金華豬與長白豬β-防御素表達水平、免疫和抗氧化功能的品種差異研究.pdf

1、本課題以初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬為研究對象，通過相關試劑盒測定及熒光定量PCR方法，比較了兩個品種豬在四個日齡階段體內(nèi)防御素基因的表達量、免疫功能以及抗氧化能力，探討了它們隨日齡的變化規(guī)律以及存在的品種差異。主要研究結果如下：
　　 1.選取初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬各三頭，屠宰取各腸段樣品，熒光定量PCR法檢測各日齡階段兩個品種豬各腸段三種防御素的表達水平。結果表明，①隨日齡變

2、化趨勢：從初生到60日齡，pBD-1和pBD-3基因在兩個品種豬各腸段的表達量總體呈現(xiàn)隨日齡的變化而上升的趨勢，而pBD-2基因在兩個品種豬結腸和回腸中的表達量隨日齡的變化呈先下降后上升的趨勢。②品種間差異比較：在20日齡、40日齡和60日齡時，金華豬各腸段中三種β-防御素基因的表達量均高于長白豬。在初生和20日齡時，金華豬pBD-1基因在十二指腸的表達量極顯著高于長白豬(P<0.01)；在60日齡時，金華豬pBD-1基因在空腸、回腸和

3、結腸中的表達量顯著高于長白豬(P<0.05)，金華豬pBD-2基因在十二指腸、回腸和結腸的表達量均顯著高于長白豬(P<0.05)，金華豬pBD-3基因在十二指腸、空腸和回腸的表達量顯著高于長白豬(P<0.05)，結腸中的表達量極顯著的高于長白豬(P<0.01)，提示金華豬腸道防御素基因表達水平高于長白豬。
　　 2.選取初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬各三頭，屠宰取血清及各腸段樣品，試劑盒法和熒光定量PCR法測

4、定各日齡階段兩個品種豬血清及腸道相關免疫指標。結果表明，①隨日齡變化趨勢：從初生到60日齡，金華豬和長白豬血清中免疫球蛋白和腸道分泌型免疫球蛋白A(sIgA)的含量隨日齡的變化呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢，這與仔豬階段從母乳中獲得免疫球蛋白及斷奶應激有關；兩個品種豬腸道中細胞因子基因的表達量隨日齡的變化整體呈現(xiàn)上升趨勢；血清中補體C3、C4隨豬日齡的變化呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢，與28日齡的斷奶應激有關；血清中溶菌酶活力隨豬日齡的變化呈現(xiàn)上升的

5、趨勢。可見，隨豬的生長，免疫系統(tǒng)逐漸完善，免疫功能逐漸加強。
　　 ②品種間差異比較：金華豬的血清免疫球蛋白的含量在初生、20日齡、40日齡和60日齡四個日齡階段均高于長白豬，且在初生時，金華豬血清中IgA和IgM的含量均顯著高于長白豬(P<0.05)，而IgG在60日齡金華豬血清中的含量極顯著高于長白豬(P<0.01)；金華豬血清溶菌酶的活力在四個日齡階段均極顯著的高于長白豬(P<0.01)；細胞因子IL-6在初生金華豬的十二

6、指腸和60日齡金華豬的結腸的表達量均極顯著的高于長白豬(P<0.01)，IL-8在60日齡金華豬四個腸段的表達量顯著高于長白豬(P<0.05)，TNF-α基因在60日齡金華豬的十二指腸和結腸的極顯著的高于長白豬(P<0.01)，在40日齡和60日齡金華豬的回腸中TNF-α基因的表達量顯著高于長白豬(P<0.05)。綜上，在初生、20日齡、40日齡和60日齡四個日齡階段，金華豬體內(nèi)免疫球蛋白含量、補體水平、溶菌酶活力、sIgA含量及腸道細

7、胞因子基因表達量均高于長白豬，提示金華豬的免疫功能要高于長白豬。
　　 3.選取初生、20日齡、40日齡和60日齡的金華豬和長白豬各三頭，屠宰取血清樣品，試劑盒法測定各日齡階段兩個品種豬血清中五種抗氧化指標。結果表明：①隨日齡變化趨勢：從初生到60日齡，金華豬和長白豬血清中GSH-Px和CAT的活性隨日齡的變化呈現(xiàn)上升的趨勢，MDA的含量隨日齡的變化呈現(xiàn)下降的趨勢，而T-SOD的活性和T-AOC隨日齡的變化呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢

8、，可能受28日齡的斷奶應激影響較大。整體趨勢是金華豬和長白豬抗氧化能力隨日齡的變化，抗氧化能力提高。②品種間差異比較：金華豬血清中五個抗氧化指標初生、20日齡、40日齡和60日齡四個日齡階段均高于長白豬，表明金華豬的抗氧化能力高于長白豬。其中，金華豬血清中GSH-Px的含量在60日齡顯著的高于長白豬(P<0.05)，在20日齡和40日齡極顯著的高于長白(P<0.01)，金華豬的總抗氧化能力T-AOC在初生和40日齡也極顯著的高于長白豬(

9、P<0.01)，提示金華豬的抗氧化能力高于長白豬。
　　 4.通過對不同日齡金華豬和長白豬體內(nèi)防御素基因表達量、免疫功能以及抗氧化能力的研究揭示：隨豬日齡的變化，兩個品種豬腸道防御素表達水平、免疫功能以及抗氧化能力呈現(xiàn)上升的趨勢，整體趨勢相一致；不同品種間比較，地方優(yōu)良品種金華豬防御素基因表達水平、免疫功能以及抗氧化能力均高于國外引進品種長白豬，提示防御素的表達可能與機體的免疫和抗氧化能力有關，同時揭示抗菌肽的表達可能與豬的抗病