應(yīng)用ISSR與SRAP分子標(biāo)記繪制紅麻與蓖麻DNA指紋圖譜.pdf

1、紅麻與蓖麻都是我國重要的經(jīng)濟(jì)作物，為深化種質(zhì)資源研究和建立基因資源DNA指紋圖譜數(shù)據(jù)庫，本文以國內(nèi)外84份紅麻和81份蓖麻品種資源為供試材料，在其基因組DNA提取的工作基礎(chǔ)上，分別進(jìn)行ISSR和SRAP多態(tài)性引物篩選，并用所篩選出的多態(tài)性較好的28個ISSR引物和26對SRAP引物組合，分別對供試紅麻和蓖麻材料進(jìn)行PCR擴(kuò)增和標(biāo)記分析，建立起供試材料電泳擴(kuò)增條帶指紋數(shù)據(jù)庫的EXCEL圖。根據(jù)指紋圖譜唯一性原則，采用自行開發(fā)的DNA指紋數(shù)

2、據(jù)分析軟件，繪制出供試材料的指紋圖譜。獲得了以下結(jié)果： 1．紅麻種質(zhì)資源ISSR分子標(biāo)記分析：以84份紅麻種質(zhì)資源為供試材料，從UBC807—UBC890等80個ISSR引物中，篩選出28個ISSR多態(tài)性引物，對供試84份紅麻種質(zhì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出230條譜帶，平均每個多態(tài)性引物擴(kuò)增出6.61條譜帶，其中多態(tài)性譜帶185條，多態(tài)性條帶比率為80.43％，表明我國保存的紅麻種質(zhì)資源遺傳多樣性較豐富。 2．紅麻種質(zhì)資源

3、DNA指紋圖譜繪制：以供試84份紅麻種質(zhì)資源材料遺傳多樣性ISSR多態(tài)性引物PCR擴(kuò)增譜帶為基礎(chǔ)，用編程的基于圖像處理的DNA指紋圖譜分析軟件，從28個多態(tài)性好的ISSR引物中，篩選出UBC813、825、836、888、889等5個多態(tài)性引物，繪制出82個紅麻品種的DNA指紋圖譜，可作為紅麻品種的指紋圖譜標(biāo)識分子身份證。 3．蓖麻種質(zhì)資源SRAP分子標(biāo)記分析：以81份蓖麻品種資源為材料，用篩選出的20對SRAP多態(tài)性上下引物組

4、合，對供試材料進(jìn)行PCR擴(kuò)增，共擴(kuò)增出263條譜帶，平均每對引物擴(kuò)增出10.7條多態(tài)性譜帶，其中多態(tài)性條譜214條，多態(tài)性比率為81.37％，表明我國保存的蓖麻種質(zhì)資源遺傳多樣性較高。 4．蓖麻種質(zhì)資源DNA指紋圖譜繪制：以供試81份蓖麻種質(zhì)資源遺傳多樣性SRAP多態(tài)性引物為PCR擴(kuò)增譜帶為基礎(chǔ)，用編程的基于圖像處理的DNA指紋圖譜分析軟件，篩選出M8E10、M1E7、M6E3、M4E1、M1E11、M6E9、M16E17等8個