中國不同地區(qū)蜂膠醇提物化學(xué)組成及抗氧化活性.pdf

1、為了解中國蜂膠化學(xué)組成及抗氧化活性多樣性，并探索其原因，本文對采自中國20個省份29個地區(qū)蜂膠醇提物(Ethanol extract of propolis，EEP)的化學(xué)組成及抗氧化活性進(jìn)行研究，以期為中國蜂膠分類、溯源、標(biāo)準(zhǔn)化及產(chǎn)業(yè)化提供理論依據(jù)。 實驗采用分光光度法測定了EEP色度、特定吸收率(E1cm1％)，及總酚、總黃酮、黃酮-黃酮醇、黃烷酮含量；并選擇了23種化合物為對照品，利用高效液相色譜(High-perform

2、ance liquid chromatography，HPLC)測定了EEP中的化學(xué)組成，建立了中國蜂膠指紋圖譜；普魯士蘭法測定EEP總抗氧化能力，以1，1-二苯基-2-苦基肼(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl，DPPH)為清除對象，考查EEP清除自由基活性。研究結(jié)果如下。 1.優(yōu)化EEP提取工藝，以總黃酮為評價指標(biāo)，得到最佳提取條件為：固液比1:20，60％乙醇在35℃提取4h。再以優(yōu)化的條件制備獲得

3、不同地區(qū)EEP，采用分光光度法對其理化特性進(jìn)行分析。研究表明，不同地區(qū)EEP理化性質(zhì)及化學(xué)組成上均存在一定差異。不同地區(qū)蜂膠，各種有效成分含量不同。在EEP得率、總酚、總黃酮含量上東北和西南蜂膠很相近，華北、華中、華東和西北蜂膠相似，而熱帶蜂膠組成明顯不同。不同地區(qū)蜂膠只是有效成分的含量存在差異，但EEP中各組成比例基本一致。不同顏色的蜂膠化學(xué)組成差異比較明顯，顏色較淺的蜂膠中各種有效成分含量比較高。其中墨綠色蜂膠中總黃酮含量最高，而黃

4、綠色蜂膠中總酚含量最高。不同顏色蜂膠EEP得率相近，EEP的E1cm1％值、總黃酮和黃酮.黃酮醇含量之間存在明顯的正相關(guān)；總酚和黃烷酮含量之間存在一定的相關(guān)性。 2.選擇了23種化合物為對照品，優(yōu)化和建立了適用于對照品及EEP分離檢測的HPLC條件，并對實驗方法的可靠性進(jìn)行檢驗。結(jié)果表明，甲醇-0.1％甲酸可有效抑制峰拖尾，使峰形對稱；分組后的混合對照品在256、280nm出峰數(shù)及峰形好：對照品在各自線性范圍內(nèi)，線性關(guān)系良好，且

5、在測定時間內(nèi)性質(zhì)穩(wěn)定。各對照品加標(biāo)回收率均在92％以上，符合檢測要求。對最低檢測限進(jìn)行分析，結(jié)果表明儀器敏靈度較高。以上各項指標(biāo)表明，儀器條件和實驗方法均較可靠，可作為樣品分離、檢測條件。 3.利用優(yōu)化的HPLC條件，對不同地區(qū)EEP化學(xué)組成進(jìn)行分析；并建立了中國蜂膠指紋圖譜，盡管特征峰較少，但由于本實驗取材范圍廣，樣品化學(xué)組成差異較大，因此，該圖譜可以準(zhǔn)確的反映中國蜂膠的基本化學(xué)組成。通過對不同地區(qū)EEP中所含對照品種類及含量

6、進(jìn)行考查，結(jié)果表明，p-香豆酸、3,4-二甲氧基肉桂酸、肉桂酸、槲皮素、生松素和白楊素是所有樣品中普遍存在的，且后兩種成分含量比較高。對不同顏色及不同地區(qū)EEP進(jìn)行主成分分析，結(jié)果表明，除熱帶蜂膠外，EEP顏色與產(chǎn)地對其化學(xué)組成影響不大。 4.利用普魯士蘭法測定不同地區(qū)EEP總抗氧化能力，以DPPH作為清除對象，考查了其清除自由基活性。結(jié)果表明，不同地區(qū)EEP在這兩種活性上存在較大差異?？偪寡趸芰ψ罡邽?.47(黑龍江，HLJ

7、)，最低為0.44(云南，YN-2)。清除DPPH自由基活性指數(shù)最高為9.94(青海，QH)，最低為0.46(廣東，GD-2)。 5.EEP化學(xué)組成和抗氧化活性之間的數(shù)學(xué)模型Y總抗氧化=0.817+0.004XE1cm1％+0.001X總酚+0.002X總黃酮-0.005X黃酮-黃酮醇-0.008X黃烷酮；YDPPH=0.385+0.009XE1cm1％+0.005X總酚+0.006X總黃酮-0.017X黃酮-黃酮醇-0.008