中華鱉輸卵管組織細(xì)胞學(xué)特征及其功能意義.pdf

1、中華鱉隸屬于爬行綱龜鱉目，是我國爬行動物的代表種之一，其進(jìn)化地位比較特殊。中華鱉營養(yǎng)豐富，具有重要的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，在養(yǎng)殖方面越來越受到人們的關(guān)注。爬行動物輸卵管具有多種功能，除了分泌形成卵及卵殼的物質(zhì)、運(yùn)輸卵子外，還具有精子儲存的功能。本文以中華鱉為模式動物，詳細(xì)探究中華鱉輸卵管組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)，并從組織細(xì)胞學(xué)角度研究了中華鱉精子儲存部位的生物學(xué)特性。為雌性爬行動物生殖系統(tǒng)的應(yīng)用生理學(xué)研究提供一定的理論依據(jù)，也為爬行動物精子儲存

2、機(jī)理的研究奠定形態(tài)學(xué)基礎(chǔ)。
　　 實(shí)驗(yàn)Ⅰ繁殖期中華鱉輸卵管的顯微和超微結(jié)構(gòu)：應(yīng)用光鏡和電鏡技術(shù)，系統(tǒng)觀察6-8月份輸卵管的組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果表明：中華鱉輸卵管由前到后可分為五部分：漏斗部，蛋白分泌部，峽部，子宮部，陰道部。繁殖期各段顯微結(jié)構(gòu)不同，各段上皮、腺體、分泌顆粒的超微結(jié)構(gòu)也存在一定的差異。漏斗部很薄，上皮呈假復(fù)層柱狀上皮，上皮之間的側(cè)微絨毛較長，且呈迷路樣分布，固有膜中無腺體。蛋白分泌部上皮為單層柱狀纖毛上皮，由高

3、柱狀的纖毛細(xì)胞和分泌細(xì)胞構(gòu)成。纖毛細(xì)胞中含少量分泌顆粒，胞質(zhì)中含大量泡狀線粒體及同心圓結(jié)構(gòu)的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)。分泌細(xì)胞和腺細(xì)胞中含大量電子密度較高的具膜結(jié)構(gòu)的分泌顆粒，偶爾發(fā)現(xiàn)有膜性透亮顆粒。峽部很短，上皮細(xì)胞中高電子密度的分泌顆粒呈團(tuán)集中分布在核上方，峽部固有膜無腺體。大量精子游離在峽部管腔中，部分精子頭部插入纖毛之間或分泌細(xì)胞頂端的胞質(zhì)中。子宮部上皮分泌顆粒電子密度不均，中心或邊緣出現(xiàn)高電子密度的致密斑。固有膜腺體多為管狀腺，腺細(xì)胞中出現(xiàn)

4、5-7層同心圓指紋樣的分泌顆粒。子宮部及子宮前部的儲精小管中也分布著大量的精子。陰道部的上皮細(xì)胞呈倒梨形或錐形，分泌顆粒的種類同子宮部，上皮細(xì)胞之間的側(cè)微絨毛呈指狀鑲嵌。腺體較子宮部少且處于收縮狀態(tài)，腺細(xì)胞中含大量的體積較大的空泡結(jié)構(gòu)。在整個(gè)輸卵管中，腺體的周圍分布著大量的肌樣細(xì)胞，其收縮利于分泌物的排放。在輸卵管的疏松結(jié)締組織中，分布著大量的肥大細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和膠原纖維。輸卵管復(fù)雜的結(jié)構(gòu)和細(xì)胞形態(tài)反映了其功能的多樣性。
　　

5、 實(shí)驗(yàn)Ⅱ中華鱉輸卵管精子儲存微環(huán)境的結(jié)構(gòu)研究應(yīng)用光鏡及電鏡技術(shù)，系統(tǒng)觀察雌性中華鱉輸卵管精子儲存情況，顯示與精子儲存有關(guān)的組織結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果表明，中華鱉輸卵管從蛋白部后部到子宮部均有精子分布和儲存，各段的精子儲存量及儲存微環(huán)境的結(jié)構(gòu)和形態(tài)存在較明顯的差異。峽部、子宮前部及此處的儲精小管中大量精子呈團(tuán)狀聚集在管腔中，電鏡下可見有些精子或精子的一部分嵌入到上皮頂端凹陷的胞質(zhì)或上皮的纖毛之間，且精子嵌入部分的細(xì)胞結(jié)構(gòu)完整。而在蛋白分泌部

6、后部和子宮后部僅有少量精子。這些區(qū)段的上皮都有纖毛和分泌細(xì)胞組成，但各段上皮的分泌顆粒存在一定差異。蛋白分泌部上皮上皮由典型的高柱狀纖毛和分泌細(xì)胞構(gòu)成，纖毛細(xì)胞中含少量高電子密度的分泌顆粒，分泌細(xì)胞中含大量分泌顆粒，這些分泌顆粒的大小、形態(tài)、電子密度均存在較大差異。蛋白分泌部固有膜中主要存在管狀腺，腺體中存在大量分泌顆粒，類似于上皮分泌細(xì)胞的分泌顆粒。峽部較窄且固有膜中無腺體，上皮排列緊密并呈迷路樣迂回分布，分泌顆粒電子密度較高且成團(tuán)集

7、中分布在核上方。子宮部前部形成垂直于管腔的儲精小管管腔中有大量精子儲存。子宮上皮及此段儲精小管上皮的分泌顆粒電子密度不均，含高密度電子致密斑，腺體中的分泌顆粒也呈現(xiàn)不同的內(nèi)部結(jié)構(gòu)。這些區(qū)段復(fù)雜的結(jié)構(gòu)及細(xì)胞形態(tài)，在精子儲存和提供營養(yǎng)方面發(fā)揮一定作用。
　　 實(shí)驗(yàn)Ⅲ繁殖期中華鱉輸卵管酶組織化學(xué)的研究應(yīng)用組織化學(xué)染色的方法，觀察堿性磷酸酶（ALP），酸性磷酸酶（ACP），碳酸酐酶（CA），過氧化氫酶（CAT），三磷酸腺苷酶（ATPas

8、e）在繁殖期中華鱉輸卵管的分布，結(jié)果表明：各種酶在繁殖期的輸卵管中均有分布，但在各段組織中的反應(yīng)部位及反應(yīng)強(qiáng)弱存在差異。ALP主要分布于血管壁和腺體胞質(zhì)，在子宮部和有精子儲存的部位，陽性反應(yīng)較強(qiáng)。ACP主要分布于上皮和腺體。CA在各段上皮的纖毛和固有膜的腺體均有分布，而在有精子儲存的這些部位反應(yīng)較弱。CAT在各段腺體呈陽性反應(yīng)，儲精小管的腺體反應(yīng)較強(qiáng)。ATPase在各段上皮纖毛及固有膜腺體陽性反應(yīng)較強(qiáng)。這些酶在輸卵管中的存在，有利于卵子

9、的形成、運(yùn)輸及精子儲存。
　　 實(shí)驗(yàn)Ⅳ中華鱉輸卵管的細(xì)胞化學(xué)的研究用免疫組織化學(xué)方法結(jié)合光鏡電鏡技術(shù)研究中華鱉輸卵管肥大細(xì)胞（MC）、雄激素受體（AR）、Cajal間質(zhì)細(xì)胞（ICC）的分布及特點(diǎn)，結(jié)果顯示：中華鱉輸卵管各段均有MC分布，多分布于疏松結(jié)締組織，兩到三個(gè)MC沿常血管或淋巴管分布。超微結(jié)構(gòu)顯示：MC的胞質(zhì)中舍大量高電子密度的分泌顆粒。AR在輸卵管各段均有分布，在繁殖季節(jié)，高濃度的雄激素受體主要出現(xiàn)在上皮纖毛細(xì)胞的頂端、

10、固有膜腺體，提示與此生殖階段上皮增厚、腺體肥大、及分泌顆粒大量形成有關(guān)。高濃度的雄激素受體出現(xiàn)在儲精小管和峽部的腔面及腺細(xì)胞的細(xì)胞核，提示雄激素受體還可能與精子儲存有關(guān)。ICC存在于輸卵管的漏斗部，子宮部和陰道部。在漏斗部，ICC分布于肌層，呈分支狀。較肌細(xì)胞電子密度低，細(xì)胞核大且彎曲，細(xì)胞含3-4條較長的突起，通過縫隙連接與肌細(xì)胞相互作用，連接處的電子密度較高。細(xì)胞質(zhì)中含較少細(xì)胞器，細(xì)胞膜表面有胞膜小凹，許多膜性小囊泡在胞質(zhì)中沿細(xì)胞膜