柞蠶銅鋅超氧化物歧化酶基因的克隆與表達(dá)分析.pdf

1、超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase，SOD）是一類廣泛存在于生物體內(nèi)各個(gè)組織中的重要的金屬酶，它的主要作用是專一性的清除生物體內(nèi)超氧陰離子自由基（O2-），起到平衡體內(nèi)的氧自由基的重要作用從而避免了活性氧的堆積造成的對(duì)蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、DNA以及其他細(xì)胞成分的嚴(yán)重?fù)p害[2,3]超氧化物歧化酶（SOD）按照與其結(jié)合的金屬輔基的不同，主要可分為3種，分別為：Cn/ZnSOD、Mn SOD及Fe SOD[4]。而Cn/ZnS

2、OD又分為兩種類型一種是細(xì)胞內(nèi)銅鋅超氧化物歧化酶（Cn/ZnSOD）；另一種是細(xì)胞外形式成為細(xì)胞外通信超氧化物歧化酶（ECSOD），二者在催化歧化反應(yīng)時(shí)有著相同的速率與相似的動(dòng)力學(xué)常數(shù)。超氧化物歧化酶（SOD）作為生物體內(nèi)的自由基清潔劑，對(duì)它的研究有重要的理論與實(shí)際應(yīng)用價(jià)值。在理論意義上說(shuō)，超氧化物歧化酶的研究為我們更清楚地弄清物種之間的同源性與進(jìn)化關(guān)系提供參考；在實(shí)際應(yīng)用方面，超氧化物歧化酶的研究可極大地促進(jìn)超氧化物歧化酶在醫(yī)藥衛(wèi)生，

3、食品工業(yè)，化妝品，以及農(nóng)業(yè)等多種領(lǐng)域的應(yīng)用，從而更好的為人類服務(wù)。近年來(lái)，已有幾種生物的SOD基因得到了成功地克隆、表達(dá)及功能分析
　　 在絹絲昆蟲(chóng)超氧化物歧化酶的研究中，Yamamoto K（2005）和叢海峰等（2007）先后對(duì)家蠶（Bombyx Mori）和野桑蠶（Bombyx Mandarina）的銅鋅超氧化物歧化酶的基因（Cu/Zn SOD）進(jìn)行了序列解析和相關(guān)功能研究的報(bào)道。
　　 而到目前為止，柞蠶的SOD

4、基因尚未被解析，本實(shí)驗(yàn)采用RT-PCR方法首次克隆獲得了柞蠶銅鋅超氧化物歧化酶（Cu/ZnSOD）基因的ORF序列，該序列共編碼154個(gè)氨基酸，具有Cu/ZnSOD的保守性結(jié)構(gòu)特征。與家蠶（Bombyx mori）、美國(guó)白蛾（Hyphantria Cunea）、野桑蠶（Bombyx mandarina）以及果蠅（Drosophila melanogast） Cu/ZnSOD基因的同源性分別是81.5％、81.7％、81.5％、66.7％