湖羊ESR基因的檢測及基因型與多胎性能的關(guān)系.pdf

1、雌激素受體(estrogen receptor, ESR)是一種配體激活轉(zhuǎn)錄因子家族中的核酸受體。研究報道,豬雌激素受體基因中的優(yōu)勢等位基因B基因可能與豬的高產(chǎn)仔數(shù)密切相關(guān),利用該優(yōu)勢等位基因進行育種,可加速豬群的遺傳進展。已有研究結(jié)果表明,ESR基因可能是控制小尾寒羊多胎性能的一個主效基因或與之存在緊密的遺傳連鎖。但目前尚無研究證實湖羊ESR基因的群體遺傳效應(yīng)及ESR基因的多態(tài)性與湖羊產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性。本研究擬克隆湖羊ESR基因,應(yīng)用P

2、CR-SSCP、實時熒光PCR方法研究湖羊ESR基因多態(tài)性及其群體遺傳學特征;通過數(shù)量遺傳學分析方法研究ESR基因的多態(tài)性與湖羊產(chǎn)羔數(shù)的相關(guān)性;并建立湖羊ESR基因的實時熒光PCR檢測方法。1.應(yīng)用PCR-SSCP技術(shù)分析高繁殖力綿羊品種湖羊的雌激素受體基因第一外顯子部分序列的單核苷酸多態(tài)性。結(jié)果表明:湖羊ESR基因存在3種基因型:野生純合型(AA)、突變純合型(BB)、突變雜合型(AB)。2.對檢測到的純和基因型(AA、BB)進行克隆

3、測序,BB基因型和AA基因型相比,BB基因型檢測到1處堿基突變(C→G)。比對BB基因型序列與GenBank(登錄號:X98010)公布的綿羊ESR基因的第一外顯子序列,僅在第363位點有突變(C→G),其余各堿基序列相同。3.檢測56只湖羊ESR基因的多態(tài)性,其中AA型為15只,AB型為32只,BB型為9只。統(tǒng)計結(jié)果顯示,A基因頻率為0.554,B基因頻率為0.446,AA基因型頻率為0.262,AB基因型頻率為0.571,BB基因型

4、頻率為0.161,表明了湖羊ESR基因的多態(tài)性。經(jīng)x2檢驗表明,湖羊群體的基因頻率和基因型頻率都達到了Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P＞0.05)。揭示ESR基因這個位點可能不受選育措施的影響,在選育過程中的遺傳仍然是隨機的。4.結(jié)果表明,湖羊ESR基因AB或BB基因型產(chǎn)羔數(shù)分別比AA基因型多0.98只(P＜0.01)、1.47只(P＜0.01),湖羊產(chǎn)羔數(shù)的最小二乘平均值分別為AA型1.20,AB型2.18,BB型2.67。湖

5、羊產(chǎn)羔數(shù)的數(shù)量統(tǒng)計顯示,該湖羊群體的AA型與BB型之間產(chǎn)羔數(shù)差異極顯著(P＜0.01),AA型與AB型之間產(chǎn)羔數(shù)差異極顯著(P＜0.01),BB型與AB型之間產(chǎn)羔數(shù)差異顯著(P＜0.05),ESR基因的B等位基因與湖羊高產(chǎn)羔數(shù)呈顯著正相關(guān)。同時湖羊ESR基因的B等位基因?qū)等位基因的顯性度為0.333。5.隨機選用PCR-SSCP技術(shù)測得的ESR基因的AA、BB和AB三種基因型的樣品各8個,進行SYBR GreenⅠ實時熒光PCR方法檢