RSV CP在水稻葉綠體Rubisco SSU引導(dǎo)肽作用下的致病機(jī)制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文RSVCP在水稻葉綠體RubiscoSSU引導(dǎo)肽作用下的致病機(jī)制研究姓名：張孟倩申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：植物病理學(xué)指導(dǎo)教師：謝聯(lián)輝林麗明20090401福建農(nóng)林大學(xué)碩士學(xué)位論文AbstractRicestripediseaseisoneofthemostseriousricediseasesandoccBrsmainlyintemperateandsubtropicalareasItcauses20％“30％yi

2、eldsloseinjaponicaricegrowingregionsinChina111ecoatprotein(CP)encodedbyRicestripevirus(RSⅥisoneofthepathogenicproteinInthispapertheRubiscoSSUleaderpeptideandRSVCPgeneswereamplifiedbyPCRThefusiongenesPR—CPandPR—s—cPwereco

3、nstructedintotheexpressionvectorspGEX一4T1andpET29aInordertoadapttothetransformationsystemmediatedbyAgrobacteriumtumefaciens，RSVCPandPRCPwereligatedtothericetransformationvectorpTCK303，respectivelytoinvestigatetheeffectso

4、fchloroplastlocatedCPonthenormalphysiologyofriceplantsandpavethewayforfurtherresearchesonRSVpathogenesisPlantexpressionvectorsweretransformedtocallusderivedfrommatureembryoorriceOryzasativaLsubspjaponicaCVNipponbareusing

5、AtumefaciensEHAl05ItWasshownthatNBmediumwitll23mg／Lof2，4一Dpromotedthecallus’meristrmaticcapacityTheefficiencyofcallus’defferentiationwasgreatlyimprovedbytheaddinglOmg／LofKTand05mg／LofNAAintheregenerationmedium，andtheaddi

6、tionoflOOpMAs(acetosyringone)inagrobacteriumculturemediumeffectientlyinducedtheactivationoftheVirgeneandthuspromotedtheintegrationofforeigngenesandtransformationefficiencyThetargetgenewasdetectedbyPCRtoconfirmtheSuccesso

7、ftransformationFinally27Totransgenicplantswerepreliminarilyobtained，inwhichtherewere12onesforCPgeneand15onesforPR—CPgeneSeedSwereharvestedafterplantingoftheToandgerminatedonhygromycin(30rag／L)containgNBmediumAfter20dayso

8、fgerminationTlplantsshoweda3：1ratioofresistanttosusceptibleplants，indicatingthatthetransgeneswerestabelyintegratedintotheplantgenomePhenotypesoftransgenicriceplantswerethenobersevedWhiletheCPtransgenicplantsshowedlittlep

9、henotypicdifferenceswiththecontrol，theplantheightofthetransgenicplantsexpressingPR—CPweresignificantlyreducedThissuggestedthatCPcouldhaveansignificantimpactonthephysiologyofficeplantswhentargetedintothechloroplastsKeywor

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