玫瑰遺傳多樣性的SRAP分析與品種指紋圖譜構(gòu)建.pdf

1、玫瑰（Rosa rugosa）是薔薇屬重要的觀(guān)賞灌木，具有重要的觀(guān)賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，也是薔薇屬植物育種的重要親本。本研究以4 份野生玫瑰種質(zhì)、46個(gè)玫瑰品種、2個(gè)月季品種、2個(gè)薔薇品種和2個(gè)黃刺玫品種為材料，以SRAP分子標(biāo)記為研究方法，對(duì)玫瑰的遺傳多樣性及其與近緣種植物的親緣關(guān)系進(jìn)行了研究，在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了玫瑰品種的指紋圖譜，為雜交育種的親本選擇、品種鑒定、新品種保護(hù)、品種分類(lèi)等奠定了基礎(chǔ)。
　　 主要研究結(jié)果如下：
　

2、　 1.在正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)上得到了玫瑰最適的SRAP-PCR 反應(yīng)體系，即在25μL反應(yīng)體系中，含有10×PCR buffer 2.5μL，Mg2+2.0 mmol/L，dNTPs 0.20 mmol/L，Taq酶1.5U，引物0.25 μmol/L，模板1.0 ng/μL，其中，各因素對(duì)PCR 反應(yīng)的影響從大到小依次為：Taq 酶，dNTPs，引物，Mg2+，模板；擴(kuò)增程序?yàn)?4℃預(yù)變性5 min；94℃變性1 min,35℃退火

3、1 min,72℃延伸1 min，進(jìn)行5個(gè)循環(huán)；94℃變性1 min，50℃退火1 min,72℃延伸1 min 進(jìn)行30個(gè)循環(huán)；72℃延伸10 min,4℃保存。
　　 2.從100 對(duì)引物中篩選出了能穩(wěn)定擴(kuò)增的15 對(duì)引物，利用這15 對(duì)引物對(duì)試驗(yàn)材料進(jìn)行了擴(kuò)增，共擴(kuò)增出264個(gè)位點(diǎn)，其中227個(gè)為多態(tài)性位點(diǎn)，多態(tài)性比率為85.98％，平均每對(duì)引物擴(kuò)增出17.6個(gè)位點(diǎn)和15.13個(gè)多態(tài)性位點(diǎn)；有效等位位點(diǎn)數(shù)在1.3854～1

4、.6687之間，均值為1.5548；Nei's 遺傳多樣性指數(shù)(H)在0.2068～0.3763之間，均值為0.3187；Shannon 信息指數(shù)(I)在0.2296～0.5520之間，均值為0.4705。
　　 3.供試材料之間的遺傳相似系數(shù)為0.5113～0.9852之間，平均值為0.7545，說(shuō)明材料間的親緣關(guān)系較近；玫瑰與黃刺玫的遺傳相似系數(shù)在0.5205～0.6755之間，平均值為0.5981；玫瑰與月季的遺傳相似系數(shù)

5、在0.5405～0.7528之間，平均值為0.6412；玫瑰與薔薇的遺傳相似系數(shù)在0.5965～0.7528之間，平均值為0.6831，說(shuō)明玫瑰與薔薇和月季的親緣關(guān)系較與黃刺玫近，玫瑰與薔薇的親緣關(guān)系最近。
　　 4.50 份玫瑰種質(zhì)的平均Nei's 遺傳多樣性指數(shù)為0.2665，平均Shannon 信息指數(shù)為0.4033；4 份野生玫瑰的平均Nei's 遺傳多樣性指數(shù)為0.1225，平均Shannon 信息指數(shù)為0.1787,

6、46個(gè)玫瑰品種的平均Nei's 遺傳多樣性指數(shù)為0.2684，平均Shannon 信息指數(shù)為0.4059，可見(jiàn)玫瑰品種的兩項(xiàng)指標(biāo)都顯著高于野生種質(zhì)，說(shuō)明玫瑰品種之間存在著更大的變異，有著更豐富的遺傳多樣性。
　　 5.采用UPGMA法對(duì)供試材料進(jìn)行聚類(lèi)，56 份材料可以明顯分為玫瑰、薔薇和月季、黃刺玫三類(lèi)；50 份玫瑰材料可以分為中國(guó)玫瑰系、月季系、薔薇系，中國(guó)玫瑰系又分為七組，與按照株型、花型的分類(lèi)結(jié)果相一致。玫瑰的品種分類(lèi)應(yīng)