牛卵胞質(zhì)內(nèi)單精注射(ICSI)的研究.pdf

1、本研究探討不同化學(xué)激活方法，死、活精子和不同部位精子及精子的預(yù)處理對牛ICSI結(jié)果的影響，以期優(yōu)化牛ICSI的操作技術(shù)和體外培養(yǎng)條件。將冷凍解凍牛精子或睪丸精子、附睪（頭、體和尾）的精子注入體外成熟24h的牛卵母細(xì)胞中，經(jīng)體外培養(yǎng)，觀察其發(fā)育情況。研究結(jié)果如下： 試驗一，比較不同的激活方法A23187+（CHX+CD）+CHX、A23187+6—DMAP和Ionomycin+6—DMAP對牛ICSI卵的激活效果。A231874+

2、（CHX+CD）+CHX組與A23187+6—DMAP組的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率差異不顯著（60.6％和58.2％，15.1％和14.5％，4.5％和3.6％，P>0.05），Ionomycin+6—DMAP組的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率（79.3％，31.0％和14.5％）顯著高于其它兩組（P<0.05）。 試驗二，比較牛死精子和活精子對ICSI卵發(fā)育效果。兩組之間的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率均無顯著性差異（75.0％和7

3、9.4％、27.9％和30.9％、13.2％和16.2％，P>0.05）。 試驗三，比較牛不同部位精子ICSI卵發(fā)育效果。睪丸或附睪（頭、體和尾）的精子ICSI后，四組之間的卵裂率、囊胚率和囊胚孵化率差異不顯著（79.1％，79.5％，73.2％，75.0％；23.3％，20.5％，19.5％，18.2％和14.0％，13.4％，12.2％，9.1％，P>0.05）。 試驗四，研究了DTT預(yù)處理槽子對ICSI卵的發(fā)育效果

4、。（1）用DTT預(yù)處理精子1h，3h和5h，隨著處理時間的延長，3h和5h組的精子核發(fā)生解聚的比率顯著高于1h組（43.2％，49.8％和0.00％，P<0.05）。（2）用DTT預(yù)處理精子1h后用于ICSI，對照組相比，用DTT預(yù)處理精子組的解聚率和雄原核形成率顯著高于對照組（30.4％和11.6％，47.8％和27.9％，P<0.05），但對卵裂率無顯著差異（85.0％和80.0％，P>0.05），囊胚率和囊胚孵化率亦顯著提高（45