紅暗柳橙脂類相關(guān)質(zhì)體蛋白基因的克隆與功能初步分析.pdf

1、‘紅暗柳’甜橙(Citrus sinensis[L.] Osbeck)是一個(gè)特異性積累番茄紅素的普通甜橙紅肉突變體?！t暗柳’與‘暗柳’的比較蛋白組學(xué)研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)脂類相關(guān)質(zhì)體蛋白(PAP)的表達(dá)伴隨果實(shí)發(fā)育與色素累積顯著上升，且在‘紅暗柳’中的累積量高出暗柳兩倍以上。質(zhì)體相關(guān)蛋白是一大類古老而保守的蛋白質(zhì)家族，參與脂蛋白結(jié)構(gòu)如質(zhì)體球蛋白和原纖維的合成，與質(zhì)體分化和類胡蘿卜素形成和儲存密切相關(guān)。本研究旨在分離編碼該蛋白的基因CsPAP并通

2、過遺傳轉(zhuǎn)化的方法對其功能驗(yàn)證作初步的探索。主要工作和結(jié)果如下：
　　 1、在‘紅暗柳’中克隆到CsPAP的cDNA全長為972bp的片段，與已報(bào)道編碼PAP蛋白的基因有很高的同源性；構(gòu)建了CsPAP基因原核表達(dá)載體并在大腸桿菌中誘導(dǎo)了預(yù)測大小約為29kD的特異蛋白的表達(dá)。
　　 2、構(gòu)建了CsPAP基因的植物組成型表達(dá)載體，并以農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法對國慶1號(Citrusunshiu)愈傷組織、山金柑(Fortunellah