帶有REV-LTR的MDV重組野毒株生物學特性的研究.pdf

1、近幾年來，經(jīng)MDV疫苗CVI988/Rispens疫苗免疫后仍有些雞群顯示較高的腫瘤發(fā)生率。因此，國內(nèi)外學者懷疑是否出現(xiàn)了能突破該疫苗保護作用的致病性更強的MDV野毒株。 張志等2001年從廣西某個發(fā)生腫瘤的雞群中分離到一株帶有REV-LTR的天然MDV野毒株GX0101。為了顯示免疫失敗是否與該流行株的致病性增強有關(guān)，張志(2004)和莊國慶(2006)分別在SPF雞中做了人工感染試驗，表明GX0101對雞的致病性高于強毒GA

2、。本研究在經(jīng)HVT免疫的SPF雞的攻毒試驗中，GX0101株的致死率(28.6％)和致腫瘤率(7.1％)均低于超強毒參考株Md5的致死率(63.1％)和致腫瘤率(19.0％)，但是，利用MDV特異性核酸探針對同罩飼養(yǎng)的對照雞的羽毛囊DNA檢測表明，與GX0101攻毒雞同罩飼養(yǎng)的未經(jīng)免疫未攻毒的對照雞，從攻毒后第28d就有6/15的比例從羽毛囊中檢出MDV，而與vvMd5接種雞同一隔離罩的對照雞，在35d時才在2/14的個體中檢出MDV，

3、即GX0101的橫向傳播能力大于超強毒株。在SPF雞試驗中這一結(jié)果表明，MDV的致病性不一定與橫向傳播力相平行。由此推測，顯著增高的橫向傳播能力可能就是這一整合進REV-LTR的重組病毒株能在雞群中逐漸流行開來的選擇性競爭優(yōu)勢之一。 試驗還進一步比較了斑點雜交和瓊脂擴散試驗在動物實驗中的應(yīng)用，實驗結(jié)果表明本試驗證明斑點雜交試驗在攻毒后第10d即可從羽毛囊中檢測到病毒，而瓊脂擴散試驗在攻毒后第14d檢測到病毒，斑點雜交的最高檢出率

4、為100％，而瓊脂擴散試驗的最高檢出率為80％，斑點雜交的檢出率也高于與瓊脂擴散試驗。斑點雜交的檢測靈敏度達1pg DNA水平?？梢詫Υ罅康臉悠愤M行快速，簡便，準確的檢測，可作為臨床MDV檢測的有效手段；因此，斑點雜交在實際生產(chǎn)中有很廣泛的應(yīng)用。 為了模仿并跟蹤反轉(zhuǎn)錄病毒與MDV病毒在雞體內(nèi)自然發(fā)生的基因重組，用PCR來追蹤雞體內(nèi)二種病毒發(fā)生重組的動態(tài)。根據(jù)MDV基因組上易插入REV的LTR的高頻位點的序列合成7條引物，根據(jù)RE