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文檔簡介
1、近年來,沿江多個省份都在進行增殖放流活動,特別是2010年湖北省進行大規(guī)模四大家魚親魚增殖放流活動以后,親魚放流的效果如何,是否會改變長江自然群體的遺傳多樣性等,成為人們十分關(guān)注的問題。因此,為了全方位、多方面更準確的評估鰱親魚放流效果以及遺傳多樣性狀況,本文利用兩種分子標記系統(tǒng)(微衛(wèi)星標記和線粒體基因組DNA分子標記),對2010年和2011年在湖北石首江段和湖北監(jiān)利江段放流的親魚以及當年在該江段采集的卵苗經(jīng)孵化培養(yǎng)后的個體進行親子鑒
2、定和遺傳多樣性分析。主要研究結(jié)果如下:
1、微衛(wèi)星多重PCR體系的建立及親子鑒定
建立3個多重PCR體系,確定最終各試劑的濃度,25μL體系中分別為:2 U Taq DNA聚合酶,0.4 mmol/L dNTPs,2.3 mmol/L Mg2+,3uL10×PCR Buffer。
2、鰱親本增殖放流效果評估
(1)2010年放流親本鰱479尾,采集野生卵苗并孵化751尾,9個微衛(wèi)星
3、標記,累積排除率99.79%,置信水平顯著且所有位點與父本匹配子代2尾,顯著且所有位點與母本匹配子代8尾。2010年放流對長江監(jiān)利江段鰱苗發(fā)生量貢獻率為1.33%。
(2)2011年放流親本鰱1144尾,采集野生卵苗并孵化546尾,14個微衛(wèi)星標記,累積排除率99.91%,置信水平顯著且所有位點與父本匹配子代21尾,顯著且所有位點與母本匹配子代16尾。2011年放流對長江監(jiān)利江段鰱苗發(fā)生量貢獻率為6.78%。
4、 3、鰱親本放流對野生群體遺傳多樣性的影響
(1)利用微衛(wèi)星標記評估2010年和2011年鰱遺傳多樣性,結(jié)果表明群體具有高的遺傳多樣性,且建立起來的組合符合親子鑒定標準。
(2)利用線粒體標記評估2010年湘江原種場樣本29尾,單倍體數(shù)17個,單倍體多樣性0.9557±0.0189,核苷酸多樣性0.202416±0.100982。
(3)利用線粒體標記評估2010年石首放流親本22尾,單倍體數(shù)1
5、4個,單倍體多樣性0.9481±0.0287,核苷酸多樣性0.058185±0.030804;采集監(jiān)利放流親本23尾,單倍體數(shù)7個,單倍體多樣性0.9170±0.0344,核苷酸多樣性0.087984±0.045471;采集監(jiān)利江段采集子代41尾,單倍體數(shù)7個,單倍體多樣性0.8707±0.0383,核苷酸多樣性0.041036±0.021789。
(4)利用線粒體標記評估2011年石首放流親本27尾,單倍體數(shù)12個,單倍
6、體多樣性0.8832±0.0398,核苷酸多樣性0.094086±0.043236:采集監(jiān)利放流親本20尾,單倍體數(shù)14個,單倍體多樣性0.9368±0.0392,核苷酸多樣性0.173238±0.088230;采集監(jiān)利江段采集子代32尾,單倍體數(shù)23個,單倍體多樣性0.9758±0.0147,核苷酸多樣性0.190632±0.094886。
(5)AMOVA分析表明變異主要來自種群內(nèi),種群間未出現(xiàn)顯著分化。FST=0.0
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