基于ISSR標(biāo)記的不同鳳凰單叢茶品種（系）DNA指紋圖譜的構(gòu)建.pdf

1、鳳凰單叢茶產(chǎn)于廣東省潮州市鳳凰鎮(zhèn)鳳凰山，經(jīng)單株（叢）采收、單株（叢）加工而得名，以滋味濃醇鮮爽，香氣似天然花果香著稱，在國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)享有盛譽(yù)。鳳凰單叢茶的分類方式多樣，其中以成茶香型分類使用最為普遍，但這種方式又帶有明顯的人為因素，尚無科學(xué)的依據(jù)；同時(shí)，在鳳凰茶的實(shí)際種植中，生產(chǎn)者往往在遺傳背景不甚明了的情況下對(duì)茶樹進(jìn)行嫁接和雜交，導(dǎo)致茶樹品種名稱混雜繁多，品質(zhì)良莠不齊，產(chǎn)生了大量的同物異名和同名異物的現(xiàn)象，增加了在實(shí)際生產(chǎn)和研究中對(duì)鳳凰

2、單叢茶品種（系）進(jìn)行準(zhǔn)確地鑒定和區(qū)分的難度。針對(duì)鳳凰單叢茶所存在的這些問題，本項(xiàng)研究利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)，在分子水平上探討了傳統(tǒng)的成茶香型的分類方式，并針對(duì)鳳凰單從茶現(xiàn)有并普遍存在的品種（品系）建立其相對(duì)應(yīng)的DNA指紋圖譜，并結(jié)合每個(gè)品種（系）的香型、海拔、ISSR-PCR擴(kuò)增數(shù)據(jù)圖片等，最終形成指紋圖譜二維編碼，旨在能夠快速、準(zhǔn)確地對(duì)不同鳳凰單叢茶品種（系）進(jìn)行分類和鑒定。在此基礎(chǔ)，探討了傳統(tǒng)的成茶香型分類方式的分子基礎(chǔ)。研究得出

3、以下結(jié)果：
　　1、得到6條可用于鑒定未知鳳凰單叢茶的核心引物：以4份鳳凰單叢茶品種為材料，利用ISSR分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)UBC802-UBC899等58條ISSR引物進(jìn)行篩選，得到了12條多態(tài)性好的ISSR引物。在確定引物最佳退火溫度后，利用這12條ISSR引物對(duì)39份鳳凰單叢茶品種（系）進(jìn)行了擴(kuò)增，結(jié)果顯示，從中篩選出的6條核心引物共擴(kuò)增出84條帶，平均每個(gè)引物擴(kuò)增出14條帶，其中多態(tài)性條帶78條，多態(tài)性條帶比例為92.86％，多

4、態(tài)信息量平均為0.9456，其中引物UBC843多態(tài)性最為豐富，品種相似性系數(shù)在0.4063-0.9836之間。
　　2、尚未發(fā)現(xiàn)成茶香型的遺傳基礎(chǔ)：通過對(duì)傳統(tǒng)的成茶香型分類方式與本實(shí)驗(yàn)6條核心引物聚類分析結(jié)果的比較顯示，除桂花香的兩個(gè)品種19與20，在聚類中是聚在一起的，其余同一香型的品種并未發(fā)現(xiàn)在分子水平存在著更大的一致性。因此推斷，不同成茶香型的差異可能是在后基因組表達(dá)、基因調(diào)控的差異，或者是加工技術(shù)的不同而引起的。

5、　　3、建立了鳳凰茶DNA指紋代碼和二維編碼：為將39份鳳凰單叢茶品種全部區(qū)分開，對(duì)6條核心引物進(jìn)行組合，發(fā)現(xiàn)在15組核心引物組合中，UBC827/UBC846的組合鑒別效率最高，品種最大相似性系數(shù)為0.9375，品種聚類區(qū)分率為100%，而引物組合UBC-843/UBC-856的鑒別效率最低，品種最大相似性系數(shù)為1，品種聚類區(qū)分率為74.36%，有10個(gè)品種無法區(qū)分；通過綜合品種名稱、國(guó)家地區(qū)編號(hào)、采樣地點(diǎn)、高效核心引物組合名稱以及I