甘藍(lán)型油菜遺傳多樣性分析及核心親本的指紋圖譜構(gòu)建.pdf

1、我國是世界上最大的油菜生產(chǎn)國，也是世界上第一個(gè)成功大面積利用油菜雜種優(yōu)勢的國家。油菜雜交種由于具有產(chǎn)量高、抗逆性強(qiáng)和適應(yīng)性廣等優(yōu)點(diǎn)，深受種子企業(yè)的親睞和廣大農(nóng)民歡迎。但隨著市場商業(yè)化的不斷推進(jìn)，不法經(jīng)營者的人為摻假或以次充好以及混雜或以不正當(dāng)手段獲取育種家的親本用于生產(chǎn)雜交種，損害了農(nóng)民、企業(yè)和育種家的合法利益。因此，迫切需要建立對雜交油菜品種及其親本進(jìn)行真實(shí)性和純度鑒定的技術(shù)體系，為親本材料的知識產(chǎn)權(quán)保護(hù)和維護(hù)農(nóng)民的合法權(quán)益提供技術(shù)支

2、撐。SSR標(biāo)記由于具有共顯性、穩(wěn)定性好、遺傳方式簡單以及能檢測多個(gè)等位位點(diǎn)等優(yōu)點(diǎn)，被廣泛應(yīng)用于玉米、水稻等主要農(nóng)作物品種的純度和真實(shí)性鑒定。
　　 本研究利用SSR標(biāo)記對本實(shí)驗(yàn)室的120份甘藍(lán)型油菜種質(zhì)資源進(jìn)行分析，篩選出一批多態(tài)性豐富的SSR引物，同時(shí)構(gòu)建了骨干親本SSR-DNA的指紋圖譜，為油菜雜交種純度鑒定及其親本的真實(shí)性提供了可靠的參考依據(jù)。主要結(jié)果如下：⑴從120份材料中選取6個(gè)不同遺傳背景的材料所組成小樣本（包括2個(gè)

3、不育系、2個(gè)恢復(fù)系和2個(gè)常規(guī)品系），對本實(shí)驗(yàn)室擁有的1938對SSR引物進(jìn)行篩選，共得到多態(tài)性引物543對，經(jīng)過比較選擇出帶型清晰、穩(wěn)定的SSR引物173對。⑵用173對引物對120份甘藍(lán)型油菜材料進(jìn)行分析，共擴(kuò)增出646條帶，其中多態(tài)性條帶512條，多態(tài)性比率為80％。一對SSR引物擴(kuò)增多態(tài)性帶數(shù)為2-8個(gè)，平均為3.8個(gè);信息多態(tài)量PIC值變化范圍0.05-0.92，平均為0.61。⑶利用512條多態(tài)性條帶對120份材料進(jìn)行UMPG

4、MA聚類分析，以遺傳相似系數(shù)0.61為閥值，將120份材料分為A、B兩個(gè)大類。A類共100份材料，在相似系數(shù)0.69處劃分4個(gè)亞類，其中大部分不育系材料聚在第一亞類和第二亞類，說明不育系材料遺傳變異相對較小;而42份恢復(fù)系在兩大類中均有分布，表明恢復(fù)系材料遺傳變異比較豐富。⑷根據(jù)173對引物在其中32份核心親本中的擴(kuò)增結(jié)果，對有條帶出現(xiàn)賦值為“1”，無條帶出現(xiàn)賦值為“0”，構(gòu)建了32份甘藍(lán)型油菜核心親本的標(biāo)準(zhǔn)數(shù)字化指紋圖譜。同時(shí)初步設(shè)計(jì)