白頭翁(Pulsatilla chinensis)對AA肉雞抗菌促生長作用機(jī)理研究.pdf

1、有研究表明，白頭翁（Publsatilla chinensis）除具有抗菌和抗病原作用外，還具有提高機(jī)體免疫力、抑制巨噬細(xì)胞分泌、抗癌、抗炎、抗毒、止瀉、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、殺滅滴蟲和球蟲、抑制腸蠕動(dòng)、抗內(nèi)毒素血癥等作用。本研究旨在確認(rèn)白頭翁素是白頭翁中抗菌主要活性成分，研究白頭翁對肉雞免疫功能、生產(chǎn)性能和生理功能的影響，探討白頭翁促生長作用機(jī)理。為進(jìn)一步開發(fā)白頭翁作抗菌飼料添加劑應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)。
　　 試驗(yàn)一水蒸氣蒸餾法制備白頭翁素

2、。稱取適量白頭翁，粉碎，加約適量水的水，置40℃水浴鍋24 h，用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀減壓蒸餾，收集蒸餾液，冷卻，除去浮在上面的不溶性雜質(zhì)，加氯化鈉，用氯仿振萃取，合并提取液，減壓蒸去溶劑，遺留灰黃色具有刺激性的油狀液體，為粗制原白頭翁素，靜置數(shù)天，重結(jié)晶，白頭翁素結(jié)晶析出。經(jīng)高效液相色譜和核磁共振分析是白頭翁素。
　　 試驗(yàn)二白頭翁浸膏對血清指標(biāo)和肉雞生產(chǎn)性能的影響。用白頭翁浸膏作為添加劑，分別選用1日齡健康A(chǔ)A肉雛雞480只進(jìn)行42

3、d的飼養(yǎng)試驗(yàn)，隨機(jī)分成5組，即基礎(chǔ)日糧組（對照）；添加白頭翁浸膏0.5％組、1％組和2％組；抗生素組。測定不同處理組肉雞的增重、飼料轉(zhuǎn)化率以及血清生化指標(biāo)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)：白頭翁浸膏能促進(jìn)肉雞生長和改善料重比，與對照組相比，2％白頭翁浸膏添加組效果最好，42d體重提高了5.42％（P<0.05），飼料轉(zhuǎn)化率改善了5.50％（P<0.05）；且提高了肉雞42d的血清總蛋白和白蛋白含量（P<0.05），T3、T4水平，GOT和GPT略有提高，但差

4、異不顯著（P>0.05）。
　　 試驗(yàn)三白頭翁抗菌作用研究。（1）體外試驗(yàn)：用白頭翁水煎液、白頭翁素通過牛津杯法作體外的抑菌試驗(yàn)，結(jié)果顯示：0.5％水煎液、1％水煎液和0.1％白頭翁素對大腸桿菌、變形桿菌、陰溝腸桿菌都有抑菌作用，其中0.1 mg/mL白頭翁素對大腸桿菌、變形桿菌抑菌圈直徑大于0.4 mg/L恩諾沙星。（2）體內(nèi)試驗(yàn)：用白頭翁浸膏作為添加劑進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，選用肉雞及分組同試驗(yàn)一。采用平板計(jì)數(shù)法統(tǒng)計(jì)肉雞盲腸大腸桿菌和

5、乳酸菌數(shù)量，觀察白頭翁對雞腸道菌群影響，通過體內(nèi)外試驗(yàn)驗(yàn)證白頭翁素抑菌一致作用。結(jié)果顯示：在前期不同濃度的白頭翁浸膏添加組中大腸桿菌數(shù)量的分別比空白組減少2.73％、8.45％和9.94％（P>0.05）；后期時(shí)白頭翁浸膏各組中乳酸菌比空白組有上升的趨勢，差異不顯著（P>0.05）。
　　 試驗(yàn)四白頭翁對肉雞免疫功能的影響。（1）體外試驗(yàn)：采用MTT法比較了100、200、400、800 mg/mL白頭翁水蒸餾液對肉雞脾淋巴細(xì)胞

6、增值的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，4種濃度白頭翁蒸餾液均能刺激ConA誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖，400、800 mg/mL濃度組呈顯著水平（P<0.05）；4種白頭翁蒸餾液在對LPS誘導(dǎo)的脾淋巴細(xì)胞增殖均有顯著增強(qiáng)作用（P<0.05）。且增殖作用隨白頭翁濃度增加而增強(qiáng)。（2）體內(nèi)試驗(yàn)：用白頭翁浸膏作為添加劑進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，選用肉雞及分組同試驗(yàn)一。分別在21、42日齡屠宰取樣，計(jì)算免疫器官胸腺、脾臟與法氏囊器官指數(shù)。結(jié)果表明：在前期，與對照組相比，添加0.

7、50％、1％白頭翁浸膏組脾臟指數(shù)提高12.84％、14.68％（P>0.05），添加0.5％，1％，2％濃度組使肉雞胸腺指數(shù)分別提高了20.98％、1.95％、12.68％（P>0.05），添加0.5％，1％，2％濃度組法氏囊指數(shù)分別提高了2.94％，12.41％，6.86％（P>0.05）；在后期，與對照組相比，0.5％、1％和2％白頭翁浸膏組使肉雞脾臟指數(shù)分別提高了9.65％、14.04％、10.52％（P>0.05），胸腺指數(shù)分別

8、提高了7.31％、3.65％，8.68％（P>0.05），法氏囊指數(shù)分別提高了47.62％、52.38％和47.62％，差異顯著（P<0.05）。
　　 試驗(yàn)五白頭翁對肉雞抗氧化功能影響的研究。用白頭翁浸膏作為添加劑進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)，選用肉雞及分組同試驗(yàn)一。分別在21、42日齡采血，測定血清中超氧化物歧化酶（SOD），谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-PX）活性。結(jié)果顯示：在前期，SOD在白頭翁浸膏添加組和對照組之活性沒有顯著變化（P>0

9、.05），GSH-PX在白頭翁浸膏添加各組均高于對照組，2％添加組值達(dá)顯著水平（P<0.05）；在后期，SOD在白頭翁浸膏各組值均顯著高于對照組（P<0.05），GSH-PX在白頭翁浸膏添加各組均高于對照組，但差異不顯著（P>0.05）。
　　 結(jié)果顯示，白頭翁素是白頭翁屬植物抑菌的主要活性成分，白頭翁具有抑制肉雞大腸桿菌生長、促進(jìn)乳酸菌生長，能夠改善菌群環(huán)境的作用；白頭翁能提高肉雞免疫器官生長、延緩淋巴器官退化，白頭翁蒸餾液能