乙型肝炎病毒基因型、亞型分布及與臨床關(guān)系的研究.pdf

1、背景：乙型肝炎病毒(hepatitis virus，HBV)感染是威脅人類生命建康的全球性問(wèn)題。全世界約有30億人曾感染過(guò)HBV，近3.5億人為慢性HBV 感染者。而我國(guó)約有9300萬(wàn)慢性HBV 感染者，其中慢性乙型肝炎(chronic hepatitis B，CHB)患者約2000萬(wàn)例。HBV 感染可引起急、慢性肝炎、肝衰竭、肝硬化、肝癌以致死亡。HBV的逆轉(zhuǎn)錄是利用其自身的逆轉(zhuǎn)錄酶進(jìn)行的，但該酶缺乏校正功能，在復(fù)制過(guò)程中容易發(fā)生核苷

2、酸序列的錯(cuò)誤配對(duì)，導(dǎo)致同一病毒核酸序列的差異，表現(xiàn)為不同的基因型、亞型。目前根據(jù)全基因組核苷酸序列差異≥8％或S基因序列差異≥4％可將 HBV分為A～H 8個(gè)基因型；按照全基因組序列差異≥4％而≤8％，將基因型分為不同的基因亞型。近年來(lái)研究顯示，HBV基因型和亞型具有明顯的區(qū)域分布差異。在我國(guó)大陸地區(qū)流行的HBV基因型有A、B、C、D 四種，在北方地區(qū)，以C 型為主；南方則以B 型為主；D 型存在多數(shù)地區(qū)，尤其多見(jiàn)于部分少數(shù)民族。

3、>　　 C 型主要有C1和C2 亞型，C2 亞型主要分布在北方和東南地區(qū)，C1亞型主要在南方地區(qū)；
　　 B 型中B2 亞型多見(jiàn)。目前認(rèn)為，HBV基因型、亞型可能與其相關(guān)肝病的臨床表現(xiàn)、疾病進(jìn)展、治療、轉(zhuǎn)歸有關(guān)。所以研究地區(qū)基因型、亞型的分布情況及與臨床的關(guān)系有著重要的意義。
　　 目的：了解本組資料HBV基因型、亞型的分布情況及與臨床的關(guān)系，以實(shí)現(xiàn)臨床個(gè)體化治療及管理。
　　 方法：1、2009年1月-201

4、0年3月于北京地壇醫(yī)院收集的HBV 相關(guān)肝病患者118例，入選標(biāo)準(zhǔn)：符合2000年《病毒性肝炎防治方案》診斷標(biāo)準(zhǔn)及未經(jīng)過(guò)任何抗病毒治療的患者。排除標(biāo)準(zhǔn)：合并其他肝炎病毒感染者、其他原因引起的肝臟損害者、免疫功能亢進(jìn)或低下者、血糖及腎功能異常者、妊娠等。采集空腹靜脈血10ml，分離血清后，置-20℃保存?zhèn)溆?；檢測(cè)ALT、AST、HBVDNA 定量及HBeAg 定量等。
　　 2、選取Genbank中基因A～D 型HBV 全基因組序

5、列作為參照序列設(shè)計(jì)引物，提取患者血清HBV DNA，經(jīng)巢式PCR (nt-PCR)擴(kuò)增，對(duì)瓊脂凝膠電泳結(jié)果陽(yáng)性的產(chǎn)物用雙脫氧測(cè)序法測(cè)序。所得序列與GenBanK中S基因區(qū)的64個(gè)標(biāo)準(zhǔn)亞型序列用Contig-Express、BioEdit 進(jìn)行編輯比對(duì)后，通過(guò)MEGA4 軟件構(gòu)建亞型進(jìn)化樹(shù)。
　　 3、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析不同基因型、亞型的臨床結(jié)局。
　　 結(jié)果：1. 本組118例患者中有81例C基因型（68.64％）；34例D

6、基因型（28.81％）；
　　 3例B基因型（2.54％）；C基因型發(fā)現(xiàn)C1和C2 亞型，D基因型發(fā)現(xiàn)D1和D4 亞型，B型發(fā)現(xiàn)B1和B4 亞型，以C2 （64.41％)和D4(27.97％) 亞型為主。2.C基因型尤以C2 亞型在原發(fā)性肝癌(hepatocellular carcinoma，HCC)組的患者占有較高的比例（90.00％），D基因型尤以D4 亞型在肝硬化(1iver cirrhosis，LC)患者中的比例較高（3

7、0.00％），而3例B基因型僅在CHB、LC患者中發(fā)現(xiàn)，但在CHB、LC、肝衰竭(hepatic failure，HF)、HCC 各組患者中的基因型及亞型分布無(wú)顯著差異（P＞0.05）。3.C基因型在年齡、性別、ALT、HBeAg 陽(yáng)性率、HBV DNA 定量較D 型高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。以上各臨床指標(biāo)在C2與D4 亞型中也無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＞0.05）。
　　 結(jié)論：1. 本組資料基因型以C 型為主，其次是D、