口蹄疫病毒在豬體內(nèi)的定位研究.pdf

1、親和素一生物素系統(tǒng)(Avidim—Biotin system,ABS)已廣泛用于免疫標記檢測技術(shù).本研究利用生物素標記抗FMDV IgG,建立了簡單、快速、特異、敏感的檢查組織材料中FMDV的ABC免疫組化染色方法.在國內(nèi)首次用全序列已知的原始毒株O/Akesu/58接種乳鼠和豬,定期采樣,制作石蠟切片,進行常規(guī)染色、間接酶標抗體法染色和ABC組化染色,觀察組織病理學變化及檢測FMDV結(jié)構(gòu)蛋白抗原和病毒相關(guān)抗原(VIA).結(jié)果表明,接種

2、FMDV的乳鼠骨骼肌呈現(xiàn)典型的凝固性壞死變化,間接酶標抗體法和ABC法染色都可以成功地檢測肌纖維細胞質(zhì)中的病毒粒子.病豬組織病理變化主要表現(xiàn)在皮膚和皮膚粘膜的棘層細胞腫大,隨著病程發(fā)展,腫大的棘細胞發(fā)生溶解性壞死和直至完全溶解.通過常規(guī)染色發(fā)現(xiàn),細胞核濃縮深染或淡染,甚至消失.結(jié)構(gòu)蛋白抗原和VIA抗原檢測表明上皮組織似乎更適合FMDV增值,接種7天后,在上皮組織的棘細胞層或多或少有病毒顆粒出現(xiàn).淋巴組織中FMDV主要存在于淋巴小結(jié).軟腭

3、、咽、腭扁桃體、肺和肺門淋巴結(jié)在7、14天時出現(xiàn)陽性顆粒,而到28天后,不再出現(xiàn)陽性顆粒.腭扁桃體中陽性染色最為顯著,吻突、舌背面、口腔粘膜、食管起始部、蹄叉、蹄冠和眼瞼僅在接種7天能檢測到少量的病毒粒子.肺組織中的病毒主要存在于肺泡巨噬細胞和肺泡膈.心肌、肝、脾、腎、乳腺和胸頭肌沒有出現(xiàn)陽性染色.發(fā)病豬在前14天存在帶毒現(xiàn)象,而在28天后,沒有檢測到病毒,說明豬不存在持續(xù)帶毒現(xiàn)象.此外,本實驗還證實,ABC組化染色是檢測FMDV和研究