青霉纖維素酶組份分離與纖維素生物質(zhì)預(yù)處理研究.pdf

1、纖維素生物質(zhì)是地球上最豐富的可再生資源，其資源化或能源化利用是目前國(guó)內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。蔗渣作為一種大宗糖業(yè)固體廢棄物，其開(kāi)發(fā)利用正受到越來(lái)越多的關(guān)注。 Penicillium sp.T24-2是一株降解蔗渣能力較強(qiáng)的絲狀真菌，其固態(tài)發(fā)酵所產(chǎn)粗酶液，經(jīng)陰離子交換柱DEAE-Sepharose Fast Flow層析后，分離出兩種β-葡萄糖苷酶。通過(guò)SDS-PAGE凝膠電泳分析，確定其分子質(zhì)量約分別為20 kDa、35 kDa。已純

2、化的兩種β-葡萄糖苷酶均為單亞基蛋白，其酶促最適反應(yīng)溫度分別為60℃、45℃；最適酶促反應(yīng)pH值分別為pH4.5、pH5.0。 對(duì)3，5-二硝基水楊酸(DNS)試劑測(cè)定還原糖方法的研究表明：酸、銨鹽、鎂鹽等均對(duì)DNS法測(cè)定還原糖有嚴(yán)重的干擾作用，酸與OH-結(jié)合生成水，銨鹽易形成揮發(fā)性氣體(如氨氣等)，鎂鹽可形成不溶性物質(zhì)。對(duì)纖維素酶CMC酶活力測(cè)定方法進(jìn)行研究，結(jié)果表明，酶稀釋度、酶促反應(yīng)溫度、pH、反應(yīng)時(shí)間、羧甲基纖維素鈉(C

3、MC-Na)濃度等對(duì)CMC酶活力測(cè)定有重要影響。 對(duì)堿處理蔗渣成分的研究表明，堿處理主要除去了蔗渣中的大部分中性洗滌劑溶出物以及一部分的半纖維素和木質(zhì)素。采用稀堿對(duì)蔗渣進(jìn)行預(yù)處理，研究發(fā)現(xiàn)：處理溫度與時(shí)間，堿液的種類(lèi)、濃度與添加量、以及某些鹽類(lèi)(如亞硫酸鈉等)對(duì)處理后蔗渣的酶解效果有明顯影響。選用強(qiáng)堿，在較高的處理溫度、較長(zhǎng)的處理時(shí)間、較高的濃度下，或在堿液中添加適當(dāng)濃度的亞硫酸鈉，可以大大提高處理后蔗渣的酶解效果。然而，堿處理