.845;r=0.83

7、1;r=0.603,P＜0.05或P＜0.01),與子葉密度呈顯著負(fù)相關(guān)(r=-0.539,P＜0.05):胎盤效率與子葉重、子葉均重之間呈顯著正相關(guān),與子葉密度呈顯著負(fù)相關(guān):子葉均重與子葉密度呈顯著負(fù)相關(guān)。
　　 2.樂至黑山羊OPN基因啟動(dòng)子、第6外顯子和第7外顯子均出現(xiàn)AA、AB兩種基因型。其多態(tài)信息含量(polymorphism information content,PIC)分別為0.365、0.064和0.360。X

8、2適合性檢驗(yàn)表明:樂至黑山羊在OPN基因第6外顯子位點(diǎn)維持了Hardy-Weinberg平衡(P＞0.05),在OPN基因啟動(dòng)子和第7外顯子位點(diǎn)均偏離了Hardy-Weinberg平衡(P＜0.01)。對OPN基因三個(gè)位點(diǎn)的多態(tài)性與對應(yīng)母羊的胎盤效率、繁殖性能分別做相關(guān)性分析,結(jié)果表明OPN基因啟動(dòng)子基因型AA、AB在胎盤效率上無顯著性差異(P＞0.05),在窩產(chǎn)羔數(shù)上AA基因型有高于AB基因型的趨勢,且差異顯著(P＜0.05);第6外