排卵相關(guān)基因表達(dá)水平與湖羊繁殖性能的關(guān)系研究.pdf

1、湖羊是世界上著名的多羔綿羊品種之一，具有繁殖力高、四季發(fā)情、性成熟早，產(chǎn)羔多、耐濕熱、耐粗飼、宜舍飼等優(yōu)良性狀。深入開展我國湖羊多胎分子機(jī)理的研究，以開發(fā)利用湖羊的多胎資源，這對于培育高產(chǎn)品種，改良現(xiàn)有低產(chǎn)品種和多樣性保護(hù)都具有重要意義。
　　 本文主要采用RT-PCR和實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)對湖羊Cox2、Has2、Tsg6和Ptx3基因mRNA在組織的表達(dá)，及其在卵巢組織的表達(dá)水平進(jìn)行分析，結(jié)果如下：
　　 1.湖羊

2、卵巢組織中Cox2基因mRNA表達(dá)水平研究
　　 本實(shí)驗(yàn)根據(jù)牛Cox2基因序列（GenBank登錄號為NC_005971）設(shè)計(jì)引物，并以湖羊卵巢組織RNA為模板，PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物為249bp；通過RT-PCR檢測Cox2基因在湖羊下丘腦、垂體、卵巢、輸卵管、子宮、心肝、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和肌肉等組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示該基因在各組織中都有表達(dá)。通過熒光定量PCR檢測湖羊低產(chǎn)組和高產(chǎn)組卵巢組織中Cox2基因的表達(dá)水平，結(jié)果顯

3、示：Cox2基因在湖羊低產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平低于其在高產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平，但兩者差異不顯著（P>0.05）。說明Cox2基因mRNA表達(dá)水平與湖羊繁殖性能可能沒有直接關(guān)系。
　　 2.湖羊卵巢組織中Has2基因mRNA表達(dá)水平研究
　　 本實(shí)驗(yàn)根據(jù)牛Has2基因序列（GenBank登錄號為NC_007312）設(shè)計(jì)引物，并以湖羊卵巢組織RNA為模板，PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物為158bp；通過RT-PCR檢測Has2基因在

4、湖羊下丘腦、垂體、卵巢、輸卵管、子宮、心肝、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和肌肉等組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示該基因在各組織中都有表達(dá)。通過熒光定量PCR檢測湖羊低產(chǎn)組和高產(chǎn)組卵巢組織中Has2基因的表達(dá)水平，結(jié)果顯示：Has2基因在湖羊低產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平高于其在高產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平，兩者差異極顯著（P<0.01）。說明Has2基因mRNA表達(dá)水平與湖羊繁殖性能有一定的關(guān)系。
　　 3.湖羊卵巢組織中Tsg6基因mRNA表達(dá)

5、水平研究
　　 本實(shí)驗(yàn)根據(jù)牛Tsg6基因序列（GenBank登錄號為NC_009161）設(shè)計(jì)引物，并以湖羊卵巢組織RNA為模板，PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物為197bp；通過RT-PCR檢測Tsg6基因在湖羊下丘腦、垂體、卵巢、輸卵管、子宮、心肝、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和肌肉等組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示該基因只在湖羊下丘腦、卵巢、子宮和心臟組織中表達(dá)，在其他組織中均未檢測到表達(dá)；通過熒光定量PCR檢測湖羊低產(chǎn)組和高產(chǎn)組卵巢組織中Tsg6基因

6、的表達(dá)水平，結(jié)果顯示：Tsg6基因在湖羊低產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平低于其在高產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平，兩者差異極顯著（P<0.01）。說明Tsg6基因mRNA表達(dá)水平與湖羊繁殖性能有一定的關(guān)系。
　　 4.湖羊卵巢組織中Ptx3基因mRNA表達(dá)水平研究
　　 本實(shí)驗(yàn)根據(jù)牛Ptx3基因序列（GenBank登錄號為NC_007299）設(shè)計(jì)引物，并以湖羊卵巢組織RNA為模板，PCR擴(kuò)增，產(chǎn)物為279bp；通過RT-PCR檢測P

7、tx3基因在湖羊下丘腦、垂體、卵巢、輸卵管、子宮、心肝、肝臟、脾臟、肺臟、腎臟和肌肉等組織中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示該基因下丘腦、垂體、卵巢、輸卵管、子宮、心臟、肝臟、腎臟和肌肉組織中表達(dá)，在脾臟和肺臟組織中均未檢測到表達(dá)；通過熒光定量PCR檢測湖羊低產(chǎn)組和高產(chǎn)組卵巢組織中Ptx3基因的表達(dá)水平，結(jié)果顯示：Ptx3基因在湖羊低產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平低于其在高產(chǎn)組卵巢組織中的表達(dá)水平，兩者差異極顯著（P<0.01）。說明Ptx3基因mRNA